杭雲娜, 孙红妍, 唐安琪, 毛俊霞, 田莹, 王许波, 郝振林, 丁君, 常亚青
为探究组织蛋白酶B(Cathepsin B,CatB)在虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)应答才女虫(Polydora)侵染中的分子功能,本研究进行了虾夷扇贝CatB基因(PyCatB)的基因组鉴定、序列特征和基因表达分析,解析了感染才女虫虾夷扇贝中PyCatB的酶活性变化特征和基因表达变化规律。结果表明:PyCatB基因全长为9 267 bp,包含9个外显子,8个内含子;其cDNA长度为1 219 bp,5′UTR长度为103 bp,3′UTR长度为99 bp;开放阅读框(ORF)长度为1 017 bp,编码338个氨基酸;PyCatB预测含有N端信号肽、前肽Propeptide C1和肽酶peptidase C1A cathepsin B 3个保守功能域;此外还具有催化三联体结构(Cys116、His284、Asn304)、Gln110氧阴离子孔、GCNGG基序及C194~C205固定残基片段形成的特征性闭塞环,这些结构对PyCatB的催化活性起着重要的作用;系统进化分析表明,各物种CatB 的进化地位与生物进化地位一致;酶活性分析显示,感染才女虫虾夷扇贝外套膜组织的CatB酶活性显著高于健康扇贝;基因表达分析表明,除闭壳肌外,PyCatB在健康虾夷扇贝成体各组织中均有不同水平的表达;研究发现,PyCatB基因参与广泛的生理过程;PyCatB在患病虾夷扇贝的外套膜不同区域的表达量均要显著高于健康扇贝,但在健康和患病扇贝血淋巴细胞中的表达无显著性差异,推测PyCatB主要通过外套膜组织参与虾夷扇贝的免疫应答过程进而抵御才女虫的侵染。本研究为虾夷扇贝应答才女虫侵染机制的解析提供了科学参考。