2019年, 第34卷, 第6期　
刊出日期：2019-12-10

  

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  盐度突变对黄条鰤幼鱼渗透调节功能的影响

  柳学周, 史宝, 刘永山, 张言祥, 高全义, 徐永江, 王滨, 姜燕, 宋雪松

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 767-775. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-296

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  为探讨盐度突变对黄条鰤Seriola aureovittata幼鱼渗透调节功能的影响, 试验设计了35、29(对照)、15、10、5、0共6个盐度组, 分别将体质量为80～120 g的黄条鰤幼鱼放入不同盐度下进行120 h的盐度突变试验, 分别在试验的6、12、24、48、72、96、120 h对黄条鰤幼鱼鳃丝中Na+/K+-ATP 酶活力，尿、血浆、血清中Na+、K+、Cl-含量，以及尿和血浆渗透压的变化进行测定分析, 并观察了盐度急性处理对黄条鰤幼鱼存活和渗透相关组织结构的影响。结果表明：盐度0条件下, 黄条鰤在25 min时出现部分死亡, 50 min时全部死亡, 其他各盐度组未出现死亡;盐度5、10、15试验组随着处理时间的延长, 黄条鰤鳃丝Na+/K+-ATP酶活力逐渐降低, 总体上与对照组有显著性差异(P<0.05), 盐度35组随着处理时间的延长, 鳃丝Na+/K+-ATP酶活力呈先上升后降低的趋势, 96 h后保持稳定且与48 h时无显著性差异(P>0.05)，各盐度组鳃丝Na+/K+-ATP酶活力在72 h或96 h后根据盐度的不同呈现“U”形分布；从尿、血浆、血清中Na+、K+、Cl-浓度变化看, 盐度5、10、15组, 在6～72 h内各离子浓度持续降低, 整体上与对照组有显著性差异(P<0.05), 并在96 h达到最低值后保持稳定，盐度35组随处理时间的延长各离子浓度均上升, 在120 h达到峰值；从渗透压的变化看, 盐度5、10和15组中尿和血浆渗透压随盐度降低和处理时间的延长显著降低(P<0.05), 而盐度35组尿和血浆渗透压随处理时间的延长而显著升高(P<0.05), 渗透压在72 h后开始趋于稳定, 在各处理时间点上均显著高于对照组(P<0.05)；即在低盐度(5、10、15)下, 随着时间的延长鳃丝Na+/K+-ATP酶活力, 尿、血浆、血清中Na+、K+、Cl-浓度，以及尿和血浆的渗透压均持续下降, 上述大部分测定指标均在96 h后趋于稳定，而在高盐度(35)下各项指标总体呈上升的趋势；扫描电镜观察显示, 与对照组相比,盐度5处理组的幼鱼鳃丝根部弯曲、 小片粘连表面褶皱增多, 皮肤分泌大量黏液物质, 肾脏表皮露出大量颗粒状物质, 而盐度35处理组损伤较轻。研究表明, 黄条鰤幼鱼对盐度变化有较强的渗透调节能力, 通过改变体液中离子含量及鳃丝Na+/K+-ATP 酶活力来调节渗透压以适应环境盐度的变化。
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  氮磷比、盐度、pH对强壮硬毛藻生长和光合作用的影响

  韩汶均, 许彦婷, 蒋阳杨, 姚亚楠, 曹学彬, 姜爱莉, 陈丽红, 邢荣莲

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 776-784. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-014

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  为探究氮磷比、盐度和pH对强壮硬毛藻Chaetomorpha valid生长和光合作用的影响，以生长于中国北方沿海刺参养殖池塘的大型丝状绿藻优势种——强壮硬毛藻为研究对象，以NH4Cl为唯一氮源，通过单因素和正交试验，定期监测不同氮磷比(8∶1、16∶1、40∶1、80∶1、120∶1)，不同盐度(24、28、30、32、34、36、40)，以及不同pH(6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)条件下，不同藻体的生长状况和最大光量子产量(Fv/Fm)。结果表明：氮磷比、pH对藻体特定生长率(SGR)的影响极显著(P< 0.01)；氮磷比为8∶1和16∶1时最有利于强壮硬毛藻SGR的增加，高氮磷比为80∶1、120∶1时对强壮硬毛藻的光合作用产生了抑制；pH 7.5～8.5为促进SGR增长的pH范围，除pH为6.5对强壮硬毛藻的光合作用产生抑制外，其他pH均促进该藻生长且对强壮硬毛藻光合作用影响均无显著性差异(P>0.05)；利于SGR增加的盐度范围为28～34，但盐度对强壮硬毛藻的光合作用的影响并不显著(P>0.05)；正交试验结果显示，氮磷比、pH、氮磷比与pH的交互作用、盐度与pH的交互作用对强壮硬毛藻SGR的影响极显著(P<0.01)。研究表明，盐度34、pH 9.0、氮磷比8∶1是强壮硬毛藻快速生长甚至暴发的环境因素。
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  空气暴露及抗氧化剂对鲤血清生化、肌肉抗氧化及品质的影响

  王连生, 李晋南, 吴迪, 范泽, 王常安, 赵志刚, 罗亮, 徐奇友

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 785-791. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-117

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  为了研究空气暴露及抗氧化剂对松浦鲤Cyprinus carpio Songpu血清生化、肌肉抗氧化及品质的影响，试验设置5个组，分别饲喂基础饲料中添加600 mg/kg维生素E(VE组)、500 mg/kg γ-氨基丁酸(GABA组)、0.5 mg/kg亚硒酸钠(Se组)、600 mg/kg VE+500 mg/kg GABA+0.5 mg/kg亚硒酸钠(复合组)的试验饲料及不添加抗氧化剂的基础饲料(对照组)，每组设3个重复，每个重复放15尾，共225尾鱼，鱼体质量为(1060±40)g，试验共进行13 d，养殖试验结束后饥饿24 h，检测空气暴露前和经空气暴露15 min后各组松浦镜鲤血清生化、肌肉抗氧化及品质相关指标。结果表明：空气暴露前，与对照组相比，饲料中添加各种抗氧化剂对松浦镜鲤血清生化指标无显著性影响(P>0.05)，但复合抗氧化剂可显著提高鲤肌肉过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性，同时显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.05)，Se可显著降低滴水损失(P<0.05)；空气暴露15 min后，与对照组相比，饲料中添加GABA、VE和复合抗氧化剂可显著降低鲤血清皮质醇及葡萄糖含量(P<0.05)，VE和复合抗氧化剂可显著提高鲤肌肉SOD、CAT活性并显著降低MDA含量(P<0.05)，Se和复合抗氧化剂可显著提高谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05)，VE及复合抗氧化剂显著降低鲤肌肉滴水损失，GABA和复合抗氧化剂显著降低鲤肌肉储存损失(P<0.05)。研究表明，VE和复合抗氧化剂均可缓解空气暴露对松浦镜鲤产生的应激胁迫，提高松浦镜鲤的肌肉抗氧化能力，并在一定程度上改善鲤的肌肉品质。
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  伯氏肩孔南极鱼和革首南极鱼皮肤微生物多样性的研究

  赵文静, 许强华

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 792-797. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-292

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  为研究南极鱼皮肤微生物群落的多样性，揭示不同种类南极鱼皮肤微生物的差异，提取伯氏肩孔南极鱼Trematomus bernacchii(TB)和革首南极鱼Notothenia coriiceps(NC)皮肤微生物基因组总DNA，采用16S rDNA分子标记和高通量测序技术检测样品微生物群落多样性。结果表明：对两种南极鱼的6个样本分别进行测序，共获得有效序列数378 517条，获得操作分类单元(OTUs)740个；两种南极鱼皮肤的优势菌门包括厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria、异常球菌-栖热菌门Deinococcus-Thermus、拟杆菌门Bacteroidetes、软壁菌门Tenericutes、放线菌门Actinobacteria等，以厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门的丰度较高；两种南极鱼皮肤的优势菌属为厌氧芽孢杆菌属Anoxybacillus、火山岩菌属Vulcaniibacterium、芽孢杆菌属Bacillus、嗜冷杆菌属Psychrobacter、青枯菌属Ralstonia、短波单胞菌属Brevundimonas、假单胞菌属Pseudomonas和嗜甲基菌属Methylophilus；同种南极鱼不同个体间皮肤微生物菌群差异较小，且伯氏肩孔南极鱼和革首南极鱼间皮肤微生物菌群无显著性差异(P>0.05)。研究表明，采用高通量测序可以精准地对两种南极鱼皮肤微生物主要菌群进行分析比较，厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门是伯氏肩孔南极鱼和革首南极鱼皮肤微生物的优势菌门，两种南极鱼间的皮肤微生物菌群无显著性差异。
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  龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究

  白杰, 周美红, 胡秀彩, 吕爱军, 叶明皓, 孙敬锋

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 798-803. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-026

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  为探明患病巴西龟Trachemys scripta elegans的病原及其生物学特征，从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌，编号为TC-1，采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列，将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp，与GenBank中模式菌株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii序列相似性分别为99.60%、98.80%；系统进化树分析显示，分离菌株与C.freundii自然聚为一支，最终鉴定分离菌株TC-1为弗氏柠檬酸杆菌；药敏试验显示，TC-1菌株对头孢哌酮、头孢他啶、萘啶酸、诺氟沙星、左氟沙星、四环素、氟苯尼考和亚胺培南等药物敏感，对阿莫西林、头孢氨苄、磺胺异恶唑和复方新诺明等耐药；人工回归感染试验显示，TC-1菌株对巴西龟有致病性，并与自然发病龟的临床症状基本一致。本研究结果可为龟类弗氏柠檬酸杆菌的分子诊断及防治提供参考依据。
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  不同大豆蛋白源替代鱼粉对洛氏鱥生长、非特异性免疫及蛋白质代谢酶活力的影响

  段晶, 吴莉芳, 王婧瑶, 张东鸣, 祖岫杰, 刘艳辉, 金昌洙

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 804-810. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-012

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  为研究不同大豆蛋白源[豆粕(SBM)、发酵豆粕(FSBM)、全脂豆粉(FFSBM)和膨化大豆粉(ESBM)]替代50%的鱼粉对洛氏鱥Rhynchocypris lagowskii Dybowski生长、非特异性免疫及蛋白质代谢酶活力的影响，采用体质量为(6.09±0.03) g的洛氏鱥幼鱼为研究对象，利用SBM、FSBM、FFSBM和ESBM分别替代50%的鱼粉蛋白，配制成5种等氮、等能的半精制饲料，试验设5组，每组设3个重复，每个重复放养40尾洛氏鱥，养殖试验周期为56 d。结果表明：SBM、FSBM、FFSBM和ESBM组洛氏鱥的终末体质量、体质量增加率、特定生长率均显著低于对照组(P<0.05)，而FSBM和ESBM组的终末体质量、体质量增加率、特定生长率显著高于SBM和FFSBM组(P<0.05)；FSBM组洛氏鱥肌肉中粗蛋白质含量与对照组无显著性差异(P>0.05)，而SBM、FFSBM、ESBM组则显著低于对照组(P<0.05)；SBM、FSBM、FFSBM和ESBM组洛氏鱥溶菌酶(LZM)活力显著低于对照组(P<0.05)，FSBM组和ESBM组间无显著性差异(P>0.05)，但二者均显著高于SBM组和FFSBM组(P<0.05)；SBM、FSBM、SBM和ESBM组洛氏鱥肝胰脏、前肠、后肠蛋白酶活力显著低于对照组(P<0.05)，SBM和FFSBM组中肠蛋白酶活力显著低于对照组(P<0.05)；SBM、FSBM、FFSBM和ESBM组洛氏鱥肝胰脏中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活力显著低于对照组(P<0.05)，FSBM组洛氏鱥GPT和GOT活力显著高于SBM、FFSBM(P<0.05)。研究表明，在洛氏鱥配合饲料中，FSBM替代鱼粉效果最好，ESBM次之，而FFSBM的效果最差。
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  中间球海胆与马粪海胆杂交后代幼胆期耐热性研究

  韩奋杰, 张伟杰, 王中, 江会杰, 陈小慧, 刘明泰, 常亚青

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 811-816. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-271

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  为探明中间球海胆Strongylocentrotus intermedius(Si)和马粪海胆Hemicentrotus pulcherrimus(Hp)杂交后代(Si♀×Hp♂和Hp♀×Si♂)的耐热性能，分别对两亲本及其正反交后代的幼海胆进行了快速升温试验，通过观察生存状态并测量生存时间，比较了两亲本及其正反交后代幼胆期的耐热指数(Upper thermal tolerance, UTT)差异，并计算了两种杂交海胆生长早期在耐热指数上的杂种优势。结果表明：在快速升温条件下，4种海胆开始死亡时的温度由高到低依次为Hp(31.5 ℃)、Hp♀×Si♂(30 ℃)、Si♀×Hp♂(29.5 ℃)和Si(28 ℃)，杂交后代Hp♀×Si♂和Si♀×Hp♂分别较中间球海胆高2、1.5 ℃，分别较马粪海胆低1.5、2 ℃；生存分析表明，总体生存时间分布由长至短依次为Hp、Hp♀×Si♂、Si♀×Hp♂和Si，4种海胆生存时间两两间均存在极显著性差异(P<0.01)；4种海胆的耐热指数由高到低依次为Hp(6864.44 ℃·h)、Hp♀×Si♂(4955.42 ℃·h)、Si♀×Hp♂(4136.46 ℃·h)和Si(1167.42 ℃·h)，不同种类的耐热指数相互之间均存在显著性差异(P<0.05)；杂交后代Hp♀×Si♂和Si♀×Hp♂在耐热指数上分别表现出23.39%和3.00%的中亲杂种优势；两种杂交后代虽然相较于马粪海胆分别表现出-39.74%～-27.81%的单亲杂种劣势，但相较于中间球海胆均表现出254.23%～324.37%的单亲杂种优势。研究表明，中间球海胆与马粪海胆正反交后代均可作为培育耐高温海胆新品种的候选种类。
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  手术植入超声波信标对鲫鱼的影响

  李泓泉, 张国胜, 李敬尧, 邢彬彬, 张涛, 董世淇, 王紫一, 殷雷明

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 817-821. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-286

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  为研究手术植入超声波信标对鱼体的影响，以体长20 cm的鲫Carassius auratus Linnaeus为研究对象，使用手术缝合器进行信标植入缝合，试验设置对照组、虚假组(手术后不植入超声波信标)和信标组(手术后植入超声波信标)，每组5尾鱼，在术后不同恢复时间(2 h、1 d、3 d和7 d)对试验鱼进行绝对临界游泳速度测量，同时记录试验鱼切口的变化情况。结果表明：在手术植入超声波信标后2 h，信标组、虚假组和对照组鲫的绝对临界游泳速度分别为(70.53±2.32)、(73.38±2.16)、(82.09±2.90)cm/s，信标组较对照组降低了14.06%(P<0.05)；在手术植入信标1 d后，信标组鲫的绝对临界游泳速度恢复到(80.58±3.64)cm/s，虚假组为(79.59±1.94)cm/s，二者与对照组均无显著性差异(P>0.05)；在7 d的试验和观察中，手术植入信标不会对鱼产生致死性影响，使用手术缝合器缝合能够保持切口闭合，缝合钉保留率为95%，切口未出现感染或坏死。 研究表明，信标植入鱼体产生负面影响的关键时间为手术后2 h，而使用手术缝合器能够有效减少缝合时间，缝合效果良好，不会对植入信标的鱼行为产生负面影响。
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  汤旺河下游瓦氏雅罗鱼的生长特征与资源合理利用

  鲁万桥, 王继隆, 刘伟, 李培伦, 崔康成, 唐富江, 尹增

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 822-827. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-298

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  为了解汤旺河下游瓦氏雅罗鱼Leuciscus waleckii的资源现状，根据2017—2018年瓦氏雅罗鱼的生物学调查数据，分析了其体质量和体长组成，计算了体质量生长的拐点年龄、临界年龄和总瞬时死亡率，估算了汤旺河下游瓦氏雅罗鱼的资源量。结果表明：汤旺河水域瓦氏雅罗鱼的体长生长方程为Lt=351.75×(1-e-0.26(t+0.5448))，体质量生长方程为Wt=840.04×(1-et+0.5448)3.173；体质量生长的拐点年龄为3.896 a，群体临界年龄为3.361 a；年总瞬时死亡率(Z)为0.945，年自然死亡率(M)为0.443，年捕捞瞬时死亡率(F)为0.502，年开发率E为53.1%；推算结果显示，汤旺河下游瓦氏雅罗鱼共计约199.27万尾，资源生物量为258.27 t；基于汤旺河下游瓦氏雅罗鱼的资源现状，计算其最适开捕体长为224.34～240.89 mm，开捕体质量为201.61～252.71 g。研究表明，汤旺河水域瓦氏雅罗鱼种群资源虽处于过度开发状态，但目前仍可通过标准捕捞规格等方式对种群资源进行合理利用。
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  捕后干藏-复水处理对太平洋牡蛎活品贮藏稳定性的影响

  徐美禄, 冷寒冰, 李亚烜, 刘 洋, 田元勇, 刘俊荣

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 828-833. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-294

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  为探究捕后太平洋牡蛎Crassostrea gigas活品贮藏稳定性，牡蛎(体质量为102.3 g±5.1 g)经海上采捕、陆地运输、运抵实验室后，研究了其贮藏(4 ℃，4 d)过程中干藏及复水对其生化特性的影响，贮藏分为干藏组和干藏-复水处理组，试验分析了牡蛎闭壳肌中ATP及其关联物含量、腺苷酸能荷(AEC)值、K值、pH值的变化，以及软体组织中蛋白质、糖原、甘油三酯含量的变化。结果表明：采捕后淡水冰降温及干藏(0～6 h)导致软体部分的糖原、甘油三酯含量分别从25.6、10.0 mg/g降至17.3、 7.5 mg/g，闭壳肌中的ATP含量也发生损失；运抵实验室进行了海水处理后，干藏过程中(6～24 h)糖原和甘油三酯含量分别恢复至24.2、 10.9 mg/g，24 h后又呈逐渐下降趋势，ATP含量也从0.76 nmol/g恢复到1.15 nmol/g，干藏-复水组的AEC值更稳定，肌肉pH值变化更小。研究表明，捕后淡水冰降温及干藏对牡蛎的贮藏稳定性影响较大，但在干藏过程中增加复水处理，有利于提高牡蛎活品贮藏稳定性。
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  壳聚糖及其组成的寡糖、单糖对胃蛋白酶消化DNA的影响

  张静, 姜晓谌, 董平, 李敬, 梁兴国

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 834-939. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-289

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  为丰富胃蛋白酶消化DNA的理论，进一步了解胃蛋白酶消化DNA的机制，研究了水产品基质中特征壳聚糖及组成其的寡糖(壳寡糖)、单糖(氨基葡萄糖、N-乙酰葡糖胺)对胃蛋白酶消化DNA的影响，并在体外模拟胃液条件下，探究了不同比例的糖与DNA对胃蛋白酶消化鲑鱼精DNA、λDNA的影响。结果表明：在生理pH下反应2 h，壳聚糖与DNA的质量比为0.5∶1时，壳聚糖即显示出对降解DNA明显的抑制效果；当壳寡糖与DNA的质量比为5∶1时，抑制效果较为明显；而氨基葡萄糖、N-乙酰葡糖胺与DNA的质量比为1∶1～240∶1时对消化均无抑制作用。研究表明，壳聚糖、壳寡糖可抑制胃蛋白酶对DNA的消化，其原因可能是带正电的糖可与带负电的DNA相互作用，或糖与胃蛋白酶发生了结合，从而对DNA消化产生保护作用。
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  核电厂海洋生物探测预警多源信息融合技术研究

  孟威, 刘杨, 李建文, 刘笑麟, 郭显久, 成志娟

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 840-845. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-020

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  为了解决核电站冷源系统海洋生物入侵问题，建立海洋生物探测预警模型，以大亚湾核电站为研究对象，从影响核电厂海洋生物入侵主要原因出发，分析了海洋生物密度、相对流速、相对风速、盐度和温度5个因素对海洋生物入侵的影响。结果表明：基于线性回归模型和模糊神经网络两种预测方法分别对多传感器的采样数据进行分析计算，得到了基于多源信息融合的海洋生物探测预警模型；通过对5种因素数据特征的融合技术，即可得到海生物入侵强度值，进而判断核电厂取水口堵塞的可能性；实测数据表明，两种算法的估计误差均可控制在[-0.2,0.2]以内，欧氏距离分别0.016 8、0.007 8。研究表明，本研究中得到的海洋生物探测预警模型预测精度高，可用于核电站海洋生物的探测预警，保证核电冷源安全。
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  扑草净在环境和生物体内的降解代谢、毒性及安全性评价研究进展

  桂英爱, 葛祥武, 孙程鹏, 丁勇, 余巍

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 846-852. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-009

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  均三氮苯类除草剂扑草净常用于农业防除禾本科及阔叶杂草，并在水产养殖业违规使用作为环境改良剂以清除青苔等有害藻类和水草，其性质稳定难降解并通过食物链对人体产生危害，是可疑的内分泌干扰物，扑草净及其种类繁多结构多样的降解代谢产物长期暴露，可能引起潜在毒性效应及水域生态环境群落的衰退。本文中系统地综述了扑草净在环境和动植物体内的降解代谢途径、各代谢产物分子结构组成及转化，扑草净对机体内分泌和免疫功能等的影响，以及对人体健康和生态环境的安全评价方法。本研究结果可为开展扑草净对人体健康和生态环境潜在危害的研究和进行准确的安全性评价提供依据。
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  水产动物TGF-β超家族基因系统进化及生物学功能研究进展

  李莹莹, 崔东遥, 程操, 孙景贤, 李丹彤, 李家祥, 常亚青, 湛垚垚

  大连海洋大学学报. 2019, 34(6): 853. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2018-244

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  转化生长因子-β(Transforming growth factor-β，TGF-β)超家族是一类普遍存在于真核生物中的调控型细胞因子，其家族成员众多，按照其序列结构特征和生物学功能的不同，主要分为TGF-β亚家族、DVR(Decapentaplegic/vg-1-related)亚家族、激活素(Activin)/抑制素(Inhibin)亚家族及其他亚家族等。大量研究显示，TGF-β蛋白超家族成员可调控细胞外基质合成、胚胎发育、器官形成、骨骼再生、组织损伤修复、机体免疫及肿瘤发生等多种生理生化过程。近年来，TGF-β超家族成员在调控水产动物细胞分化、胚胎发育、骨骼形成及免疫应答等生理生化过程中的作用受到人们的广泛关注，本文中综述了近年来水产动物TGF-β超家族成员的系统进化及生物学功能研究进展，为全面系统地了解和掌握该家族成员在水产动物繁殖、发育、生理生化及病理响应等过程中的作用提供线索和参考资料。