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大连海洋大学学报  2019, Vol. 34 Issue (6): 798-803    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-026
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龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究
白杰,周美红,胡秀彩*,吕爱军,叶明皓,孙敬锋
天津农学院 水产学院,天津市水产生态及养殖重点实验室,天津 300384

Isolationidentification and drug sensitivity of pathogenic bacterium Citrobacter freundii from diseasedturtle

BAI Jie, ZHOU Mei-hong, HU Xiu-cai*, Lü Ai-jun, YE Ming-hao, SUN Jing-feng
College of Fisheries, Tianjin Key Laboratory of Aqua-Ecology and Aquaculture, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China
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摘要 为探明患病巴西龟Trachemys scripta elegans的病原及其生物学特征,从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为TC-1,采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列,将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp,与GenBank中模式菌株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii序列相似性分别为99.60%、98.80%;系统进化树分析显示,分离菌株与C.freundii自然聚为一支,最终鉴定分离菌株TC-1为弗氏柠檬酸杆菌;药敏试验显示,TC-1菌株对头孢哌酮、头孢他啶、萘啶酸、诺氟沙星、左氟沙星、四环素、氟苯尼考和亚胺培南等药物敏感,对阿莫西林、头孢氨苄、磺胺异恶唑和复方新诺明等耐药;人工回归感染试验显示,TC-1菌株对巴西龟有致病性,并与自然发病龟的临床症状基本一致。本研究结果可为龟类弗氏柠檬酸杆菌的分子诊断及防治提供参考依据。
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白杰
周美红
胡秀彩
吕爱军
叶明皓
孙敬锋
关键词:  巴西龟  弗氏柠檬酸杆菌  16S rDNA  gyrB基因  药敏试验    
Abstract: A bacterial strain, named as strain TC-1, was isolated from the diseased turtle Trachemys scripta elegans, and was Gram-staining negative bacterium to investigate the pathogenicity and its biological characteristics of diseased turtle. The 16S rDNA and gyrB sequences of the strain TC-1 were amplified by PCR method, and subcloned into pMD18-T vector, and the products of sequencing were 1503 bp and 989 bp in length. The Blast alignments of the nuclear sequences of 16S rDNA and gyrB showed that the strain TC-1 shared the maximal similarities of 99.60% and 98.80% with Citrobacter freundiirespectively. Phylogenetic tree analysis showed that the TC-1 strain was clustered into one gourp with C.freundii, thus the TC-1 strain was identified as C.freundii. The antimicrobial susceptibility test indicated that the isolate was sensitive to cefoperazone, ceftazidime, nalidixic acid, norfloxacin, levofloxacin, tetracycline, florfenicol and imipenem, resistant to amoxicillin, cefalexin, bacteresulf and sulfamethoxazole. Artificial infection test showed that clinical signs were consistent with the symptoms of natural infected turtles. The findings will provide a scientific reference with prevention, isolation and identification of C.freundii from turtle.
Key words:  Trachemys scripta elegans    Citrobacter freundii    16S rDNA    gyrB    drug sensitivity
                    发布日期:  2019-12-10      期的出版日期:  2019-12-10
中图分类号:  S947.9  
基金资助: 国家大学生创新训练计划项目(201810061036);天津市自然科学基金资助项目(18JCYBJC29900, 16JCZDJC33500);天津市水产产业技术体系创新团队项目(ITTFRS2017009);天津农学院综投平台项目(J01009030638);天津市水产生态及养殖重点实验室开放基金资助项目(TJAE201803);天津市教委科研计划重点项目(2019ZD14)
引用本文:    
白杰, 周美红, 胡秀彩, 吕爱军, 叶明皓, 孙敬锋. 龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究[J]. 大连海洋大学学报, 2019, 34(6): 798-803.
BAI Jie, ZHOU Mei-hong, HU Xiu-cai, Lü Ai-jun, YE Ming-hao, SUN Jing-feng?.

Isolationidentification and drug sensitivity of pathogenic bacterium Citrobacter freundii from diseasedturtle

. Journal of Dalian Ocean University, 2019, 34(6): 798-803.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-026  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2019/V34/I6/798
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