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1. 面向海洋渔业捕捞生产的深度学习方法应用研究进展
张胜茂, 孙永文, 樊伟, 唐峰华, 崔雪森, 伍玉梅
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 683-695.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-099
摘要5431)   HTML31)    PDF(pc) (3946KB)(3713)    收藏
随着全球渔业资源不断衰退,各国渔业机构和区域渔业管理组织采用渔业观察员方式促进渔业可持续捕捞,但人类观察员方式成本高、覆盖率低,难以满足管理需要。近年来,深度学习新模型不断涌现和完善,其检测速度、精度均在不断增强,为其应用于海洋渔业捕捞生产监控提供了条件。本文从数据获取、数据预处理、算法设计、模型训练和精度评价等方面,总结了渔业捕捞生产监测模型的构建过程,以渔船与渔船行为、渔获物、渔场预报、船员和渔具为对象,综述了深度学习技术在海洋渔业捕捞中的应用,并提出利用迁移学习或强化学习等方法来拓展识别目标种类及增强检测模型、利用高精度的特征提取网络提高目标分类准确率、通过边缘计算技术解决电子监控数据实时解析及制定统一标准以规范电子监控在渔业管理中的应用等未来重点研究方向,以期为深度学习在海洋渔业捕捞生产中的推广应用提供科学参考。
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2. 海水鱼类淀粉卵涡鞭虫病及其防控研究进展
李志成, 钟志鸿, 李诗钰, 郭奕轩, 郭庆凯, 江飚, 李安兴
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 696-706.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-190
摘要5036)   HTML10)    PDF(pc) (5437KB)(3708)    收藏
淀粉卵涡鞭虫病俗称“海水鱼天鹅绒病”,是由一种原生鞭毛虫——眼点淀粉卵涡鞭虫 Amyloodinium   ocellatum  寄生于海水鱼类体表而引起的寄生虫病,该病发病速度快、死亡率高,可造成巨大的经济损失,严重阻碍了中国海水鱼类工厂化养殖和池塘养殖业的健康发展。本文综述了眼点淀粉卵涡鞭虫生活史、流行危害、诊断方法和防控措施等方面的研究进展,并针对海水鱼类淀粉卵涡鞭虫病研究中存在的问题,提出应加强对养殖环境的病原检测、虫株低温保存策略、筛选绿色高效的杀虫药物和疫苗研发等未来研究及防控发展建议,以期为海水鱼类淀粉卵涡鞭虫病的科学防治提供有益参考。
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3. 3D打印混凝土人工鱼礁的生物附着效果
沈璐, 张年华, 田涛, 洪鹤轩
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 584-591.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-073
摘要4962)   HTML24)    PDF(pc) (2283KB)(3623)    收藏
为研究3D打印混凝土人工鱼礁的生物附着效果,将喷头口径分别为20 mm(3D-20组)和10 mm(3D-10组)的3D打印挂板试件与相同配合比的浇筑成型挂板试件(PC组)投放到大连市黑石礁海域潮间带进行生物附着对比试验,2020年9月1日完成海上挂板,于2020年11月1日(放入海中2个月)、2021年2月1日(放入海中3个月)和2021年7月1日(放入海中5个月)时分别取样,测定附着生物的种类和生物量,第1次和第2次取样后试件均放回原处。结果表明:取样鉴定出的附着生物种类数量共计17种,每一次取样短滨螺 Littorina   brevicula 均为优势种;第3次取样的总生物量,3D-20、3D-10、PC组试件分别为561.58、215.72、203.24 g/m 2 ,3次取样中,3D-20组总生物量均显著大于3D-10组和PC组( P <0.05),而3D-10组与PC组间无显著性差异( P >0.05)。研究表明,3D打印混凝土作为人工鱼礁材料具有实用性,其打印方式造成的礁体表面不平整对于生物附着具有优越性。
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4. 滨海盐沼湿地退化机制及生态修复技术研究进展
张明亮
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 539-549.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-181
摘要4980)   HTML53)    PDF(pc) (14224KB)(3605)    收藏
滨海盐沼湿地是连接陆地和海洋的重要生态系统之一,具有重要的生态服务功能和生态价值。近年来,滨海盐沼湿地受多种因素的影响退化严重,众多学者从不同的领域对其退化原因及修复技术等进行了广泛地探索和实践,涌现了大量的研究成果。滨海盐沼湿地的退化与修复技术研究涉及生态学、水文学、环境学、生物学和河口动力学等多个学科,属于典型的交叉学科及热点研究领域。本文在分析中国滨海盐沼湿地分布特征的基础上,归纳了湿地的生长与发育过程,从盐度胁迫、水文条件、自然因素、自然演替及人类活动等方面阐述了盐沼植被与多种影响因子的相互作用,深化了对滨海盐沼湿地的退化因子及退化机理的认知,梳理了滨海盐沼湿地生态修复技术的研究现状,提出开展多学科视角下的湿地退化机制、多种技术手段运用下的立体化与连续性研究、多种生态修复技术的融合应用及互花米草入侵风险评估等未来重点研究方向,以期为滨海盐沼湿地的退化机制及生态修复研究提供科学参考。
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5. 长江安庆段刀鲚的线虫感染现状及时间特征
代培, 郭琦, 田佳丽, 马凤娇, 王银平, 刘凯
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 464-470.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-147
摘要4515)   HTML71)    PDF(pc) (3509KB)(3579)    收藏
为掌握长江刀鲚 Coilia   nasus 感染线虫的现状,于2018年4—7月在长江安庆段进行72 d的调查,共采集1 658尾样本。结果表明:刀鲚的线虫感染率为96.32%,平均感染强度为(10.69±9.67)条/尾,平均感染丰度为(10.16±9.67)条/尾;感染的刀鲚中,52.53%的个体感染线虫数量为1~9条,感染数量大于30条的个体较少,仅占3.93%;线虫寄生于刀鲚腹腔内壁及各脏器,胃、幽门盲囊和肠道内及表面均有寄生,性腺和肝脏表面有附着或嵌入组织内,各部位线虫寄生数量以肠道和幽门盲囊最多,占比分别为41.26%和31.15%;线虫抽样鉴定结果显示,刀鲚共感染线虫2属6种,其中异尖属线虫2种,宫脂属4种,优势种为派氏异尖线虫 Anisakis   simples ;不同规格刀鲚的感染强度有所差异,感染强度随刀鲚体长增加呈先升高后降低的趋势,其中,280~300 mm体长组感染率最高,260~279 mm体长组平均感染强度和感染丰度最高;调查期间,随着时间的推移,刀鲚的线虫感染指标呈先升高后降低趋势,其中6月上半月感染情况最严重。研究表明,刀鲚感染的线虫均为海水性寄生虫,感染情况较为严重,线虫的寄生对刀鲚肝脏等寄生部位产生了机械损伤,刀鲚感染线虫的情况与其规格和洄游时间有一定的相关性。
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6. 北方马口鱼全人工繁殖 胚胎与仔鱼发育研究
骆小年, 段友健, 张晓静, 阿丽达·夏木西丁, 李姣, 吴晨, 李文康, 季辰跃, 常建太
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 550-557.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-222
摘要6201)      PDF(pc) (4024KB)(3578)    收藏
为实现中国北方马口鱼 Opsariichthys   bidens 人工养殖和资源增殖,于2018—2021年在辽宁省辽阳县兴大养殖场开展了马口鱼的全人工繁殖试验,并观察了其胚胎和仔鱼发育。结果表明:马口鱼在池塘养殖条件下,雄鱼1 + 龄性成熟,雌鱼2 + 龄性成熟;在辽阳地区,池塘养殖马口鱼的繁殖期在5月10日—29日,采用注射混合催产药物(LHRH-A 2  4~8 μg/kg+DOM 4~8 mg/kg+HCG 1 000~2 000 IU/kg),人工干法授精,孵化篓+孵化桶接力孵化的方法,马口鱼的平均催产率、受精率和孵化率分别为73.8%、81.3%和78.8%;在水温18~20 ℃条件下,一次注射效应时间为25~27 h;马口鱼受精卵橙黄色,呈球形,属沉性卵,无黏性;整个胚胎发育过程历经胚盘形成期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期和出膜期7个阶段24个时期,历时约62 h 6 min,总孵化积温1 199.91 ℃·h,出膜后5~6 d可平游下塘;仔鱼1日龄全长(5.13±0.63)mm,至10日龄进入混合营养期,12日龄时卵黄囊消失,进入外源营养期,马口鱼仔鱼生长为异速生长;2018年催产获F1代水花1.4万尾,2020—2021年连续两年催产共获F2代水花212万尾。研究表明,通过生理和生态调控,在北方地区可实现马口鱼的全人工繁殖。
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7. 用于生物微环境检测的极性比例荧光探针制备及性能分析
李苗, 金潇仪, 姜硕, 孙萌, 田野
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 602-610.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-323
摘要4389)   HTML45)    PDF(pc) (5272KB)(3573)    收藏
为了构建准确检测生物微环境的极性比例荧光探针,首先通过在苊酮上引入丙二腈和N, N-二甲基基团合成以萘环荧光团为基础的探针IA,再通过氨基缩合成环反应合成极性响应型的比例荧光探针IAN,并利用 1 H NMR、 13 C NMR和HRMS等方法对探针IA、IAN进行结构及质量表征后,用紫外-可见分光光度计和荧光光谱仪对探针IA和IAN在不同极性溶剂中的吸收、荧光发射光谱进行检测。结果表明:探针IA吸收峰和荧光发射峰为单峰,其荧光发射峰强度随着溶剂极性升高而增强;探针IAN则具有双吸收和双荧光发射峰( λ em =474、552 nm),且荧光发射峰比值 I 474 nm / I 552 nm 对溶剂极性变化产生灵敏的Boltzmann函数响应;与探针IA相比,探针IAN能够作为比例荧光探针准确响应环境极性变化;运用探针IAN对患乳腺癌的小鼠和患肝胆综合症的珍珠龙胆石斑鱼组织检测显示,病变组织的荧光强度明显低于健康组织。研究表明,氨基发生缩合反应生成含氮原子杂环,可提高氮原子孤对电子与π体系的共轭程度,从而使探针分子同时产生n→π * 与π→π * 分子跃迁,基于此机理,可构建灵敏响应极性变化的比例荧光探针。
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8. 复合无磷保水剂对未漂洗海鲈鱼肉糜保水性的影响
暴伊芮, 赵前程, 吴燕燕, 王悦齐, 麦志成
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 676-682.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-178
摘要4793)   HTML45)    PDF(pc) (3269KB)(3565)    收藏
为提高海鲈 Lateolabrax   japonicus 鱼肉糜的持水品质,以未经漂洗的海鲈鱼肉糜为原料,以蒸煮损失、质构特性(texture profile analysis,TPA)及感官评定为指标,采用单因素试验和 L 9 (3 4 )正交试验研究了NaHCO 3 、海藻糖和大豆分离蛋白对其保水性的影响,确定了3种无磷保水剂添加量的最优配方,并用电镜观察了鱼肉糜产品的微观结构。结果表明:适量添加NaHCO 3 、海藻糖和大豆分离蛋白3种无磷保水剂对增强鱼肉糜保水性均有一定效果,随着添加量的增加,蒸煮损失均呈先降低后升高的趋势,添加量过大,反而对品质有一定影响并导致各指标降低;正交试验优化得到复合无磷保水剂最优配方为0.1%碳酸氢钠、0.3%海藻糖和3.5%大豆分离蛋白(均为质量分数),添加复合无磷保水剂制备的鱼肉糜产品感官评分为95.8分,蒸煮损失比未加保水剂的空白组降低了43.4%,保水效果显著提高;鱼肉糜微观结构观察显示,添加复合无磷保水剂的鱼肉组织结构较紧密、空洞小。研究表明,在未漂洗的海鲈鱼肉糜中添加复合无磷保水剂可有效提高其保水性。
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9. 一株鲤源降血糖赖氨酸芽孢杆菌的筛选鉴定及其培养基优化
于珺妃, 夏邦华, 郝其睿, 邹昊博, 王鹏, 陈中祥, 高磊, 吴松, 黄丽, 覃东立, 韩英
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 611-619.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-281
摘要5199)   HTML41)    PDF(pc) (5304KB)(3534)    收藏
为研究赖氨酸芽孢杆菌 Lysinibacillus   fusiformis 的降血糖功能并提升其代谢产物浓度,通过产蛋白酶能力试验,从鲤肠道内含物中筛选具有蛋白分解能力的细菌,并对其产二肽基肽酶-Ⅳ(DDP-Ⅳ)抑制剂的能力进行测定,筛选出的菌株经分离纯化培养后,通过16S rRNA测序和生理生化特征进行鉴定,并通过单因素试验和响应面优化试验,对菌株的培养基配方进行配比优化。结果表明:筛选到一株产DDP-Ⅳ抑制剂能力较强的益生菌CR-3(37 ℃时产率为62.35%),通过生理生化试验和构建系统进化树,将CR-3菌株鉴定为赖氨酸芽孢杆菌;响应面优化试验显示,CR-3菌株的最佳发酵培养基配方为蔗糖1.46%、CaCO 3  0.55%、NH 4 Cl 0.48%及豆粕2.10%(均为质量分数),在此条件下,发酵培养基的OD 600 nm 值较初始发酵培养基的OD 600 nm 值提升了64%。研究表明,本试验中筛选出的赖氨酸芽孢杆菌具有良好的产DDP-Ⅳ抑制剂能力,并具有潜在的降鲤血糖功能。
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10. 排血对大泷六线鱼的锁鲜增强效应
刘悦朋, 刘俊荣, 蔡琰, 齐琳, 徐昙烨, 田元勇, 曲秦坤
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 668-675.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-234
摘要5198)   HTML70)    PDF(pc) (8102KB)(3499)    收藏
为探究排血处置对锁鲜效果的增强效应,将健康活体大泷六线鱼 Hexagrammos   otakii (体质量300~400 g)分为3个处理组,常规锁鲜组即断髓速杀后立即冰水排血并冷却(poor-bled,PB),增强锁鲜组即断髓速杀后先进行常温排血,随即进行冰水冷却(well-bled,WB),另设窒息组(none-bled,NB)为市售鲜品品质对照,2个锁鲜组各自分两部分,一部分覆冰保存用于死后僵直进程的观察,另一部分置于4 ℃下贮藏用于冷藏稳定性分析,通过监测ATP、糖原及僵直进程等指标,结合感官分析对鱼品品质进行评估。结果表明:鱼体冷却前增加常温水排血处理环节,可显著改善排血效果,即增强锁鲜WB组的平均排血量显著高于常规锁鲜PB组( P <0 . 05),二者分别为(8.6±3.1)、(5.7±2.3) g/ind.;增强排血效果可以显著推迟死后僵直进程的各个阶段,冰藏期间,WB组僵直发生的时间比PB组晚约4 h,且WB组解僵发生的时间也相对晚约6 h;增强排血呈现更优越的冷藏稳定性;ATP及其关联物分析发现,WB组对于ATP有较好的保存作用,在冷藏12 h后,WB组的ATP含量为1.20 μmol/g,而PB组仅为0.58 μmol/g;增强排血处理可显著提升鱼品感官品质,冷藏期间,WB组鱼腹腔内腹部肌肉呈光亮的银白色,零排血的NB组鱼腹部肌肉有明显的淤血,而PB组鱼腹部肌肉白度介于二者之间。研究表明,增加常温水处置能够有效促进鱼体排血,且在冷藏稳定性和感官品质等方面均呈显著的锁鲜增强效应。
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11. 皮氏蛾螺黏液粗蛋白对肝癌细胞增殖及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响
于凌慧, 赵谭军, 陈思梦, 李娜, 徐静, 李春茂, 湛垚垚, 常亚青
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 592-601.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-284
摘要5101)   HTML75)    PDF(pc) (10099KB)(3473)    收藏
为明确皮氏蛾螺 Volutharpa   ampullacea  Perryi黏液粗蛋白的抗肿瘤作用,以人肝癌细胞Hep-G2和H 22 荷瘤小鼠为研究对象,采用显微观察、流式细胞术和qRT-PCR等方法,通过体外和体内试验,分析了皮氏蛾螺黏液粗蛋白对人肝癌细胞Hep-G2增殖及H 22 荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果表明:与未经处理的对照组相比,0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理组Hep-G2细胞在形态上呈现变形严重、核浓缩且核膜模糊、胞质出现空泡、线粒体肿胀及细胞表面微绒毛显著减少等现象;0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理组Hep-G2细胞中G2/M期细胞比例显著高于对照组( P <0.05);0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理12 h时,小鼠Hep-G2细胞中的细胞周期蛋白基因( CCNB 1)和细胞周期蛋白依赖性激酶基因( CDK 1)相对表达水平显著低于对照组( P <0.05);0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白注射组(预防组和治疗组,注射剂量为30 mg/kg)荷瘤小鼠体内肿瘤的平均质量极显著低于模型对照组( P <0.01)。研究表明,皮氏蛾螺黏液粗蛋白在体内外均有抗肝癌作用,具有成为海洋源抗肝癌药物的开发潜力。
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12. 基于改进YOLOv5深度学习的海上船舶识别算法
张晓鹏, 许志远, 曲胜, 邱文轩, 翟泽宇
大连海洋大学学报    2022, 37 (5): 866-872.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-104
摘要5878)   HTML198)    PDF(pc) (7354KB)(3459)    收藏
为提高多目标和雾天环境下的海上船舶识别准确率,提出一种基于改进YOLOv5深度学习的海上船舶识别模型(SE-NMS-YOLOv5),该模型结合暗通道去雾算法(Dark channel),并融合了SE(squeeze-and-excitation)注意力机制模块和改进非极大值抑制模型,对船舶数据集进行训练和测试。结果表明:在船舶识别任务上,SE-NMS-YOLOv5模型的准确率、召回率和 F 1值分别为90.6%、89.9%、90.5%,检测效果比YOLOv5模型分别提升了6.3%、4.8%、5.8%,比YOLOv4模型分别提升了19.1%、19.0%、19.3%;在雾天船舶识别任务上,SE-NMS-YOLOv5-Dark channel模型的准确率、召回率和 F 1值分别为88.1%、87.2%、87.6%,比SE-NMS-YOLOv5模型的检测结果分别提升了13.8%、13.3%、13.5%。研究表明,SE-NMS-YOLOv5海上船舶识别模型有效地解决了多目标和雾天条件下,海上船舶检测准确率低的问题,提升了船舶检测和识别的整体效果。
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13. 循环水养殖红鳍东方鲀的重金属污染状况与健康风险评价
王炫凯, 赵彤, 岳扬, 王侯宇, 曲宝成, 熊玉宇, 张玉凤
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 650-657.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-280
摘要6018)   HTML44)    PDF(pc) (1717KB)(3459)    收藏
为评价循环水养殖红鳍东方鲀 Takifugu   rubripes 的质量安全,以大连市某循环水养殖企业的红鳍东方鲀为研究对象(稚鱼平均体质量2.3 g,幼鱼平均体质量1 091.4 g,成鱼平均体质量1 718.1 g),采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),对不同养殖阶段红鳍东方鲀体内铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)和铬(Cr)5种重金属的含量进行测定。结果表明:红鳍东方鲀体内不同重金属含量均未超过《食品安全国家标准食品中污染物限量》(GB 2762—2017)、《无公害食品水产品中有毒有害物质限量》(NY 5073—2006)的安全标准;不同养殖阶段红鳍东方鲀体内重金属含量变化表明,Cu和Cr是主要富集的金属元素,其中Cu主要富集在肝脏( P <0.05),Cr主要富集在肌肉( P <0.05);红鳍东方鲀不同养殖阶段Cd、Hg、Cu、Cr的含量无显著性差异( P >0.05),不同组织部位Cd、Hg、Cu的含量有显著性差异( P <0.05),肝脏、肌肉是重金属的主要富集器官;单因子污染指数、内梅罗综合污染指数计算显示,鱼体重金属污染状况均处于无污染范围;预计日摄入量、致癌风险、非致癌风险评价显示,预计日摄入量对健康风险的贡献较小,儿童、成人的致癌风险均处于可接受范围,非致癌风险可以忽略不计,但儿童的健康风险总体略高于成人。研究表明,循环水养殖模式下红鳍东方鲀的重金属含量水平可控制在安全范围内。
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14. 斜带石斑鱼T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)基因表达及重组蛋白制备
李金泽, 汤菊芬, 黄瑜, 简纪常, 施钢, 蔡佳
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 403-410.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-172
摘要5695)   HTML68)    PDF(pc) (7037KB)(3431)    收藏
为研究斜带石斑鱼 Epinephelus   coioides  T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)在免疫应答过程中的作用,通过聚合酶链式反应(PCR)获得斜带石斑鱼 TIM -4的蛋白编码区(GenBank登录号:MZ465580),利用生物信息学分析其结构特征,采用荧光定量PCR(qPCR)分析 TIM -4在健康鱼体中的组织分布,以及经LPS和Poly I:C刺激后的表达变化,并构建原核表达载体质粒 TIM -4-4T,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行TIM-4重组蛋白诱导表达。结果表明:斜带石斑鱼 TIM -4基因的蛋白编码区片段长度为702 bp,可编码234个氨基酸,含有V-Type(IGV)、BTK和PRY 3个功能结构域;qPCR显示, TIM -4基因在斜带石斑鱼10种组织中均有表达,在胃中的表达量最高( P <0.05),在脾脏中表达量最低;经LPS刺激后,脾脏细胞中的 TIM -4表达量显著降低( P <0.05),而经Poly I:C刺激后,脾脏细胞中的 TIM -4表达量显著升高( P <0.05);SDS-PAGE电泳显示,TIM-4重组蛋白相对分子质量约为25 100,以包涵体形式表达,在0.4 mmol/L IPTG、37 ℃下诱导6 h时,TIM-4重组蛋白的表达量最大。研究表明, TIM -4基因可能参与了斜带石斑鱼抗感染免疫反应,本研究结果为深入了解 TIM -4的生物学功能提供了理论基础。
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15. 匙指虾科线粒体基因组结构与系统进化分析
朱陇强, 朱志煌, 朱雷宇, 王定全, 王健鑫, 林琪
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 428-434.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-177
摘要5039)   HTML3)    PDF(pc) (9197KB)(3419)    收藏
为深入研究匙指虾科Atyidae物种鉴定、分类及遗传进化等相关内容,利用DnaSP 6、PhyML 3.1、MEGA 5.0、MrBayes 3.2.6及BEAST 2.6.3软件对NCBI数据库中24个匙指虾科物种线粒体全基因组序列进行了分析。结果表明:匙指虾科物种线粒体基因组长度为15 318~16 430 bp,AT含量为62.20%~70.19%;24个匙指虾科物种线粒体基因组基因的组成和排列模式保持一致;线粒体基因组差异位点分析显示, nd 5和 nd 4基因变异位点比例较高且变异位点数最多;基于13个蛋白质编码基因(protein-coding genes,PCGs)的核苷酸序列系统进化分析显示,除Paratyinae亚科为单系群外,Typhlatyinae和Caridellinae亚科均为非单系群,三者亲缘关系较近且聚为一大支,与单独成为一个类群的Atyinae成姊妹关系;根据分子钟估算结果推测,Paratyinae、Typhlatyinae和Caridellinae亚科物种最近的共同祖先可能出现在石炭纪中期到二叠纪时段,Atyinae亚科物种最近的共同祖先可能出现在二叠纪早期到侏罗纪时段,随后进一步分化为具有现代特征的匙指虾科种类。研究表明, nd 5和 nd 4基因可作为匙指虾理想的分子标记进行物种遗传分析,Typhlatyinae和Caridellinae的单系性仍存在争议,地理板块运动对匙指虾科物种分化具有重要影响。
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16. 低温胁迫对不同群体菲律宾蛤仔存活率及脂肪酸代谢相关基因SCD、FAD 和ACC表达的影响
李宁, 聂鸿涛, 黎强, 霍忠明, 闫喜武
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 636-642.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-243
摘要6145)   HTML74)    PDF(pc) (2777KB)(3414)    收藏
为研究低温胁迫对菲律宾蛤仔 Ruditapes   philippinarum  “斑马蛤2号”存活和脂肪酸代谢相关基因的影响,采用低温(-1、4、12 ℃)胁迫方法,观察了3个群体(“斑马蛤2号”、辽宁大连群体和广西北海群体)在不同温度胁迫下的生存差异,并从低温转录组中挑选3个蛤仔脂肪酸代谢相关基因——硬脂酰辅酶A去饱和酶( SCD )、脂肪酸去饱和酶( FAD )和乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC )基因,采用qRT-PCR方法,分析了不同低温胁迫下不同群体鳃组织中3个基因的表达变化规律。结果表明:菲律宾蛤仔“斑马蛤2号”和南北方野生群体蛤仔急性低温(-1、4 ℃)胁迫9 d时,存活率依次为“斑马蛤2号”>辽宁大连群体>广西北海群体;3个脂肪酸代谢相关基因在菲律宾蛤仔鳃组织中的表达与温度显著相关( P <0.05),随温度从12 ℃降低到-1 ℃,3个基因表达量总体呈升高的趋势;在-1 ℃胁迫下,与0 h相比,3个蛤仔群体鳃组织中的 SCD FAD 基因表达量在12~72 h显著上调( P <0.05),3个群体的 ACC 基因表达量分别在不同时间点显著上调,“斑马蛤2号”鳃中3个基因表达量的上调幅度总体上显著高于广西北海群体和辽宁大连群体( P <0.05)。研究表明,在-1 ℃条件下,“斑马蛤2号”的存活率和耐低温能力明显高于辽宁大连和广西北海群体,且“斑马蛤2号”的 SCD FAD ACC 基因高表达可能与其耐低温能力强有关。
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17. 藻酸盐对海假交替单胞菌生物被膜形成及厚壳贻贝附着变态的影响
陈慧娥, 贺康, 贺楚晗, 竹攸汀, 杨金龙, 梁箫
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 620-626.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-260
摘要5361)   HTML35)    PDF(pc) (4828KB)(3412)    收藏
为探究藻酸盐对海假交替单胞菌 Pseudoalteromonas   marina 生物被膜形成及厚壳贻贝 Mytilus   coruscus 幼虫附着变态的影响,以海假交替单胞菌生物被膜为对照组,将终质量浓度为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L的藻酸盐标准品溶液,分别添加到海假交替单胞菌菌液中共同形成生物被膜,检测生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响,并分析了藻酸盐对生物被膜的膜厚及胞外产物的影响。结果表明:生物被膜的细菌密度随添加藻酸盐质量浓度的增加而增加;当添加藻酸盐质量浓度为0.5 mg/L时,共同形成的生物被膜的膜厚和胞外多糖均显著增加( P <0.05),诱导厚壳贻贝幼虫附着变态的能力增强。研究表明,添加藻酸盐能够促进 P.marina 生物被膜的形成,且可拉酸等其他胞外多糖含量的增加促进了生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的诱导能力,藻酸盐的适宜添加量为0.5 mg/L。
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18. 酶解鱼溶浆和植物精油对大菱鲆幼鱼生长、肠道消化酶活力及TOR相关基因表达的影响
郝甜甜, 许聪, 王际英, 刘财礼, 沈玉博, 李宝山, 孙永智, 黄炳山
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 441-449.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-216
摘要5860)   HTML141)    PDF(pc) (1217KB)(3406)    收藏
为探究低鱼粉饲料中添加酶解鱼溶浆(stickwater hydrolysate,SWH)和植物精油对大菱鲆 Scophthalmus   maximus 幼鱼生长、血清生化指标、肠道消化酶活性、抗鳗弧菌感染能力和雷帕霉素靶蛋白(TOR)相关基因表达的影响,以450尾初始体质量为37.67 g的大菱鲆幼鱼为研究对象,试验设置5个组,每组设3个重复,设计正对照组(鱼粉含量50%,D1)、负对照组(鱼粉含量30%,D2),以及在负对照组基础上分别添加1%酶解鱼溶浆(D3)、0.02%植物精油(D4)和1%酶解鱼溶浆+0.02%植物精油(D5)(饲料成分含量中的%均指质量分数),养殖幼鱼8周。结果表明:幼鱼增重率、特定生长率和蛋白质效率均在D3组达到最高值,显著高于其他组( P <0.05);D3和D5组饵料系数则显著低于负对照组( P <0.05);溶菌酶活力在D5组达到最高值,显著高于负对照组( P <0.05);C3酶活力在D5组达到最低值,显著低于其他组( P <0.05);幼鱼肠道胰蛋白酶活力在D3组达到最高值,显著高于负对照组( P <0.05);肝脏 TOR  mRNA相对表达量在D3组达到最高值,显著高于正、负对照组( P <0.05),而4 EBP 1和4 EBP 2 mRNA相对表达量则呈相反趋势;经鳗弧菌注射感染48 h后,D4和D5组鱼的累积死亡率显著低于负对照组( P <0.05)。研究表明,在鱼粉含量为30%的条件下,饲料中添加1%的酶解鱼溶浆,可显著促进大菱鲆幼鱼生长、肠道胰蛋白酶活性和 TOR  mRNA相对表达量,添加0.02%植物精油可提高幼鱼血清溶菌酶活性和抗鳗弧菌感染能力,但1%酶解鱼溶浆和0.02%的植物精油二者配伍对促进鱼体增重率的效果要低于单一添加1%酶解鱼溶浆,其相互作用机理还有待进一步研究。
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19. 一株大菱鲆源杀鲑气单胞菌非典型株的分离鉴定及毒力基因型
王鹤, 王文豪, 黄华, 刘晓丹, 张丽文, 杨涛, 胡乐彬, 李战军
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 558-567.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-254
摘要5573)   HTML76)    PDF(pc) (3823KB)(3397)    收藏
为研究大菱鲆 Scophthalmus   maximus 杀鲑气单胞菌非典型株的特性,利用常规病原菌分离方法,从某养殖场患病个体脾脏分离纯化获得一株优势菌BHAS-1,通过生理生化鉴定、序列比对、回归感染、毒力基因检测和药敏试验等对其开展研究。结果表明:分离株BHAS-1为无运动能力、β溶血的革兰氏阴性杆菌,与杀鲑气单胞菌非典型株具有相似的生理生化特性,但该分离株不产生吲哚,不能利用甘露糖;对菌株开展16S rRNA、 gyrB vapA 基因扩增和序列比对,基于 vapA 基因构建的系统进化关系中,分离株BHAS-1与 Aeromonas   salmonicida  subsp. masoucida  RZ6S-1及ATCC 27013T单独聚为一支,结合生理生化鉴定结果,判定分离株为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种 A.salmonicida  subsp. masoucida ;菌株BHAS-1对大菱鲆的半致死浓度(LD 50 )为1.62×10 8  CFU/mL,毒力基因型为 aer + - zot + - dna + - ser + - lip + - sp + - alt + - act + - ast + - epa + - fla + - ahyB + ;菌株BHAS-1对恩诺沙星、四环素等7类13种抗生素敏感,对复方新诺明、氯霉素等6类7种抗生素耐药,耐药率为31.82%。研究表明,应用 vapA 基因可以有效鉴别杀鲑气单胞菌不同亚种。
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20. 贝类神经内分泌系统对免疫应答的调节机制
王玲玲
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 363-375.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-140
摘要5599)   HTML81)    PDF(pc) (4020KB)(3379)    收藏
神经内分泌系统在生物体的代谢、生长、发育、生殖及免疫等生命过程中发挥重要的调节作用。神经内分泌系统和免疫系统构成的互惠性调节关系已成为近年来神经学、内分泌学、生理学、免疫学乃至医学等研究领域的热点。近年来,无脊椎动物神经内分泌系统的结构和功能及其免疫调节机制引起了广泛关注。贝类是真体腔原口动物,其适应性强、分布广且进化地位特殊,尚未分化出完整的神经和内分泌器官,但具备了合成和释放儿茶酚胺、乙酰胆碱、脑啡肽、一氧化氮、谷氨酸和皮质醇等的分子基础,是研究无脊椎动物神经内分泌系统起源与进化的关键类群。本文系统综述了贝类神经内分泌系统的分子组成、激活机制及其对免疫应答的调节作用等方面的研究进展,并提出其结构特征、功能作用、调节机制及进化意义等方面是该领域未来的研究重点,以期为深入了解神经内分泌系统的进化及神经内分泌免疫系统在贝类环境适应中的作用提供参考。
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21. 分子伴侣 Hsp70变构机制及其在水生动物中的应用研究进展
张翔, 王祖峰
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 707-718.  
摘要3676)      PDF(pc) (5782KB)(3371)    收藏
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22. 淮河荆涂峡鲤、 长吻鮠国家级水产种质资源保护区浮游植物群落结构的时空格局及影响因子
王东伟, 龚江, 杨晓曦, 赵伟, 周彦锋
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 658-667.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-311
摘要6108)   HTML4)    PDF(pc) (4484KB)(3357)    收藏
为了解淮河荆涂峡鲤、长吻鮠国家级水产种质资源保护区浮游植物群落结构的时空格局及其与环境因子的关系,于2020年冬季(1月)、春季(4月)、夏季(8月)和秋季(10月),分别对保护区18个采样点,按照每个季节采样1次的频次开展了浮游植物和水质的调查研究。结果表明:调查期间,保护区共鉴定出浮游植物8门71属143种,浮游植物种类主要为蓝藻门、硅藻门和绿藻门,合计占比85.31%;浮游植物优势种主要为梅尼小环藻 Cyclotella   meneghiniana 、尖尾蓝隐藻 Chroomonas   acuta 等13种;保护区浮游植物Shannon-Wiener多样性指数变动范围为1.48~3.08,其中春季和冬季显著低于夏季和秋季( P <0.05);Pielou均匀度指数变动范围为0.46~0.96,季节上无显著性差异( P >0.05);Margalef丰富度指数变动范围为0.48~2.58,其中冬季显著低于其他3个季节( P <0.05),呈现夏季最高、冬季最低的态势;保护区浮游植物细胞密度变化范围为9.84×10 4 ~7.86×10 7  cells/L,生物量变化范围为0.02~29.07 mg/L,浮游植物密度和生物量在季节上无明显差异,但在空间上涡河水域显著高于淮河干流( P <0.05);春、夏、秋和冬季影响保护区浮游植物群落时空分布的主要环境因子分别为透明度(SD)、总氮(TN)、水深(WD)和高锰酸盐指数(COD Mn )。研究表明,保护区流域内水质均处于轻度富营养化状态,浮游植物密度及生物量在时间格局上无明显差异,但空间格局上涡河显著高于淮河干流,应重视不同季节的主要环境影响因子,以维护浮游植物多样性。
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23. 智能鱼类信息共享平台的构建
李然, 杨玉婷, 张志强, 刘鹰, 黄健隆, 李浩淼
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 497-504.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-142
摘要5203)   HTML4)    PDF(pc) (4464KB)(3354)    收藏
为构建智能鱼类信息共享平台,实现鱼类信息的高效准确检索,针对鱼类数据库信息量大、高并发等特点,基于MongoDB研发了智能鱼类信息共享平台。平台数据库设计了16张表,涵盖了鱼名、生态、形态等多种信息,使用SpringBoot结构的Java一体式框架和集成人工智能识鱼模块,采用卷积神经网络实现图片识鱼;利用MongoDB的BinaryJSON实现松散数据结构的管理,使用Spring的MongoTemplate服务进行MongoDB数据库操作,采用阿里云提供的云服务器平台,以及Nginx反向代理和SpringBoot内置的Tomcat服务器组合完成网络部署。结果表明:本研究中构建的平台数据库实现了鱼类信息的科学性、可追溯性及实用性,系统较好地降低了架构的耦合度,提高了程序的可维护性;系统实现了海量数据存储和高并发访问的需求;构建的智能鱼类信息共享平台,可提供基于纲目、地域、形态、鱼汛、有无鳞片等多种检索入口,图片识鱼准确率达到92.67%;用户可通过上传鱼的文本、图片,查询或识别该鱼的相关信息;还可在地图中根据鱼所处的位置搜索鱼的详细信息,满足了多样化的检索需求;平台信息开放,实现了优质鱼类资源共享。研究表明,构建的智能鱼类信息共享平台,信息丰富、使用便捷,能有效地解决鱼类海量数据存储和访问效率问题。
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24. 溶解氧对香螺行为、 抗氧化酶活性及组织结构的影响
张倩鸿, 王绍军, 田莹, 王荦, 毛俊霞, 王许波, 王庆志, 常亚青, 郝振林
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 643-649.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-309
摘要5881)   HTML71)    PDF(pc) (9159KB)(3352)    收藏
为研究不同溶解氧(DO)水平对香螺 Neptunea   cumingii  Crosse(湿体质量为85.3 g±9.3 g)的生理生态学影响,明确香螺对不同DO水平的适应机制,采用行为学、组织病理学和生物化学等手段研究了不同质量浓度DO(0、2、4、6、8 mg/L)条件下,香螺的行为特征、相关组织损伤和抗氧化酶活性变化。结果表明:当DO质量浓度较低(0、2、4 mg/L)时,香螺爬行活跃、摄食减少,当DO≤4 mg/L时,香螺摄食停止并出现死亡现象; 组织学观察显示,随DO浓度的降低,鳃丝间隔总体呈先增大后减小的趋势,鳃黏液细胞数量总体呈先升高后下降的变化趋势,鳃丝顶端膨胀,呼吸上皮细胞肿大脱落,表面细胞凹陷形成褶皱,有时会导致鳃丝断裂;随DO浓度的降低,嗅检器黏液细胞数量呈先升高后下降的变化趋势,嗅检器细胞结构变化不显著; 抗氧化酶活性检测结果显示,随DO浓度的下降,香螺鳃和肝胰腺组织的总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先下降后上升再下降的变化趋势,鳃中过氧化氢酶(CAT)活性呈先升高后下降的趋势,肝胰腺中CAT活性则与DO浓度呈正相关。研究表明,当受到短期低氧胁迫时,香螺会通过改变自身行为和相关组织结构形态,以及通过调节内分泌等方式适应低氧环境,当DO≤4 mg/L、胁迫时间≥96 h时,香螺的存活率为0,香螺最适DO质量浓度为6~8 mg/L。
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25. 虾夷马粪海胆X染色体连锁凋亡抑制蛋白XIAP基因克隆及不同病原微生物刺激后的表达响应
刘圣美, 尚凤芹, 陈亚东, 常亚青, 王秀利, 仇雪梅, 刘洋
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 627-635.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-303
摘要5853)   HTML71)    PDF(pc) (4091KB)(3350)    收藏
为研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)在虾夷马粪海胆 Strongylocentrotus   intermedius (体质量为40~80 g)天然免疫系统中的作用,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得虾夷马粪海胆 XIAP 基因的cDNA序列,并通过实时定量PCR分析了其在各组织中的分布,以及经脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)、肽聚糖(peptidoglycan, PGN)、聚肌胞苷酸(polyinosinic-polycytidylic acid, Poly I:C)、强壮弧菌 Vibrio   fortis 和葡聚糖(whole glucan particles, WGP)刺激后, XIAP 基因在体腔细胞中的表达情况。结果表明:虾夷马粪海胆 XIAP 基因的cDNA长为 4 894 bp,其中,5′ UTR为459 bp,开放阅读框为2 331 bp,3′ UTR为2 104 bp,共编码776个氨基酸,具有3个BIR结构域和1个RING指环结构域,预测该蛋白相对分子质量为86 960,等电点为5.96,为酸性蛋白;虾夷马粪海胆 XIAP 基因在检测的各组织中均有表达,其中,在卵巢中的表达量显著高于管足、体腔细胞、围口膜、肠和精巢( P <0.05);经PGN、LPS、Poly I:C、WGP和 V.fortis 刺激后,体腔细胞中的 XIAP 基因表达量显著上升( P <0.05),并在PGN、LPS和Poly I:C刺激后12 h,WGP刺激后24 h, V.fortis 刺激后6 h时, XIAP 基因表达量均达到最高值。研究表明,克隆获得的 XIAP 基因参与了虾夷马粪海胆的免疫应答,并在海胆的天然免疫中发挥重要作用。
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26. 乌苏里白鲑肝脏表达抗菌肽Leap-2基因的克隆及细菌感染后的组织表达分析
刘恩慧, 黄天晴, 谷伟, 王炳谦, 张艳萍, 李春雨, 徐革锋
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 420-427.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-163
摘要5157)   HTML72)    PDF(pc) (7451KB)(3333)    收藏
为探究乌苏里白鲑 Coregonus   ussuriensis  Berg肝脏表达抗菌肽 Leap -2基因的分子结构和表达特征,采用PCR技术从乌苏里白鲑(体质量为30.0 g± 1.2 g) 肝脏组织中扩增 Leap -2基因的开放阅读框(ORF),使用生物信息学软件对其编码的氨基酸序列进行分析,通过荧光定量PCR(qRT-PCR) 检测其在健康组织及嗜水气单胞菌 Aeromonas   hydrophila 、杀鲑气单胞菌 Aeromonas   salmonicida 和金黄色葡萄球菌 Staphylococcus   aureus 感染后的组织表达变化。结果表明:采用PCR方法从乌苏里白鲑肝脏中克隆得到 Leap -2基因的ORF区(GenBank:MZ170050),片段长度为276 bp,可编码91个氨基酸,其成熟肽区域包含4个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示,乌苏里白鲑的Leap-2氨基酸序列与银鲑 Oncorhynchus   kisutch 的亲缘关系较近,且具有较高的同源性,一致性为96.7%;乌苏里白鲑肝脏中的 Leap -2基因表达量最高,其次为肠和肾,肌肉中的基因表达量最低;3种细菌感染导致 Leap -2在各组织中的表达均有所上调,Western blot检测也显示,Leap-2蛋白水平在24 h内表达上调。研究表明, Leap -2基因参与了乌苏里白鲑应对外源干扰的免疫反应,本研究结果可为解析乌苏里白鲑应对病原体的免疫应答机制提供科学参考。
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27. 杂色鲍caspase-3基因的克隆及其在发育、弧菌感染、高温和缺氧应激中的表达分析
卢锡琴, 张丽莉, 黄世玉, 王国栋, 王艺磊, 和四梅
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 411-419.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-141
摘要5257)   HTML63)    PDF(pc) (4884KB)(3310)    收藏
为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍 Haliotis   diversicolor 早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出 caspase -3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了 caspase -3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温应激和缺氧应激处理后的表达情况。结果表明: caspase -3基因的cDNA全长为1 192 bp,共编码252个氨基酸,该氨基酸序列具有高度保守的P20和P10活性位点; caspase -3基因在杂色鲍成体的各个组织中均有表达,其中血淋巴中的表达量显著高于其他组织( P <0.05);在早期发育阶段中受精卵和2细胞期的表达量最高( P <0.05);经副溶血弧菌感染后,血淋巴中 caspase -3的表达量在 12 h时显著上调( P <0.05);经高温应激处理后,血淋巴和肝胰腺中 caspase -3基因的表达量在24 h时显著上调( P <0.05);经缺氧处理后,鳃组织中 caspase -3基因的表达量在96 h时出现显著上调( P <0.05),而血淋巴中的表达量在4 h时显著上调( P <0.05)。研究表明, caspase -3基因在杂色鲍早期发育、免疫和应激中发挥着重要作用。
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28. 金枪鱼鳃的形态结构与氧供给特征研究进展
符文雅, 韦露, 张鹏飞, 肖娟, 黄海, 马振华, 郭志强
大连海洋大学学报    2022, 37 (5): 884-896.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-258
摘要5298)   HTML6)    PDF(pc) (5506KB)(3306)    收藏
金枪鱼 Thunnus 是典型快速游泳的大型中上层硬骨鱼类,其游动时需要大量的氧供应,为金枪鱼的快速游泳提供能量。鳃作为金枪鱼气体交换的场所,是保证金枪鱼氧供应的重要器官,本文围绕金枪鱼适应快速游泳过程中鳃的结构与功能,梳理了鳃的形态、表面积、血流模式、水-血屏障厚度等结构及氧供给特征相关研究,综述了金枪鱼鳃应对快速水流冲击的结构适应(鳃的融合、钙化和鳃片层排列)及鳃的逆流交换特点,并针对金枪鱼鳃的形态结构与氧供给研究中存在的问题,从金枪鱼鳃的早期组织发育、细胞功能、适应性进化机制及鳃生理过程与环境因子间的关系等方面提出未来研究发展建议,以期为金枪鱼鳃分子机制研究提供科学参考。
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29. 基于HY-1C CZI 数据的辽河口湿地盐地碱蓬群落碳储量评估
李微, 王文硕, 张新宇, 段元棚, 杨戬波
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 574-583.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-064
摘要4975)   HTML5)    PDF(pc) (10307KB)(3301)    收藏
为采用高分辨率的HY-1C CZI数据准确评估辽河口湿地盐地碱蓬 Suaeda   salsa 碳储量和固碳效益,分别于2013年9月和2018年9月在辽河口湿地盐地碱蓬群落区域采集盐地碱蓬光谱数据和植株样本,并对生物量及含碳率进行测定,利用回归分析法构建基于转换型土壤调整植被指数(transformed soil adjusted vegetation index,TSAVI)的地上生物量反演模型,并结合异速生长模型估算地下生物量,进而计算盐地碱蓬群落的碳储量和固碳收益。结果表明:线性模型为辽河口湿地盐地碱蓬群落地上生物量的最优反演模型,其决定系数( R 2 )为0.69( P <0.05),地面数据验证集的均方根误差( E )和可预测技能(Skill)值分别为0.078和0.929,卫星数据验证集的相对均方根误差( E r )和可预测技能值分别为9.55%和0.987;2018、2019、2020年辽河口湿地盐地碱蓬群落地上生物量分别为1.69×10 6 、1.13×10 6 、3.26×10 6  kg,地下生物量分别为3.02×10 5 、2.03×10 5 、5.81×10 5  kg,总生物量分别为1.99×10 6 、1.33×10 6 、3.85×10 6  kg,进而获得盐地碱蓬群落2018、2019、2020年的碳储量分别为6.06×10 5 、4.06×10 5 、1.17×10 6  kg。研究表明,采用HY-1C CZI数据评估盐地碱蓬的碳储量是可行的,盐地碱蓬群落的碳储量时空分布与其生物量分布趋势一致,盐地碱蓬的地上部分为主要储碳部分,辽河口湿地盐地碱蓬群落具有较高的生态效益和经济效益。
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30. 异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用
郭宝琴, 魏畅, 王轶南, 李强
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 450-456.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-136
摘要5535)   HTML0)    PDF(pc) (3046KB)(3300)    收藏
为制备抗异育银鲫C arassius   auratus   gibelio  IgM单克隆抗体,以单克隆抗体为工具构建鲫血清中鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)特异性抗体酶联免疫检测技术,运用硫酸铵盐析结合Protein A亲和层析法,从异育银鲫血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM。结果表明:经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,纯化的血清IgM主要有两条蛋白带,相对分子质量分别为82 000和25 000,分别为异育银鲫IgM的重链和轻链;以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了5株抗异育银鲫IgM单克隆抗体,分别命名为8G1、7C6、8C2、8C5和5C2;抗体分型结果显示,8G1、8C2、8C5和5C2均为IgG1亚型,7C6为IgG2b亚型;免疫印迹分析显示,5株单抗均可特异性识别相对分子质量为25 000的IgM轻链分子;间接免疫荧光分析显示,5株单抗均可与异育银鲫脾脏中部分白细胞发生特异性结合,阳性细胞表面呈现绿色点状荧光信号;用鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒粒子包被酶标板,以抗异育银鲫IgM单抗作为检测一抗,碱性磷酸酶标记羊抗鼠Ig作为检测二抗,构建了鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,进一步优化显示,该技术中最佳单抗为8C5,最佳二抗稀释度为1∶2 000,鲫血清最佳稀释度为1∶20。研究表明,本研究中成功制备了抗异育银鲫IgM单克隆抗体,并以此为工具构建了检测鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,研究结果可为今后开展异育银鲫特异性免疫应答研究及CyHV-2疫苗效果评价提供科学参考。
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31. 西北太平洋春、冬季浮游动物优势种水平分布与影响因子的关系
付菲雨 , 韩霈武 , 方舟, 刘必林
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 489-496.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-130
摘要5617)   HTML5)    PDF(pc) (3415KB)(3292)    收藏
为探究西北太平洋浮游动物优势种的水平分布特征,分别于2019年春季(3月)和2020年冬季(12月)对西北太平洋海域(146°~156°E、28°~35°N)58个站位开展2个季节的调查采样,采用Pearson相关性分析和冗余分析对浮游动物优势种与影响因子进行了研究。结果表明:2个航次共鉴定出浮游动物602种(含未定种),其中,春季调查海域浮游动物种类数(456种)大于冬季(386种);共检出优势种11种,其中,瘦乳点水蚤 Pleuromamma   gracilis 、小哲水蚤 Nannocalanus   minor 、痩新哲水蚤 Neocalanus   gracilis 和六鳍箭虫 Sagitta   hexsaptera 为两个季节共有的优势种;Pearson相关性分析显示,春季调查海域优势种受纬度影响较大,如邦海樽 Doliolum   nationalis 、细角间哲水蚤 Mesocalanus   tenuicornis 和螺旋尖角水母 Eudoxoides   spiralis 与纬度呈极显著或显著负相关( P <0.01或 P <0.05),捷氏哲水蚤 Calanus   jashnovi 与纬度呈显著正相关( P <0.05),冬季调查海域黄角光水蚤 Lucicutia   flavicornis 和六鳍箭虫与海表面盐度呈显著正相关( P <0.05);RDA分析与Pearson相关性分析结果相一致,春季影响优势种丰度的主要因子为纬度( P <0.01),而冬季则为盐度( P <0.05)。研究表明,西北太平洋春、冬季浮游动物优势种水平分布受控的影响因子不同,为多种因子综合影响的结果,优势种分布春季受纬度影响较深,而冬季则受盐度影响较深。
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32. 不同生长阶段花羔红点鲑和细鳞鲑肠道菌群结构差异分析
柳鹏, 李玲雪, 郑伟, 杜晓燕, 闫春梅, 刘慧吉, 高春山
大连海洋大学学报    2022, 37 (4): 568-573.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-193
摘要5350)   HTML7)    PDF(pc) (3868KB)(3291)    收藏
为探究花羔红点鲑 Salvelinus   malma 和细鳞鲑 Brachymystax   lenok 的肠道菌群结构差异,采用MiSeq 16S rRNA 高通量测序技术对相同养殖环境下,健康花羔红点鲑和细鳞鲑肠道内容物进行微生物测序及信息分析。结果表明:花羔红点鲑和细鳞鲑肠道内容物OTU总数分别为3 896和1 675,二者的肠道内容物中优势菌群比较丰富;花羔红点鲑1 + 龄组(H1)Alpha多样性高于2 + 龄组(H2),表明肠道菌群会随着年龄的增长定植于宿主肠道,4 + 龄组细鳞鲑(X4)肠道Alpha多样性介于1 + 龄和2 + 龄花羔红点鲑之间;花羔红点鲑肠道优势菌门为柔膜菌门Tenericutes,优势菌属为支原体属 Mycoplasma ,细鳞鲑肠道优势菌门为厚壁菌门Firmicutes,优势菌属为芽孢杆菌属 Bacillus ;PCA分析显示,1 + 龄、2 + 龄花羔红点鲑肠道菌群群落结构比较相近,但与4 + 龄细鳞鲑肠道菌群群落结构差异较大。研究表明,相同养殖环境下,同种类不同年龄的花羔红点鲑肠道菌群组成相似,同科不同属的两种鲑鱼肠道菌群组成差异较大,但微生物多样性相似。
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33. 虹鳟ep300/crebbp基因家族不同拷贝的功能分化
王宪宗, 刘青, 李澍
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 376-385.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-169
摘要5379)   HTML1)    PDF(pc) (24227KB)(3291)    收藏
为研究虹鳟 Oncorhynchus   mykiss   ep 300/ crebbp 基因家族的拷贝数变异、功能分化及与低氧应答的关联,通过TBLASTN和BLASTP搜索及重构进化树,确定该家族的拷贝数及与其直系同源的斑马鱼 Danio   rerio 基因,基于对原始转录组测序数据的统计获得这些拷贝的组织表达谱及共表达基因,并对共表达基因进行GO富集分析,最后通过CDD搜索、多重序列比对及三维结构建模比较这些拷贝所编码蛋白质的变异程度。结果表明:虹鳟的 ep 300 /crebbp 家族有8个成员( ep 300 aa ep 300 bb , crebbpaa crebbpbb ),其均由全基因组重复事件所形成,对应于斑马鱼的4个成员,可分为4对ohnologs;不同的ohnolog对之间在组织表达谱、编码蛋白质的一级结构和三级结构存在较大差异,而同一对ohnologs内部的2个拷贝在这些方面差异较小;这8 个成员拥有数量不等的独有共表达基因,这些共表达基因所富集的与结合、修饰、应对压力/刺激和耐低氧相关的GO条目的数量均存在较大差异; ep 300 ba ep 300 bb 属于一对ohnologs,但它们编码的蛋白质保守结构域中存在35处变异,数量远大于其他ohnolog对,且只有 ep 300 bb 的共表达基因能富集到与应对压力/刺激和耐低氧相关的GO条目。研究表明,相较于其他 ep 300 /crebbp 家族成员,虹鳟 ep 300 bb 的进化速度较快,且与耐低氧性能相关性更大,可作为虹鳟遗传改良的重要候选基因。
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34. 基于多核卷积神经网络(BERT+Multi-CNN+CRF)的水产医学嵌套命名实体识别
刘巨升, 于红, 杨惠宁, 邵立铭, 宋奇书, 李光宇, 张思佳, 孙华
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 524-530.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-047
摘要5121)   HTML59)    PDF(pc) (3220KB)(3284)    收藏
为解决水产医学命名实体识别中存在的嵌套实体识别准确率不高的问题,提出一种基于多核卷积的命名实体识别模型(BERT+Multi-CNN+CRF),采用多核卷积神经网络提取嵌套实体特征,通过BERT(bidirectional encoder representations from transformers)方法对输入语料进行预训练,丰富嵌套实体位置向量信息,获得嵌套实体输入特征矩阵,将提取特征矩阵与输入特征矩阵融合,以增强嵌套实体的特征表示,并进行不同模型的对比试验。结果表明,本文中提出的BERT+Multi-CNN+CRF模型,在水产医学嵌套命名实体识别任务中的准确率、召回率和 F 1值分别为88.04%、88.92%和88.48%,与识别准确率较高的BERT+BiLSTM+ATT+CRF模型相比,分别提高了2.25%、3.23%和2.74%。研究表明,本文中提出的BERT+Multi-CNN+CRF模型可有效解决水产医学嵌套实体识别准确率不高的问题,是一种有效的水产医学嵌套命名实体识别方法。
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35. 溶藻弧菌磷酸甲基嘧啶合酶(ThiC)的原核表达及其乙酰化修饰鉴定
王旭东, 范晨龙, 丁燏
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 435-440.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-148
摘要5826)   HTML161)    PDF(pc) (3977KB)(3253)    收藏
为研究溶藻弧菌 Vibrio   alginolyticus 磷酸甲基嘧啶合酶(phosphomethylpyrimidine synthase,ThiC)是否存在乙酰化修饰,以溶藻弧菌HY9901基因组为模板,PCR扩增 ThiC 基因,构建pET-28a- ThiC 原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,并优化其表达条件,然后用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达及乙酰化情况。结果表明:克隆获得的溶藻弧菌 ThiC 基因长度为1 941 bp;重组蛋白成功在大肠杆菌BL21中表达,相对分子质量为72 500,其最佳诱导条件为IPTG 0.1 mmol/L、温度37 ℃、诱导时间3 h;经Western blot检测显示,ThiC蛋白具有乙酰化修饰,但在体外不能通过乙酰化酶途径去乙酰化。研究表明,溶藻弧菌ThiC原核表达载体构建成功,该蛋白存在乙酰化修饰,但体外不能去乙酰化,本研究结果为溶藻弧菌的维生素合成过程中酶的翻译后调控机制研究提供了科学参考。
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36. 基于ConvGRU深度学习网络模型的海表面温度预测
张雪薇, 韩震
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 531-.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-137
摘要5359)   HTML6)    PDF(pc) (6790KB)(3247)    收藏
为解决传统时间序列网络模型的时间性与空间性结合不足和批量处理海洋环境要素大数据能力不足的问题,采用循环神经网络(RNN)扩展算法和卷积神经网络(CNN)相结合的ConvGRU深度学习神经网络模型以有效体现时空特征,利用样本生成器处理数据以有效处理时间序列遥感数据的批量性问题,并使用1999—2019年海表面温度网格数据(OISST产品),对2020年西北太平洋部分海域进行了海表面温度预测分析。结果表明:ConvGRU模型训练集的均方根误差和准确率分别为0.044 9 ℃和99.69%,验证集的均方根误差和准确率分别为0.045 2 ℃和99.64%;使用建立的ConvGRU模型对2020年海表面温度数据进行了预测,测试集的均方根误差和准确率分别为0.047 8 ℃和99.60%,海表面温度预测值的平均绝对误差和预测精度的平均值分别为0.379 3、97.31%。研究表明,本文中建立的ConvGRU模型可以较好地预测海表面温度的变化趋势,这为海表面温度神经网络预测模型提供了一种可行性方法。
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37. 温度响应型淀粉醚/海藻酸钠复合凝胶的制备及其性能
庞子健, 徐源, 姜硕, 孙萌, 姜谦, 孙薇, 查晓晗, 尚悦, 代明允, 刘鹰, 田野
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 505-512.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-176
摘要5673)   HTML4)    PDF(pc) (3937KB)(3247)    收藏
为制备具有良好温度响应性能的多糖基复合凝胶材料,以2-羟基-3-异丙氧基丙基淀粉醚(HIPS)和海藻酸钠(SA)为原料,乙二醇二缩水甘油醚(EDGE)和CaCl 2 为混合交联剂,通过交联反应制备温度响应型HIPS/SA复合凝胶,利用傅里叶转换红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)表征凝胶的结构及微观形貌,并分析凝胶的温度响应性能。结果表明:反应温度和反应时间均极显著影响HIPS/SA复合凝胶的溶胀率( P <0.01);制备HIPS/SA复合凝胶的最佳反应条件为质量分数6.5%的HIPS 2 g、质量分数4.5%的SA 2 g、NaOH用量300 μL、EDGE用量300 μL、反应温度55 ℃和反应时间3 h,在此条件下,凝胶的溶胀率为44.20;HIPS/SA复合凝胶具有温度响应性能,当温度升高至体积相转变温度(VPTT)34.9 ℃时,复合凝胶的溶胀率急剧下降。本研究中制备的具有优异温度响应性能的淀粉醚/海藻酸钠复合凝胶功能材料,可为功能材料在药物缓释、分离工程等领域的应用提供新的途径。
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38. 风味蛋白酶对冰温腌制鳜鱼肉品质的影响
徐鸣, 万金庆, 侯博玉, 王友君, 孙晓琳, 童年
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 513-523.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-173
摘要5420)   HTML1)    PDF(pc) (1717KB)(3243)    收藏
为探究冰温(-2 ℃)条件下风味蛋白酶对腌制鳜 Siniperca   chuatsi 鱼肉理化性质、滋味及气味的影响,以不同添加量的风味蛋白酶(25、50、100 U/g)为试验组,不添加酶为对照组,研究腌制过程中鱼肉的质构、感官、氨基酸态氮、三氯乙酸(TCA)-可溶性肽、游离氨基酸、呈味核苷酸及挥发性物质等的变化。结果表明:冰温条件下风味蛋白酶的添加对腌制鳜鱼肉滋味及风味有显著性影响( P <0.05),且风味蛋白酶添加量越高影响越大,但风味蛋白酶添加量过高会引起鱼肉硬度及口感下降;风味蛋白酶添加量为50 U/g时,鱼肉品质指标最佳,腌制10 d时,TCA含量达347.22 mg/100 g,为对照组的1.5倍,鲜味氨基酸含量在第6天时达到最高值(60.78 mg/100 g),次黄嘌呤核苷酸(IMP)含量在第6天时为133.83 mg/100 g,为对照组的1.3倍,味精当量在第6天时达到最高值(7.06 g MSG/100 g),为对照组的2.8倍,该组鱼肉中挥发性物质种类更丰富,总量为2 625.11 μg/100 g,为对照组的2.7倍。研究表明,冰温下添加风味蛋白酶可显著改善腌制鳜鱼肉品质及风味,最佳工艺条件为添加50 U/g风味蛋白酶腌制6 d。
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39. 海蒿子多糖提取、纯化及其药理活性研究进展
孔丽, 朱月霞, 周冰雪, 刘志, 薛旺迁, 石锦峰, 郑家勤, 李姣姣, 吉敬, 秦昆明, 董自波, 沈金阳
大连海洋大学学报    2022, 37 (5): 897-.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-184
摘要4736)   HTML4)    PDF(pc) (1918KB)(3227)    收藏
海蒿子 Sargassum   pallidum 是褐色海藻的典型代表,主产于中国黄海、渤海等沿岸海域,是应用最早的海洋中药之一。海蒿子具有化痰软坚、消瘿散结和利水消肿等功效,常用于治疗痰饮水肿、瘿瘤、脚气和小便不利等疾病。近年来,有关海蒿子多糖的提取与纯化方法及其抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抑菌、降血脂和调节免疫功能等生物学活性的研究被大量报道,纯化的海蒿子多糖主要由岩藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成。本文综述了典型中药海藻海蒿子多糖的提取纯化方法及药理作用研究进展,并针对其研究应用中存在的问题,提出了开展海蒿子多糖提取纯化方法的优化、海蒿子多糖制剂研发、海蒿子多糖精细结构研究等未来发展建议,以期为海蒿子的进一步开发利用提供参考。
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40. 宽口裂腹鱼的人工催产、胚胎发育及早期仔鱼发育观察
夏子惠, 赵贺, 邱梦, 聂竹兰, 陈克迅, 李学涛, 秦晓芳, 魏杰
大连海洋大学学报    2022, 37 (3): 471-481.   DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-132
摘要5533)   HTML140)    PDF(pc) (6524KB)(3220)    收藏
为实现宽口裂腹鱼 Schizothorax   eurystomus 的人工养殖和资源增殖,2019年在新疆克孜勒河进行了该鱼(亲鱼体质量93.26~317.22 g)的人工繁殖试验,研究了宽口裂腹鱼人工繁殖、胚胎发育及早期仔鱼发育情况。结果表明:不同剂量的催产药物和水温条件对宽口裂腹鱼催产效果和孵化率有显著性影响,最适催产药物组合为鱼脑垂体(PG)10.27 mg/kg+人绒毛膜促性腺激素(HCG)300.00 IU/kg+促黄体生成素释放激素A 2  (LHRH-A 2 )19.41 μg/kg,最适孵化水温为16.0~17.0 ℃;宽口裂腹鱼繁殖期主要集中在4月下旬—5月中旬,受精卵吸水后卵径为(3.43±0.11)mm,历经胚盘、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个阶段;受精至仔鱼孵出共经过145 h 48 min,总积温为2 364.80 ℃·h;初孵仔鱼全长为(8.03±0.15)mm,出膜480 h后卵黄囊被完全吸收,此时全长为(20.17±0.96)mm。研究表明,通过人为控制温度和催产药物种类、剂量,可实现宽口裂腹鱼规模化人工繁殖。
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