2021年, 第36卷, 第3期　
刊出日期：2021-06-07

  

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  刺参腐皮综合征发生的分子调控机制研究进展

  李成华

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 355-373. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-086

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  2003年以来，海参产业发展速度和拓展规模均达到前所未有的水平，在国内形成了继海带、对虾、扇贝、海水鱼类养殖之后“第五次”海水养殖产业浪潮。伴随着养殖规模和密度的扩大，病害问题也日益凸显，已逐渐成为海参产业健康发展的瓶颈，对生态环境和食品安全威胁巨大，其中以腐皮综合征最具代表性。本文梳理分析了刺参Apostichopus japonicus腐皮综合征的主要病原，系统阐述了刺参应对病原感染的免疫调节机制和代表性病原致病机制研究进展，总结了刺参病害的生态防治方法，并在实现刺参产业健康可持续发展、病原致病机制及环境调控疾病发生研究等方面提出了相应发展对策，以期为构建绿色健康的刺参疾病防控策略提供参考。
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  尼罗罗非鱼CD209基因的克隆、表达及功能鉴定

  罗国玲, 王孝谦, 简纪常, 鲁义善, 汤菊芬, 黄瑜

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 374-382. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-199

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  为揭示尼罗罗非鱼模式识别受体CD209的分子结构、组织表达特性并初步了解其免疫功能，利用聚合酶链式反应(PCR)获得尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus(体质量为100 g±5 g)CD209基因的开放阅读框片段(open reading frame，ORF)，命名为OnCD209；使用生物信息学软件对其氨基酸序列进行分析，采用RT-qPCR法对健康尼罗罗非鱼的各组织及无乳链球菌刺激后尼罗罗非鱼肝脏、脾脏、鳃和肠道的CD209基因表达量进行分析，并构建了CD209-pEGFP-N1及CD209-pcDNA3.1载体，研究了CD209基因在293T细胞中的定位及在细胞中过表达时对NF-κB酶活性的影响。结果表明：OnCD209的ORF区片段长度为1 383 bp，可编码460个氨基酸，预测该蛋白具有一个C型凝集素结构域；多重氨基酸序列比对及系统进化分析显示，CD209氨基酸序列在各物种间相对不保守，尼罗罗非鱼与田纹狮子鱼Liparis tanakae的CD209氨基酸序列聚为一支，亲缘关系最近；RT-qPCR结果显示，所有组织(脑、血液、皮肤、肌肉、头肾、肠道、鳃、肝脏、脾脏和胸腺)中均能检测到OnCD209的mRNA表达，且在血液中表达量最高；尼罗罗非鱼在受到无乳链球菌感染后，OnCD209的表达在各组织中呈现相似的变化趋势，大致呈先在6 h时上调，后在12、24 h时下调，再在48 h后上调的表达模式；亚细胞定位分析显示，OnCD209定位于细胞膜上；双荧光素酶报告基因系统检测发现，OnCD209对NF-κB通路的活性显著性激活。研究表明，OnCD209可能参与尼罗罗非鱼对细菌的免疫应答过程及炎症反应过程。
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  黄颡鱼GnRHR基因的克隆和表达及CRISPR/Cas9构建GnRHR基因敲除突变体

  李石竹, 方文宇, 骆明飞, 卢建国

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 383-392. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-120

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  为研究促性腺激素释放激素受体(gonadotropin releasing hormone receptor, GnRHR)对黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco性别分化和性腺发育的调控作用，采用逆转录PCR、氨基酸序列多重比对、系统进化树分析及实时定量PCR方法，对黄颡鱼GnRHR基因的序列、表达和进化进行了研究。结果表明：扩增到的黄颡鱼GnRHR cDNA序列长2 894 bp，包含239 bp的5′非翻译区，1 155 bp的开放阅读框和1 500 bp的3′非翻译区，预测编码384个氨基酸、7次跨膜结构域蛋白；氨基酸序列多重比对显示，黄颡鱼GnRHR与硬骨鱼类GnRHR的同源性较高，其与斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus、斑马鱼Danio rerio、鲤Cyprinus carpio、银鲫Carassius auratus GnRHR氨基酸序列的一致性分别为96%、87%、83%和82%，与哺乳动物的一致性较低，为42%～44%；系统进化分析显示，黄颡鱼GnRHR与鲤、虹鳟等硬骨鱼类的GnRHR聚为GnRHRⅡB分支；实时定量PCR显示，黄颡鱼GnRHR mRNA主要在端脑、中脑、下丘脑、垂体和精巢中高表达，但在卵巢和其他组织中几乎不表达；通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建和筛选出了黄颡鱼GnRHR突变体，成功获得了各种不同的黄颡鱼GnRHR F0代突变体。研究表明，GnRHR可能参与调控黄颡鱼雄性发育，黄颡鱼GnRHR F0代突变体的获取为探索GnRHR的功能和机制提供了基础资料。
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  鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其免疫原性分析

  孟少东, 姜新宇, 葛恒, 胡光耀, 杨大佐, 张家林 , 李强

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 393-398. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-166

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  为进一步研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)ORF4蛋白的功能，通过PCR扩增CyHV-2 ORF4基因，并构建重组穿梭质粒pFastBac HTA-ORF4，将其转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞后获得重组杆粒Bacmid-ORF4；采用脂质体法转染Sf9细胞后，利用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot鉴定重组蛋白，采用His亲和层析柱纯化重组蛋白，并通过小鼠免疫试验分析其免疫原性。结果表明：转染72 h后Sf9细胞逐渐呈现出细胞变圆、细胞核明显增大的形态变化；间接免疫荧光结果显示，重组杆状病毒感染的Sf9细胞中出现了明显的绿色荧光；Western blot结果显示，纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能够与抗His单抗发生特异性反应；小鼠免疫试验显示，纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能诱导小鼠产生特异性免疫反应。研究表明，本研究中获得的CyHV-2 ORF4蛋白有较好的免疫原性，为CyHV-2 ORF4蛋白的功能解析提供了良好材料。
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  抗弧菌杀鱼假交替单胞菌2515的潜在毒性及热处理脱毒后抗菌效果

  张宇哲, 王秀华, 于党辉, 王枫林, 孙祥山, 黄经献

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 399-405. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-144

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  为评估一株具有弧菌拮抗功能的杀鱼假交替单胞菌2515 Pseudoalteromonas piscicida 2515(以下简称“菌株2515”)对海水养殖动物的毒性，并确定一种有效的热处理脱毒方法，在中国明对虾Fenneropenaeus chinensis育苗水体中分别添加浓度为105、106、107、108 CFU/mL的菌株2515，测试其对中国明对虾受精卵孵化及幼体发育的影响。结果表明：水体中添加浓度高于105 CFU/mL的菌株2515后，显著降低了无节幼体变态发育至蚤状幼体的成活率(P<0.05)；分别应用血平板及显微观察法测试菌株2515对羊、鱼及对虾血细胞的溶血活性，结果显示，该菌对羊及鱼红细胞均具溶血活性，而对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei血细胞无溶血活性；设置不同温度(40、45、50、55、60、65、75 ℃)热处理菌株2515及其破碎液，结果显示，55 ℃ 1 h能够灭活该菌，且失去对鱼类红细胞的溶血活性，而抑菌物质活性可提高55.8%。研究表明，菌株2515对鱼虾具有潜在毒性，选择适当热处理，既能灭活溶血活性还可提高抗菌活性。
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  Zn²⁺胁迫对花斑裸鲤抗氧化关键基因表达和抗氧化酶活性的影响

  冉凤霞, 金文杰, 端智卓玛, 黄屾, 刘艳慧, 李梓瑄, 王振吉, 吴明辉, 简生龙, 王国杰, 李长忠

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 406-413. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-147

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  为探讨水体Zn2+对鱼类的影响，并筛选出有效的生物标记物，以花斑裸鲤Gymnocypris eckloni幼鱼(体质量为10 g±3 g)为试验对象，分别以1、2、5、10、20 mg/L Zn2+为胁迫浓度，计算24、48、72、96 h时的半致死浓度(LD50)，经1 mg/L Zn2+胁迫12、24、48、72、96 h后，采用qPCR技术检测鳃、肾脏和肝脏组织中抗氧化防御系统相关的核因子E2相关因子2(Nrf2)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)基因表达量变化，以热图分析各基因在3种组织中的应答层次，以及用吸光度法测定SOD、CAT和GPx抗氧化酶活性的变化。结果表明：Zn2+对花斑裸鲤幼鱼胁迫24、48、72、96 h时的半致死浓度(LD50)分别为5.0、3.2、2.5、2.0 mg/L，安全浓度为0.2 mg/L；在Zn2+胁迫96 h内，花斑裸鲤Nrf2、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、CAT和GPx基因表达量及SOD、CAT和GPx酶活性均有不同程度的升高，但升高幅度各异；基因表达量热图分析显示，与鳃、肾脏和肝脏组织中Nrf2的4个下游基因表达量相比，Nrf2表达量相对较低，尤其在肾脏和肝脏组织中表现更为明显。研究表明，花斑裸鲤Nrf2、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、CAT和GPx基因表达量及相关酶活性与Zn2+胁迫存在一定的时间相关性和组织特异性，其可作为预警水体Zn2+污染的备选生物标记物。
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  新疆克孜勒河厚唇裂腹鱼人工繁殖及胚胎、早期仔鱼发育研究

  赵贺, 洪继彪, 赵年桦, 胡仁云, 魏杰, 聂竹兰,

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 414-422. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-201

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  为实现厚唇裂腹鱼Schizothorax irregularis的人工养殖和资源增殖，于2019年4—5月进行了新疆克孜勒河厚唇裂腹鱼人工繁殖试验，以探究该鱼的繁殖时期、雌雄鉴别、人工催产和人工孵化等关键技术，试验设催产厚唇裂腹鱼亲鱼35组，采用人工干法授精和孵化缸淋浴式孵化方法，获受精卵20.69万粒，获水花鱼苗14.12万尾。结果表明：厚唇裂腹鱼人工催产最适水温为18.5 ℃，最适孵化水温为17.0～17.5 ℃；厚唇裂腹鱼的繁殖期在新疆维吾尔自治区南疆地区主要集中在4月下旬—5月中旬，该鱼产微黏沉性卵，成熟卵的卵径为(2.95±0.15)mm，吸水膨胀后卵径为(3.53±0.12)mm；厚唇裂腹鱼胚胎发育过程经历胚盘、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个阶段；在水温为(17.14±0.01)℃条件下，受精卵发育经过147 h 31 min孵化，总积温为2 513.01 ℃·h；初孵仔鱼全长(8.72±0.26)mm，具心跳和血液循环，多数时间静卧水底，偶有窜动；早期仔鱼发育分为眼球色素出现期、体色素出现期、鳔充气期和卵黄囊完全吸收期4个时期，出膜后432 h卵黄囊完全吸收，仔鱼全长为(21.51±0.75)mm。本研究结果可为厚唇裂腹鱼的资源保护和人工繁殖提供基础资料和科学依据。
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  放养密度对温棚养殖罗氏沼虾生长、生化指标、水质及养殖效益的影响

  倪蒙, 陈雪峰, 高强, 程海华, 华建权, 戎华南, 周志明, 原居林

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 423-429. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-209

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  为探讨温棚养殖模式下罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii不同放养密度池塘的水质及罗氏沼虾生长性能和血液生理生化指标变化，确定最适放养密度，将暂养后规格为(0.61±0.05)g的罗氏沼虾“南太湖2号”苗种随机分配到3个不同放养密度的池塘，分别为低密度组(LSD， 37.5 ind./m2)、中密度组(MSD， 45.0 ind./m2)和高密度组(HSD， 60.0 ind./m2)，每组设置3个平行，养殖时间为60 d，试验结束后测定池塘水质指标(总氮、总磷、氨氮、亚硝态氮、CODMn)，以及罗氏沼虾生长性能、生化指标(血糖、白蛋白、总蛋白、球蛋白、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、甘油三酯)。结果表明：试验末期(60 d)，HSD组池塘水中的氨氮和亚硝态氮含量显著高于LSD和MSD组(P<0.05)；HSD组罗氏沼虾的存活率、终末体质量、终末体长、头胸甲长、特定生长率均显著低于LSD和MSD组(P<0.05)，而饵料系数则显著高于LSD和MSD组(P<0.05)，但LSD和MSD组各项指标均无显著性差异(P>0.05)；MSD和HSD组虾的最终产量显著高于LSD组(P<0.05)，且MSD组产值和利润最高；HSD组罗氏沼虾的血糖和谷丙转氨酶含量显著高于LSD和MSD组(P<0.05)，总蛋白和球蛋白含量显著低于LSD和MSD组(P<0.05)。研究表明，综合考虑池塘水质，以及罗氏沼虾生长性能、血液生化指标和经济效益，最终确定温棚养殖罗氏沼虾最适放养密度为45.0 ind./m2。
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  牡蛎酶解产物改善睡眠作用效果研究

  张婷, 秦小明, 章超桦, 曹文红, 郑惠娜, 高加龙, 林海生,

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 430-436. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-181

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  为探究香港牡蛎Crassostrea hongkongensis酶解产物(enzymatic products of oysters，EPO)改善睡眠的作用效果，将试验小鼠分为阴性对照组 (灌胃等体积蒸馏水)、 阳性对照组 (灌胃地西泮2 mg/kg体质量)及EPO低、中、高剂量组(分别灌胃250、500、1 000 mg/kg体质量，分别记为EPO-L、EPO-M、EPO-H)，每天灌胃一次，连续灌胃30 d后进行直接睡眠试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间试验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验和戊巴比妥钠潜伏期试验，并采用ELISA试剂盒检测小鼠下丘脑和大脑皮层中5-羟色胺(serotonin, 5-HT)、γ-氨基丁酸(gamma aminobutyric acid, GABA)、褪黑素(melatonin, MT)、去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)和多巴胺(dopamine, DA)的含量。结果表明：牡蛎酶解产物3个剂量组均无直接睡眠作用，但与阴性对照组相比，均能显著延长小鼠睡眠时间(P<0.05)，缩短睡眠潜伏期(P<0.05)，且EPO中剂量组能显著提高小鼠入睡率(P<0.05);与阴性对照组相比，EPO低、中剂量组均能显著提高下丘脑5-HT、GABA含量(P<0.05)，且显著降低下丘脑DA、NE含量(P<0.05)，高剂量组能显著降低下丘脑DA含量 (P<0.05)；EPO低剂量组能显著提高大脑皮层GABA含量(P<0.05)，中剂量组能显著提高大脑皮层GABA、MT含量(P<0.05)，且显著降低大脑皮层DA含量(P<0.05)，高剂量组能显著提高大脑皮层MT含量(P<0.05)，且显著降低大脑皮层DA、NE含量(P<0.05)。研究表明，牡蛎酶解产物通过提高脑内抑制性神经递质5-HT、GABA、MT含量，降低兴奋性神经递质DA、NE含量，缩短睡眠潜伏期，提高睡眠发生率，延长睡眠时间，起到改善睡眠的作用，且灌胃EPO中剂量500 mg/kg体质量时改善睡眠效果最佳。
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  北京市绿藻门盘星藻形态及分类研究

  赵文, 王珊, 魏杰, 尹东鹏, 董成浩, 王哲, 李博

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 437-445. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-192

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  为探究北京市五大水系的水生生物多样性，采用野外调查和室内观察相结合的方法，于2016—2019年对北京市潮白河、大清河、永定河、北运河和蓟运河五大水系中绿藻门盘星藻属Pediastrum Myren的种类形态与分类学进行了研究。结果表明：共鉴定出绿藻门盘星藻属的单角盘星藻、斯氏盘星藻、卵形盘星藻、具孔盘星藻、二角盘星藻、双射盘星藻、缢缩盘星藻、整齐盘星藻、短棘盘星藻和四角盘星藻共10个种，单角盘星藻具孔变种、单角盘星藻颗粒变种、单角盘星藻对突变种、单角盘星藻粒刺变种、二角盘星藻纤细变种、二角盘星藻圆形变种、二角盘星藻山西变种、二角盘星藻网状变种、二角盘星藻真实变种、二角盘星藻大孔变种、二角盘星藻皱褶变种、短棘盘星藻长角变种、短棘盘星藻短角变种、短棘盘星藻镊尖变种、短棘盘星藻颗粒变种、短棘盘星藻穿孔变种、短棘盘星藻波缘变种、整齐盘星藻小齿变种、整齐盘星藻具孔变种和四角盘星藻四齿变种共计20个变种；从外层细胞的形态和角突数、是否有穿孔、细胞壁上是否有颗粒和棘刺等方面描述了盘星藻属各种和亚种的形态特征，并列出其分布水体，建立了原色图谱和分类检索表。研究表明，北京市盘星藻属有10个种20个变种，其中有20个原种或变种是北京市新记录的盘星藻种类。
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  氨基酸对铜绿微囊藻生长及叶绿素荧光参数的影响

  姚冬梅, 张树林, 张达娟, 张迎

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 446-453. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-177

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  为研究氨基酸对铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa生长及叶绿素荧光参数的影响，设定藻的初始密度为2×106 cells/mL，以6种氨基酸(天门冬氨酸、丝氨酸、精氨酸、谷氨酸、丙氨酸和甘氨酸)为唯一氮源，分析在实验室模拟自然水体不同氨基酸浓度(12、25、50、75、100 μmol/L)条件下，铜绿微囊藻细胞数量、叶绿素a含量及相关叶绿素荧光参数(Fv/Fm、ETR )的动态变化。结果表明：无氮对照组的藻细胞数量、叶绿素a含量及相关叶绿素荧光参数均显著低于各氨基酸试验组(P<0.05)；随着氨基酸浓度的升高，6种氨基酸均能促进铜绿微囊藻的生长及相关叶绿素荧光参数的提高，且多种氨基酸在浓度为100 μmol/L时达到最高值；随着培养时间的延长，除谷氨酸试验组各项指标波动明显外，其余各氨基酸试验组的藻细胞数量、叶绿素a含量及相关叶绿素荧光参数总体上均呈先上升后下降趋势，其结果基本符合藻细胞延滞期、对数生长期、稳定期的规律。研究表明，不同浓度和不同种类的氨基酸对铜绿微囊藻生长及叶绿素荧光参数提高均表现出有利特征，且氨基酸的作用程度依次为天门冬氨酸> 丝氨酸>精氨酸>丙氨酸>谷氨酸>甘氨酸，本研究结果可为揭示自然水体中氨基酸对铜绿微囊藻的影响机制提供数据参考。
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  池塘鱼菜立体种养系统的微生物群落结构分析

  邱楚雯, 袁新程, 施永海, 王韩信, 谢永德, 徐嘉波, 税春

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 454-461. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-131

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  为了解池塘鱼菜立体种养系统中微生物的群落结构特征，探究池塘鱼菜立体种养系统不同组成之间的相互关系，采用Illumina MiSeq高通量测序方法对系统不同组成的微生物16S rRNA V3～V4区进行测序，比较分析了水体、底泥、蕹菜Ipomoea aquatica Forsk根际与根表、暗纹东方鲀Takifugu obscures肠道及凡纳滨对虾Litopenaeus vanname肠道微生物群落多样性及差异。结果表明：池塘鱼菜立体种养系统的6组样品细菌分布于62门1 503属，优势菌门包括变形菌门Proteobacteria (27.71%)、放线菌门Actinobacteria (16.37%)、蓝细菌门Cyanobacteria (16.05%)和拟杆菌门Bacteroidetes (10.07%)，主要优势菌属包括红球菌属Rhodococcus、 葡萄球菌属Staphylococcus、弓形杆菌属Arcobacter、红杆菌属Rhodobacter、硫杆菌属Thiobacillus和支原体属Mycoplasma；水体的优势菌门为放线菌门、变形菌门、蓝细菌门和拟杆菌门，底泥的优势菌门为变形菌门和拟杆菌门，蕹菜根际及根表的优势菌门为变形菌门、蓝细菌门和拟杆菌门，暗纹东方鲀肠道的优势菌门为厚壁菌门Firmicutes、Epsilonbacteraeota、蓝细菌门和拟杆菌门，凡纳滨对虾肠道的优势菌门为放线菌门和变形菌门；池塘鱼菜立体种养系统中的功能性细菌分布略有不同，蕹菜根表硝化细菌的相对丰度显著高于水体、鲀肠道和虾肠道(P<0.05)，蕹菜根际反硝化细菌的相对丰度显著高于其他各组(P<0.05)，水体和蕹菜根际固氮菌的相对丰度显著高于虾肠道、底泥和鲀肠道(P<0.05)。研究表明，池塘鱼菜立体种养系统的不同组成(底泥、水体、蕹菜根际与根表、养殖对象肠道)由于功能不同微生物群落结构存在较大差异，在蕹菜根际及根表包含有相对丰度较高的硝化细菌、反硝化细菌、固氮菌，有助于促进氮循环，提高系统中氮的利用率，而养殖对象肠道中既有有益菌也有致病菌属。
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  Na⁺、K⁺、Ca²⁺、葡萄糖、pH、温度对北方须鳅精子活力的影响

  韩峰, 骆小年, 段友健, 罗超, 缪云亮, 曾永聪

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 462-469. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-207

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  为了解北方须鳅Barbatula barbatula nuda精子的生理特性，研究了不同离子浓度、葡萄糖浓度、pH、温度等因子的变化对性成熟北方须鳅(体质量为10～38 g)精子活力的影响。结果表明：Na+浓度为68 mmol/L时，北方须鳅精子活力最强，快速运动时间(FT)、寿命(LT)、激活率分别为(77±23)s、(495±154)s、95%；K+浓度为80 mmol/L时，精子活力最强，FT、LT和激活率分别为(68±10)s、(412±162)s和95%；Ca2+浓度为50 mmol/L时，精子活力最强，FT、LT和激活率分别为(77±13)s、(281±26)s和95%；葡萄糖浓度为180 mmol/L时，北方须鳅精子活力最强，FT、LT和激活率分别为(88±11)s、(272±34)s和90%；在Tris或甘油溶液中，FT、LT和激活率均小于对照组；pH 为3.0～5.0时精子不运动，pH为7.0时精子活力最强，FT、LT和激活率分别为(87±11)s、(128±17)s、90%；温度为5～20 ℃时，精子活力变化不显著；混合激活液A(Na+ 68 mmol/L、K+ 80 mmol/L 2种离子溶液的体积比为1∶1)及激活液B(Na+ 68 mmol/L、K+ 80 mmol/L、Ca2+ 50 mmol/L、葡萄糖180 mmol/L 4种离子溶液的体积比为1∶1∶1∶1)皆能提高精子活力，其FT、LT、精子激活率分别为(91±16)s、(552±90)s、95%，以及(112±17)s、(707±60)s、95%。研究表明，北方须鳅精子适宜的温度为5～20 ℃，适宜pH为7.0～8.0，Na+、K+、Ca2+、葡萄糖对北方须鳅精子活力有增强效果，混合激活液B(Na+ 68 mmol/L、K+ 80 mmol/L、Ca2+50 mmol/L、葡萄糖180 mmol/L 4种离子溶液的体积比为1∶1∶1∶1)效果最佳。
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  曝气条件对铁基复合填料生物滤器脱氮性能及菌群变化的影响

  隗陈征, 刘鹰, 任纪龙, 马洪婧, 吴英海, 韩蕊,

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 470-477.

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  填料和微生物是影响曝气生物滤器(biological aerated filter, BAF)污水处理性能的重要因素，为探究不同曝气条件下曝气生物滤器处理海水养殖废水脱氮性能及填料上微生物群落特征，试验设置3种不同曝气条件的BAF处理组(24 h连续曝气、12 h间歇曝气和0 h曝气)，并将聚碳酸亚丙脂(PPC)凝胶亲水填料和海绵铁以3∶1(质量比)混合形成复合固定化生物填料引入BAF系统。结果表明：铁基复合填料 12 h间歇曝气处理的氨氮去除率高且积累低；12 h间歇曝气处理中海绵铁填料的微生物群落多样性指数(Shannon、Chao1和ACE)高于其他处理组，这说明该处理的微生物群落多样性和丰度最高；12 h间歇曝气处理中海绵铁填料中的不动杆菌属Acinetobacter、代尔夫特菌属Delftia及在PPC填料处理中的发光杆菌属Photobacterium等具备反硝化能力的菌属相对丰度高于其他处理组。研究表明，铁基复合填料BAF在12 h间歇曝气条件下富集了更多的反硝化细菌，使曝气生物滤器具有良好的脱氮性能，同时将节省更多能耗。
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  三门湾海域渔业生物群落结构及营养级变化特征

  俞松立, 王咏雪, 韩晓凤, 章翊涵, 来洪运, 章凯, 张丽源, 水柏年

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 478-487. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-133

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  为揭示三门湾海域渔业生物群落特征现状及变化情况，于2018年春季(4月)、夏季(7月)、秋季(10月)和冬季(12月)进行了渔业资源调查，并利用相对重要性指数(IRI)、资源密度、物种多样性、ABC曲线、聚类分析、非度量多维标度分析、生态位宽度和营养级结构等方法，对该海域渔业生物群落进行了研究。结果表明：夏季渔业生物种类数最多(84种)，冬季最少(42种)；春、夏、秋、冬4个季节渔业生物优势种种数依次为3、6、6、2种；夏季渔业生物的数量密度和质量密度均为最大，而冬季均为最小；秋季Shannon-Wiener多样性指数平均值最大，冬季最小；秋季均匀度指数平均值最大，冬季最小；夏季丰富度指数平均值最大，冬季最小；ABC曲线分析显示，2018年4个季节渔业生物群落均受到中度干扰；群落结构分析显示，渔业生物群落季节间差异较大，渔业生物的生态位宽度值在不同季节中存在较大差异；渔业生物群落营养级结构总体呈现第三营养级种类的个体数量和生物量均占较大优势，第二营养级和第四营养级种类的个体数量和生物量相对较少，渔业生物群落结构稳定性弱化。研究表明，三门湾海域渔业生物种类数虽有一定恢复，但渔业资源衰退情况尚未得到有效遏制，今后需加强对该海域渔业资源与海洋生态的修复。
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  舟山近海常见鱼类分类多样性研究

  王业辉, 胡成业, 宋娜, 王晓艳, 高天翔

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 488-494. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-174

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  为揭示舟山近海常见鱼类分类多样性，以及更合理地保护和利用舟山近海渔业资源，根据舟山近海鱼类资源调查与文献数据资料，基于Nelson分类系统对鱼类物种进行了系统整理，利用分类阶元包含指数(TINCLi)、分类多样性指数(Δ+和Λ+)、属间-科间多样性指数(G-F指数)和相对丰富度指数(Rr)等，从不同分类阶元分析了舟山近海常见鱼类的分类多样性。结果表明：舟山近海常见鱼类共16目63科118属154种，其中，鲈形目种类占绝对优势；鱼类组成目所拥有的科、属、种平均值分别为3.88、7.38、9.63，科所拥有的属、种平均值分别为1.90、2.48，属所拥有的种平均值为1.31，在目、科级水平的分类阶元包含指数值高于唐山湾与东山湾，但低于大亚湾与东海大陆架；舟山近海常见鱼类的平均分类差异指数(Δ+)和分类差异变异指数(Λ+)分别为60.0和340.8，Δ+值低于唐山湾、东山湾、大亚湾、东海大陆架4个研究海域，而Λ+值则高于上述研究海域；G-F指数分析显示，G指数为4.67，F指数为23.44，G-F指数为0.80，均高于浙江近海的杭州湾、象山湾、三门湾、台州湾、乐清湾等5个海湾；相对丰富度指数结果显示，目级水平上鲈形目最高(462.5)，科级水平上虾虎鱼科最高(26.98)。研究表明，舟山近海常见鱼类种类组成较为集中，亲缘关系较近，分类均匀程度较低，在科、属水平上的多样性较高。
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  基于低场核磁共振技术对不同干燥方式的海马品质研究

  吴靖娜, 陈晓婷, 苏永昌, 乔琨, 陈贝, 刘智禹

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 495-502. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-193

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  为探究不同干燥方式对海马Hippocampus品质特性的影响，采用热风干燥(100 ℃)、冷风干燥(40 ℃)、真空冷冻干燥(-26～-30 ℃，0.1 kPa)和真空干燥(70 ℃，133 Pa)等方式对三斑海马Hippocampus trimaculatus(湿体质量2.5～3.0 g)进行处理，测定并分析了海马干在不同干燥方式下的干燥性能、收缩率、水分分布等指标。结果表明：不同干燥方式对三斑海马的干燥性能、收缩率有显著性影响(P<0.05)，其中，热风干燥与真空干燥的耗时和耗能分别为15 h、4.03 kW·h/kg 和10 h、2.46 kW·h/kg，干燥性能较优，而真空冷冻干燥的收缩率最低；低场核磁检测结果显示，不同干燥方式的干燥过程中海马干的水分含量下降，主要是不易流动水和自由水含量降低；海马干复水过程的结果显示，不易流动水不断上升，热风干燥和真空冷冻干燥的复水速度较快。研究表明，热风干燥与真空干燥用时短，具有节能效果，而真空冷冻干燥处理的海马品质较优，复水性能较好。
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  基于注意力机制和深度学习模型的外来海洋生物命名实体识别

  贺琳, 张雨, 巴韩飞

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 503-509. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-194

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  为解决因外来海洋生物领域实体复杂且实体间存在嵌套导致命名实体识别效果较差等问题，提出基于融合注意力机制的卷积神经网络(CNN)-双向门控循环单元网络(BiGRU)-条件随机场(CRF)网络模型进行外来海洋生物命名实体识别，并构造词向量、词性特征向量等特征作为网络模型的联合输入，以提升网络模型识别效果。结果表明：使用融合多特征向量的CNN-BiGRU-CRF网络模型对外来海洋生物名称实体、时间实体、地名实体3类实体上的命名实体识别结果平均准确率达到了90.62%，平均召回率达到了89.50%，平均F1值达到了90.05%，较传统命名实体识别方法均有较大提高。研究表明，本研究中提出的网络模型可以充分提取文本特征，解决了文本的长距离依赖问题，对外来海洋生物领域的命名实体识别具有较好的识别效果。
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  鱼类抗病育种研究进展

  周欣, 高风英, 卢迈新

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 510-523. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-156

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  随着水产养殖模式从粗放型转变为集约型，鱼类病害问题日益突出，培育优良的抗病品种可以有效解决和减少病害问题。本文主要综述了近年来鱼类抗病育种工作，包括家系与群体选育、分子标记辅助选育、全基因组选育及MHC基因多态性与抗病相关性的研究进展，家系与群体选育作为选择育种的重要手段之一，已经广泛应用于多种鱼类的抗病育种工作中，分子标记辅助选育和全基因组选育等手段的提出推动了水产领域抗病育种研究的进步，而与抗病表型相关联的鱼类MHC基因的高度多态性，使其在作为抗病育种分子标记候选基因方面备受关注。同时指出了抗病育种研究中存在的问题和不足，并对未来鱼类抗病育种的前景进行了展望，旨在为鱼类的绿色健康养殖提供参考。
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  海鞘生物黏附机制及应用研究进展

  程佳威, 李世国, 李茜, 战爱斌,

  大连海洋大学学报. 2021, 36(3): 524. https://doi.org/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-185

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  海鞘是一种典型的海洋污损生物，其在幼虫期可以通过头部前端的乳突结构快速并暂时性的附着于水下基质表面，之后相继发育出壶腹、黏附突起、匍匐枝等特异性黏附器官，实现成体的永久性黏附。从生物学角度看，这些特化的器官及其涉及的复杂黏附与调控机制给海洋生物污损治理带来了巨大挑战，但从材料学角度上看，海鞘黏附机制为水凝胶或高效防污表面等新型仿生材料的研发带来了新的思路。本文全面综述了海鞘幼体和成体两个阶段的黏附特征和机制，以及海鞘生物污损防控与仿生材料应用研究进展，并针对海鞘生物黏附研究领域存在的问题，从黏附组织器官的研究拓展、黏附蛋白质的鉴定与分析、特异性抗海鞘黏附材料设计、基于分子层面的海鞘黏附仿生研究等方面提出未来发展建议，旨在为抗污损及仿生材料的研发提供参考。