大连海洋大学学报

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1. 中国鱼类疫苗技术研发及应用研究进展

王启要

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 1-9. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-041

摘要（5008）

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PDF（pc）（537KB）（3395）

随着水产养殖业高密度、规模化、集约化高速发展，病害已成为产业健康可持续发展的重大挑战。鱼类接种疫苗既可以防控水产病害发生、减少产业的经济损失，又可以减少或消除由于大量使用抗生素带来的健康危害、生态风险和水产品食品安全等问题，从而支撑水产养殖业健康、绿色发展。本文综述了目前国内外鱼类疫苗开发中包括灭活疫苗、减毒/弱毒活疫苗、亚单位/合成肽疫苗和DNA疫苗在内的主要技术策略及相应的接种、递送方式，着重介绍了已经获得中国新兽药证书的9个鱼类疫苗及其应用，以及中国鱼类疫苗审批管理的情况。针对中国高效鱼类疫苗品种供给不足和开发进程漫长等问题，提出了未来应加强鱼类病原与病害相关的基础研究、利用多组学技术推进高效鱼类疫苗的分子设计及构建鱼类疫苗工程研究技术平台等鱼类疫苗工程领域的重点研究方向。

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2. 双斑东方鲀海盘虫病病原鉴定和鳃组织病理观察

吴建绍, 陆振, 杨求华, 朱志煌, 周宸, 葛辉

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 10-18. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-079

摘要（5056）

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PDF（pc）（7032KB）（3186）

海盘虫 Haliotrema sp.病是双斑东方鲀 Takifugu bimaculatus 养殖生产上主要致死性病害之一，为深入了解该病，本研究中从2016年6月—2019年6月对池塘养殖的双斑东方鲀海盘虫病发病情况进行调查，利用形态学观察、几丁质结构特征分析和分子生物学技术对病原虫体进行鉴定与分析，并观察病鱼鳃组织病理变化。结果表明：该病春末夏初和秋季易发，发病时病鱼主要症状为缓游于水面，食欲减退或不摄食；体色苍白，体形消瘦，尾鳍、臀鳍缺损，鳃丝上有大量海盘虫虫体，鳃片黏液多，肝脏、脾脏充血；病原虫体经形态学观察和几丁质结构特征分析，鉴定为双裂海盘虫 H.bilobatus ，双斑东方鲀为其宿主新记录；对该虫体18S rDNA和28S rDNA(C1～D2区)基因片段扩增测序分析显示，其18S rDNA序列(1 282 bp)与栉齿刺尾鲷海盘虫 H.ctenochaeti 、丝蝴蝶鱼海盘虫 H.aurigae 等序列相似，一致性达97.68%～98.30%，其28S rDNA序列(886 bp)(C1～D2区)与镰茎海盘虫 H.sicklocirrus 序列最相似，但一致性仅达90.28%；基于18S rDNA 和28S rDNA序列构建的系统发育树均显示，双裂海盘虫单为独立分支，为NCBI基因数据库未登记海盘虫属虫种；鳃组织病理学观察发现，虫体寄生导致双斑东方鲀鳃丝机械损伤、鳃上皮组织增生或脱落，甚至引起鳃组织病变、出血，重度感染会引发鳃小片坏死、崩解，大量黏液浸润鳃丝，从而使病鱼呼吸困难而死亡。研究表明,双裂海盘虫为福建池塘养殖双斑东方鲀海盘虫病的感染病原，该病春末夏初和秋季易流行。

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3. 半滑舌鳎套肠症病原的分离鉴定和组织病理观察

何晓旭, 刘克明, 汪笑宇, 郝爽, 贾磊, 邵蓬, 罗璋

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 19-25. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-119

摘要（4560）

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PDF（pc）（3956KB）（3094）

为研究半滑舌鳎 Cynoglossu semilaevis Günther套肠症的病原，于2020年9月从天津市滨海新区某养殖车间采集患病鱼10尾(体长10～15 cm)，利用寄生虫检查、病原菌分离、组织病理切片、人工感染试验、生理生化试验、16S rDNA基因序列分析和药物敏感性试验等方法对患病鱼及病原进行了研究。结果表明：患病鱼体表未发现大量寄生虫，脾脏中存在大量结节，肠黏膜组织和肠绒毛腐烂脱落，从肾脏中分离到的优势菌株ST-2020-2能引起健康半滑舌鳎发病，造成90%的死亡率；综合生理生化特征和16S rDNA基因序列分析结果，将其鉴定为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 Photobacterium damselae subsp. piscicida ；药敏试验显示，菌株ST-2020-2对链霉素、环丙沙星、氟苯尼考敏感，对四环素、卡那霉素、氨苄西林中度敏感，对新霉素、多黏菌素、复方新诺明等10种药物具有耐药性。研究表明，美人鱼发光杆菌杀鱼亚种是半滑舌鳎套肠症的病原，这为该病的防控提供了基础数据。

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4. 全雌翘嘴鳜与自交翘嘴鳜的胚胎发育及仔幼鱼生长比较

龚万达, 宋文, 钟林, 梁骁, 王守荣, 曾可为

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 26-33. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-092

摘要（5787）

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PDF（pc）（2870KB）（3167）

为比较全雌翘嘴鳜 Siniperca chuatsi 与自交翘嘴鳜 Siniperca chuatsi 胚胎发育及仔幼鱼生长速度，采用人工繁殖的方法获得全雌翘嘴鳜和自交翘嘴鳜后代的受精卵，在水温为26～28 ℃条件下孵化，对全雌翘嘴鳜和自交翘嘴鳜后代的胚胎发育进行观察与比较，并详细记录了受精卵受精、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个连续发育阶段特征，结合胚胎发育特征进一步比较了二者在仔幼鱼阶段的生长状况。结果表明：在水温、孵化方式等外部条件相同的情况下，全雌翘嘴鳜、自交翘嘴鳜的受精卵从受精到孵化出膜所需的总时间分别为39 h 12 min和38 h 44 min，各时期的胚胎发育特征基本一致；在仔幼鱼生长阶段，21日龄后全雌翘嘴鳜与自交翘嘴鳜的生长呈显著性差异( P <0.05)；仔幼鱼全长-体质量生长结果显示，全雌翘嘴鳜的生长方程为 W 全雌鳜 =0.016 L 2.971 ( R 2 =0.991)，说明在仔幼鱼阶段全雌翘嘴鳜略呈匀速生长，自交翘嘴鳜的生长方程为 W 自交鳜 =0.020 L 3.008 ( R 2 =0.991)，说明在该阶段自交翘嘴鳜体质量生长快于全长生长。研究表明，全雌翘嘴鳜与自交翘嘴鳜的胚胎发育时间及其特征基本一致，但全雌翘嘴鳜仔幼鱼的生长速度显著快于自交翘嘴鳜。

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5. 红鳍东方鲀生长激素释放激素(GHRH)基因多态性及其与生长性状的关联分析

王梓祎, 苟盼盼, 杨金, 马明星, 杨诗晨, 李楠, 仇雪梅

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 34-41. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-205

摘要（5836）

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为研究生长激素释放激素(growth hormone-releasing hormone,GHRH)基因对红鳍东方鲀 Takifugu rubripes 生长性状的影响，设计4对可覆盖 GHRH 基因全序列的PCR引物，采用直接测序法对序列进行分析比对以筛选多态位点。试验群体为随机挑选的219尾红鳍东方鲀，于该群体的6月龄及12月龄时测量其体质量、体长、体高等10个生长相关性状，随后将筛选出的多态位点与生长性状进行关联分析，并进行连锁不平衡及双倍型分析。结果表明：共筛选出7个SNPs位点，分别为C81T、G315C、C1083T、A1524G、G2107A、T2125C和G2256A，其中，C81T、G315C和A1524G 3个位点的多态性与大多数生长性状均存在显著关联性( P <0.05)；G2256A与T2125C，G207A与C083T位点均处于连锁不平衡状态，但并非完全连锁；6月龄群体中，双倍型D4和D5的体质量平均值显著高于D3( P <0.05)，12月龄群体中，双倍型D5的体质量平均值显著高于D3( P <0.05)。研究表明，C81T、G315C和A1524G 3个位点是对红鳍东方鲀生长有正向影响的优势位点，6月龄群体中，双倍型D4和D5为优势基因型，12月龄群体中，双倍型D5为优势基因型，在后续红鳍东方鲀选育过程中可以优先选择这些位点和基因型。

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6. 水温和光照调节对五条鰤性成熟及脑垂体促性腺激素fshβ和lhβ基因表达的影响

徐文刚, 刘立明, 王九龙, 张建柏, 于文松, 真鍋颯一郎, 迟守峰

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 42-48. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-072

摘要（5054）

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PDF（pc）（3105KB）（3178）

为了解环境因子对五条鰤 Seriola quinqueradiata 内分泌系统的影响，分析综合运用水温和光照调节对其性腺发育成熟度及与繁殖相关的促卵泡激素基因( fshβ )和黄体生成素基因( lhβ )表达的影响，试验设置对照组和处理组(每组水槽放置20尾鱼)，对照组为自然水温和光照饲养，处理组在水温恒定20 ℃和光照10L∶14D条件下饲养，试验时间为2018年1月20日—3月20日，每月采样一次，比较各阶段试验鱼的性腺指数(GSI)、性腺发育成熟度、脑垂体中 fshβ 和 lhβ 基因含量，以及血清中类固醇激素雌二醇(E 2 )和睾酮(T)含量的差异。结果表明：对照组鱼在各采样阶段其GSI均无显著性差异( P >0.05)，且性腺发育为未成熟阶段，处理组鱼在试验进行1个月和2个月后，其GSI均显著高于对照组( P <0.05)，且性腺发育为成熟阶段；试验进行1个月和2个月后，对照组鱼脑垂体中 fshβ 和 lhβ 基因含量均无显著性变化( P >0.05)，但处理组鱼脑垂体中 fshβ 基因含量均显著高于对照组( P <0.05)，试验进行2个月后，处理组鱼脑垂体中 lhβ 基因含量显著高于对照组( P <0.05)；试验进行1个月和2个月后，对照组鱼血清中E 2 和T含量均无显著性变化( P >0.05)，但处理组鱼血清中E 2 和T含量均显著高于对照组( P <0.05)。研究表明，综合运用水温和光照调节有利于促进五条鰤脑垂体中 fshβ 和 lhβ 含量的增加，从而促进其血清中E 2 和T浓度的上升，最终诱导其性腺发育成熟。

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7. 斑鳢叉头框转录因子基因Foxl2的克隆表达及性类固醇激素刺激下的表达响应

吴燕铎, 欧密, 高丹丹, 陈昆慈, 罗青, 刘海洋, 赵建

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 49-60. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-066

摘要（5188）

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PDF（pc）（26665KB）（3203）

为探究叉头框转录因子 Foxl 2基因(forkhead transcription factor gene 2)在斑鳢 Channa maculata 性腺发育过程中的作用，采用RT-PCR和RACE技术克隆出斑鳢 Foxl 2基因，利用qRT-PCR解析 Foxl 2基因在雌雄斑鳢1龄成鱼组织、不同发育时期性腺中的表达情况，以及外源性激素诱导后雌雄斑鳢性腺中 Foxl 2的表达变化，通过酶联免疫法测定性腺不同发育时期雌雄斑鳢血清中的雌性激素(estrogen,E)总含量，并利用免疫组化技术检测性腺中Foxl2蛋白表达的细胞类型。结果表明：克隆获得斑鳢 Foxl 2 cDNA序列全长为1 939 bp，开放阅读框(ORF)为921 bp，共编码306个氨基酸；组织表达分析显示， Foxl 2在卵巢中表达量最高且极显著高于精巢( P <0.01)，但在鳃和脑组织中雄鱼表达量显著高于雌鱼( P <0.05)；性腺发育时期表达分析显示， Foxl 2在卵巢中表达量高于精巢，且在孵化出膜后105 d时，卵巢中表达量达到最高，精巢中表达量最低，两者表达量存在极显著性差异( P <0.01)，血清中雌激素总含量变化与之相似；免疫组织化学检测显示，Foxl2蛋白表达于斑鳢卵巢成熟卵母细胞周围的颗粒细胞，精巢中未检测到Foxl2表达信号；经外源性类固醇激素17α-乙炔基雌二醇(17α-ethynylestradio,EE2)和17α-甲睾酮(17α-methyltestosterone,MT)处理后，卵巢中 Foxl 2的表达均受到抑制，但精巢中表达水平被EE2上调，被MT下调。研究表明， Foxl 2基因在斑鳢性腺中呈现明显的性别二态性表达，推测其参与卵巢的发育和维持，通过外源激素诱导， Foxl 2可能响应性类固醇激素的调节，本研究从mRNA和蛋白层面初步揭示了 Foxl 2在斑鳢性腺发育中的重要作用，为深入研究其性别分化机制及性别控制技术提供了科学参考。

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8. 珍珠龙胆石斑鱼紧密连接蛋白基因Claudin-3与Claudin-12的克隆及精氨酸干预下的肠道表达

李广, 崔晓, 姚春凤, 陈东鸿, 何凯, 陈冠霖, 韩煜轩, 杨奇慧, 迟淑艳

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 61-70. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-083

摘要（5139）

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PDF（pc）（2835KB）（3202）

为评价 Claudin -3与 Claudin -12基因在珍珠龙胆石斑鱼 Epinephelus fuscoguttatus ♀× E.lanceolatus ♂生长和肠道黏膜屏障中的作用，通过同源克隆及RACE PCR技术克隆珍珠龙胆石斑鱼 Claudin -3和 Claudin -12基因的全长，采用qRT-PCR技术分析 Claudin -3和 Claudin -12基因在珍珠龙胆石斑鱼脑、鳃、皮肤、肌肉、肝脏、胃、前肠、中肠、后肠、头肾、体肾、脾和心脏13种组织的表达情况，并通过饲料精氨酸干预评估上述两个基因在肠道的表达情况。结果表明： Claudin -3 cDNA全长序列为1 544 bp，包括一个153 bp的5′末端非翻译区(UTR)和743 bp的3′UTR， Claudin -3的开放阅读框(ORF)为648 bp，可编码215个氨基酸的蛋白，预测该蛋白相对分子质量为23 100； Claudin -12 cDNA全长序列为1 236 bp，包括一个118 bp的5′UTR和92 bp的3′UTR， Claudin -12的ORF为1 026 bp，可编码341个氨基酸的蛋白，预测该蛋白相对分子质量为37 400；系统进化树和氨基酸序列比对显示，珍珠龙胆石斑鱼 Claudin -3与斜带石斑鱼亲缘关系最近，同源性最高，一致性高达98.14%，珍珠龙胆石斑鱼Claudin-12与 width=13,height=12,dpi=110

的亲缘关系最近，同源性最高，一致性高达91.75%； Claudin -3和 Claudin -12基因在被检测的13种组织中均有表达， Claudin -3 mRNA在鳃和体肾中表达量最高( P <0.05)，其次是中肠和肝脏， Claudin -12在脑中表达量最高( P <0.05)，其次是中肠和后肠；饲料中精氨酸含量为3.06%时，珍珠龙胆石斑鱼增重率及肠道 Claudin -3和 Claudin -12基因表达水平显著高于1.96%和3.74%精氨酸组( P <0.05)。研究表明， Claudin -3和 Claudin -12基因表达在适宜精氨酸水平的影响下上调，可维护石斑鱼肠道黏膜屏障完整，并促进鱼体生长。

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9. 尼罗罗非鱼清道夫受体基因Scara3的克隆及病原微生物刺激后的表达响应

胡惠玲, 汪志文, 黎源, 鲁义善, 简纪常

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 71-79. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-103

摘要（5270）

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为探究清道夫受体3(scavenger receptor class a member 3,Scara3)在尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus抵御病原微生物过程中的作用，采用聚合酶链式反应克隆得到罗非鱼Scara3 基因，利用荧光定量PCR技术分析Scara3在健康尼罗罗非鱼组织分布及细菌、病毒感染后的表达情况，并进行亚细胞定位分析。结果表明：克隆得到尼罗罗非鱼Scara3基因cDNA全长序列为3 889 bp，开放阅读框(ORF)为1 827 bp，编码608个氨基酸，具有跨膜结构域和胶原(Collagen)结构域；多序列比对发现，Scara3氨基酸序列在脊椎动物中相对保守；亚细胞定位显示，Scara3蛋白在全细胞分布；荧光定量PCR分析显示，Scara3基因在健康罗非鱼各组织中均有表达，在血液、肠道、皮肤和胸腺等组织中表达量较高且显著高于其他组织(P<0.05)；经脂多糖(LPS)、灭活无乳链球菌Streptococcus agalactiae和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激罗非鱼头肾白细胞后，Scara3表达量显著上调(P<0.05)，经灭活无乳链球菌和Poly I:C刺激后，肠道、头肾和皮肤组织中的基因表达量表现出时序性。研究表明，尼罗罗非鱼在对细菌和病毒感染的免疫反应活动中，Scara3基因起着重要作用，本研究结果为后期硬骨鱼类中Scara3基因的功能研究提供了科学参考。

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10. 低温胁迫对不同品系暗纹东方鲀肠道微生物群落结构的影响

汪倩, 翟万营, 韩爽, 朱新鹏, 涂翰卿, 陈良标

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 80-87. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-059

摘要（5132）

HTML （11）

PDF（pc）（8702KB）（3309）

为研究低温下鱼类肠道微生物的多样性，揭示低温胁迫对不同品系暗纹东方鲀 Takifugu fasciatus (体质量300 g)肠道微生物群落结构的影响差异，通过持续降低水温，提取耐寒型暗纹东方鲀“中洋1号”(“Zhongyang No.1”)和野生型暗纹东方鲀肠道微生物基因组总DNA，并采用Illumina高通量测序技术检测肠道微生物群落多样性。结果表明：两个品系的暗纹东方鲀肠道内微生物群落组成相似，但丰度不同；“中洋1号”肠道微生物的OTUs、丰富度和多样性均小于野生型暗纹东方鲀，经过长期低温驯化的 “中洋1号”肠道微生物种类趋于一致；与野生型暗纹东方鲀相比，“中洋1号”暗纹东方鲀肠道微生物中，弓形杆菌norank_f_Arcobacteraceae、螺旋体属 Brevinema 细菌相对丰度较高；功能预测显示,“中洋1号”肠道中微生物具有较高的碳水化合物运输与代谢及脂质转运与代谢等功能。研究表明，“中洋1号”肠道微生物多样性低于野生型暗纹东方鲀，随着温度降低，“中洋1号”肠道微生物的多样性也呈现下降趋势，低温对降低鱼类肠道微生物群落多样性组成可能有重要影响。

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11. 暗适应条件下斑马鱼的光谱敏感性

卢克祥, 许柳雄, 钱卫国

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 88-94. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-045

摘要（4855）

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PDF（pc）（943KB）（3298）

为研究暗适应条件下斑马鱼 Danio rerio 视网膜电图(ERG)试验中的最佳试验参数和光谱敏感性，选取体长为3.5～4.0 cm的6月龄斑马鱼，探究了斑马鱼视网膜电图试验中的最低暗适应时间和闪光刺激时间间隔，以ERG 的b波振幅分量作为对光刺激的响应分析了斑马鱼的暗视光谱敏感性。结果表明：斑马鱼的ERG试验中暗适应时间至少为90 min( t 检验， P >0.05)，闪光刺激时间间隔至少为50 s(配对 t 检验， P >0.05)；暗适应条件下，斑马鱼的光谱敏感性函数在可见光波段和紫外光波段均出现了敏感峰值，敏感峰值分别出现在500 nm和365 nm波长处，且紫外敏感峰值相较于可见光敏感峰值降低约0.28个lg单位。研究表明，暗适应的斑马鱼对可见光和紫外光均表现出敏感性，其视网膜中的U-视锥细胞和视杆细胞共同参与了暗视视觉，增加了暗视光谱敏感范围，从而提高了暗视视觉的灵敏度。

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12. 生物表面活性剂鼠李糖脂对寄生水霉的体外抑制作用

刘韵怡, 戚建华, 王年, 郁小娟, 何轩灏, 刘轩明, 宋增福

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 95-103. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-048

摘要（4567）

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PDF（pc）（8606KB）（3364）

为研究生物表面活性剂鼠李糖脂(rhamnolipid)对寄生水霉 Saprolegnia parasitica 的体外抑制作用，开发水生动物水霉病的新型绿色防控制剂，采用倍比稀释法、菌丝生长速率法、菌丝干质量法和孢子萌发试验对鼠李糖脂抑制寄生水霉的活性进行检测，通过测定寄生水霉菌体电导率，研究鼠李糖脂对寄生水霉菌体细胞膜通透性的影响，并用光学显微镜、电子显微镜观察鼠李糖脂对寄生水霉菌丝体形态学的影响。结果表明：鼠李糖脂对寄生水霉菌丝和孢子的最小抑制浓度(MIC)分别为125、15.625 mg/L；当鼠李糖脂质量浓度为15.625 mg/L时，对菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为59.84%、85.70%，且鼠李糖脂对寄生水霉菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率均随鼠李糖脂质量浓度的增加而升高；电导率试验显示，鼠李糖脂使寄生水霉菌体细胞膜通透性增加，以15.625 mg/L鼠李糖脂处理寄生水霉孢子10 h后，电导率升高了39.57%，以125 mg/L鼠李糖脂处理寄生水霉菌丝体6 h后，电导率升高了68.10%；形态观察显示，鼠李糖脂对寄生水霉菌丝体具有一定的破坏作用。研究表明，鼠李糖脂对寄生水霉具有良好的抑制效果，本研究结果可为研制绿色新型水生动物水霉病防控制剂提供新的思路。

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13. 淡水池塘养殖尾水处理系统对氮磷的净化效果

徐嘉波, 施永海, 刘永士

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 104-112. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-097

摘要（4839）

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PDF（pc）（2100KB）（3293）

为开展池塘养殖尾水达标排放处理技术的研究，以湿地(芦苇、香蒲、菱角)、水生动物(梭鱼)净化塘、水生植物(凤眼莲、蕹菜)净化塘作为净化功能区，构建池塘养殖尾水处理系统，按照养殖池塘与尾水处理系统面积比为9.8∶1设置，在试验周期内，对13个养殖池塘(5 hm 2 )排放养殖尾水中总氮(TN)、总磷(TP)进行尾水处理系统各级沿程监测。结果表明：2019—2020年，养殖尾水处理系统进水中TN、TP质量浓度分别为(2.025±1.031)、(0.627±0.734)mg/L，经处理后排放水中TN、TP质量浓度分别为(1.323±0.427)、(0.427±0.369)mg/L，两年间TN、TP平均去除率分别为34.67%、31.89%，系统整体对TN、TP的净化效果显著；系统各级沿程对TN、TP的去除均符合一级动力学，养殖尾水依次流经净化功能区，去除率逐级升高。研究表明：水生动物净化塘对TN的净化效果显著，多种水生植物组合的净化塘对TN、TP的净化效果均显著；随季节演变，养殖尾水处理系统对较高含量的TN、TP仍能保持良好的净化效果，水生植物净化塘在秋季对TN、TP净化发挥了关键作用。

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14. 淡水养殖池塘微型和超微型浮游植物的群落结构组成

卫鹏, 毕相东, 戴伟, 张达娟, 李宛津, 董少杰

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 113-119. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-065

摘要（5534）

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为了解淡水养殖池塘浮游植物群落结构组成，于2018年6—9月对加州鲈 Micropterus salmoides 2个养殖池塘进行定点采样，分别采用显微镜观察法和高通量测序技术对池塘内微型浮游植物(粒径>3.0 μm)和超微型浮游植物(粒径为0.2～3.0 μm)的群落结构进行了研究。结果表明：微型浮游植物叶绿素a含量为5.25～9.79 μg/L，超微型浮游植物叶绿素含量为0.62～2.03 μg/L，超微型浮游植物对总浮游植物叶绿素a浓度的贡献率为9.8%～17.2%,显著低于微型浮游植物(82.8%～90.2%)( P <0.05)；养殖池塘微型浮游植物共有4门(蓝藻门Cyanophyta、硅藻门Bacillariophyta、绿藻门Chlorophyta和裸藻门Euglenophyta)24属，其中蓝藻门占绝对优势，6—9月，其含量逐月减少；以传统分类学界定为前提，高通量测序结果中只发现1种超微原核浮游植物(聚球藻 Synechococcus )，其6、7月相对丰度明显高于8、9月；除聚球藻外，粒径0.2～3.0 μm的浮游植物中同时发现其他6属超微原核浮游植物；超微真核浮游植物分别隶属于4门(淡色藻门Ochrophyta、双鞭毛虫门Dinoflagellata、隐藻门Cryptophyta和绿藻门)7纲，其中绿藻纲Chlorophyceae占绝对优势。研究表明，与超微型浮游植物相比，非贫营养化养殖池塘更适合于微型浮游植物的生长。

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15. 基于稳定同位素技术的东南太平洋公海茎柔鱼摄食生态分析

操亮亮, 刘必林, 李建华

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 120-128. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-050

摘要（5301）

HTML （9）

PDF（pc）（5551KB）（3236）

为了研究东南太平洋公海茎柔鱼 Dosidicus gigas 摄食习性和营养生态，根据中国鱿钓船2019年6—12月在东南太平洋秘鲁和厄瓜多尔公海生产时所捕捞的茎柔鱼样本，利用稳定同位素技术对其进行摄食习性和营养生态位分析。结果表明：厄瓜多尔公海茎柔鱼肌肉δ 13 C、δ 15 N显著高于秘鲁公海茎柔鱼( P <0.05)，厄瓜多尔公海茎柔鱼肌肉δ 13 C、δ 15 N范围分别为-19.81‰～-17.38‰、9.36‰～14.43‰，秘鲁公海茎柔鱼肌肉δ 13 C、δ 15 N范围分别为-20.77‰～-17.99‰、7.65‰～13.60‰；利用广义可加模型(GAM)分析茎柔鱼胴长对肌肉δ 13 C、δ 15 N的影响，结果显示，厄瓜多尔公海茎柔鱼胴长对肌肉δ 13 C、δ 15 N无显著性影响( P >0.05)，而秘鲁公海茎柔鱼胴长对肌肉δ 13 C、δ 15 N有显著性影响( P <0.05)，在厄瓜多尔公海，茎柔鱼雌、雄个体δ 13 C随胴长增大均无显著性变化( P >0.05)，雄性个体δ 15 N随胴长增大无显著性变化( P >0.05)，雌性个体δ 15 N随胴长增大有显著性变化( P <0.05)，在秘鲁公海，茎柔鱼雌、雄个体δ 13 C、δ 15 N随胴长增大均无显著性变化( P >0.05)；在厄瓜多尔公海，茎柔鱼δ 13 C、δ 15 N分别在性腺等级Ⅰ～Ⅲ期无显著性差异( P >0.05)，δ 15 N在性腺等级Ⅰ～Ⅲ期存在显著性差异( P <0.05)，在秘鲁公海，茎柔鱼δ 13 C在性腺等级Ⅲ期、δ 15 N在性腺等级Ⅱ期最大( P <0.05)；营养生态位分析显示，厄瓜多尔公海茎柔鱼具有较低的生态位(SEAc=1.46 2 ‰)，其δ 13 C、δ 15 N受同位素基线和摄食作用的共同影响且不同胴长组间差异较小，秘鲁公海茎柔鱼具有较高的生态位(SEAc=2.18 2 ‰)，其δ 13 C、δ 15 N主要受摄食作用影响且不同胴长组间差异较大，此外，两海域茎柔鱼雌性个体都较雄性个体拥有更高的生态位。研究表明，在厄尔尼诺气候条件下，茎柔鱼在秘鲁外海具有较低的营养生态位，并且拥有狭窄的摄食食物来源。

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16. 广东东莞松木山水库浮游植物群落结构特征及其与环境因子的关系

王亚坤, 汪洋, 裴瑞华, 吴鹏举, 黄娜, 李一帆, 袁晨, 刘其根, 胡忠军

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 129-139. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-070

摘要（5685）

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PDF（pc）（851KB）（3201）

为了解松木山水库浮游植物现状及其富营养化程度，于2019年4—12月按季度在该水库设置7个位点，对浮游植物群落结构包括物种组成、现存量和多样性及其时空分布进行了调查研究。结果表明：在松木山水库共鉴定出浮游植物134种(属)，以绿藻门Chlarophyta居多，占总物种数的51.49%；全年有12个优势种，90%的优势种为蓝藻门Cyanophyta物种，假鱼腥藻、隐球藻和拉氏拟柱胞藻的优势度位居前三；浮游植物物种组成在库区间无显著性差异( P >0.05)，但季节间有差异且可划分为2种群落类型，即春夏秋季聚为一类，冬季单独为一类，主要分歧种包括拉氏拟柱胞藻、微小平裂藻、隐杆藻和水华束丝藻等藻类；浮游植物年平均丰度和生物量分别为(15.09±10.75)×10 7 cells/L和(19.65±12.74)mg/L，均以蓝藻为主，分别占85.17%和50.66%；丰度和生物量在季节和库区间均存在显著性差异且存在显著交互作用( P <0.05)，Margalef丰富度指数仅存在显著的空间差异( P <0.05)，Pielou均匀度指数和Shannon多样性指数在季节和空间上均无显著性差异( P >0.05)；浮游植物丰度和生物量与水温呈显著正相关( P <0.05)，前者与总氮呈显著负相关( P <0.05)；水温、pH、氨氮和总氮是影响松木山水库浮游植物时空分布的主要环境因子。研究表明，综合营养状态指数和丰富度指数显示，松木山水库已处于中度富营养或中污染状态。

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17. 内蒙古岗更湖瓦氏雅罗鱼年龄结构及生长特征

段友健, 张雯娟, 骆小年, 王伟, 刘旋, 何宇, 付德彬, 冯俊杰

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 140-147. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-036

摘要（5646）

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PDF（pc）（2801KB）（3118）

为研究岗更湖(岗更诺尔湖)瓦氏雅罗鱼 Leuciscus waleckii 渔业资源利用的可持续性，2017年7月和9月在内蒙古自治区赤峰市岗更湖采集224尾样本，以其耳石为鉴定材料，对瓦氏雅罗鱼的年龄结构和生长特征进行研究。结果表明：渔获物中瓦氏雅罗鱼雌性体长范围为120～264 mm，体质量范围为31.9～367.8 g，雄性体长范围为100～253 mm，体质量范围为16.7～310.9 g；雌性群体年龄组成为1～7 a，雄性群体年龄组成为1～6 a；体长与体质量关系式为 W 雌 =2.333×10 -5 L 2.973 ( R 2 =0.961， n =120)， W 雄 =1.220×10 -5 L 3.084 ( R 2 =0.949， n =104)；Von Bertalanffy生长方程显示，瓦氏雅罗鱼雌性和雄性的渐进体长( L ∞ )分别为497.370、415.926 mm，渐进体质量( W ∞ )分别为2 427.41、1 456.82 g，生长系数( k )分别为0.199、0.270,理论上体长等于零时的年龄( t 0 )分别为-0.216、-0.149 a；通过生长加速度方程估算出雌、雄个体的拐点年龄分别为5.3、4.0 a，对应的体长分别为330.1、281.0 mm。研究表明，岗更湖瓦氏雅罗鱼生长属于快速生长类型，为合理开发及可持续性利用岗更湖该鱼的种群资源，建议捕捞规格在5 a以上。

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18. 基于品质易逝期的模拟中转基地处置对凡纳滨对虾活品和锁鲜品贮藏稳定性的影响

曲秦坤, 刘俊荣, 赵前, 周进, 田元勇, 徐昙烨

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 148-156. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-094

摘要（5512）

HTML （9）

PDF（pc）（4647KB）（3158）

为改变小型分散对虾养殖产区的渔后被动现状，以大连地区池塘养殖凡纳滨对虾 Litopenaeus vannamei 为研究对象(体质量为20～25 g)，模拟构建一个在产区具有集散性质的中转基地，将离水后的品质管理分为两个阶段，塘头至中转基地(品质易逝期)和中转基地进入鲜活品贮运销售阶段(后品质易逝期)，塘头至中转基地设置为4 h无水保湿运输，中转基地处置分复水活品组和冰卒锁鲜组，随后进入贮运环节，活品组保活贮藏60 h，锁鲜组覆冰冷藏132 h，并检测不同阶段对虾肌肉白度、pH、糖原、ATP及其关联物、蛋白溶解度、琥珀酸脱氢酶(SDH)及活体血糖等指标。结果表明：品质易逝期处置对活品的可恢复性试验显示，无水运输后活体肌肉的pH和ATP值略有上升，血糖与糖原含量则略有下降，复水后的血糖、pH、糖原及ATP及其关联物等各项指标分析结果均表明活体活力恢复，随后的活品贮运期间，活体在初期呈现一定的稳定性，36 h后快速下降且出现大批量死亡；品质易逝期锁鲜处置的延迟效应试验显示，无水运输后直接进行冰卒随后冰藏，锁鲜品在销售过程中其糖原、ATP等含量虽有所下降，但前108 h期间下降速度较慢，pH始终维持在7.98以下，呈现了5 d的锁鲜品货架期，锁鲜品各项指标均高于活品，这表明易逝期处置能够有效地实施锁鲜，延缓了鲜品贮藏期间品质的下降速度。研究表明，离水后对虾具有一个品质易逝期，且对后品质易逝期有延迟效应，水产品产区建立中转基地可以有效地实施易逝期品质调控并可主动实施产品设计，进而改变小型分散养殖产业渔后被动现状。

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19. 酶解海洋壳寡糖和褐藻寡糖对鲢鱼糜热稳定性、化学作用力及蛋白质结构的影响

杨天, 郑志红, 张紫薇, 耿文豪, 常珂欣, 汪秋宽, 丛海花, 陈胜军

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 157-165. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-089

摘要（5158）

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PDF（pc）（856KB）（3242）

为研究添加不同质量分数1.0%、0.5%的酶解壳寡糖(chitooligosaccharides，CO)和酶解褐藻寡糖(alginate oligosaccharides，AO)对鲢 Hypophthalmichthys molitrix 鲢鱼糜品质的影响，使用差示扫描量热仪(DSC)和酶标仪对鲢鱼糜冷冻稳定性、冰点、热稳定性和化学作用力进行分析，采用傅立叶变换红外光谱、内源荧光光谱及紫外吸收光谱对肌原纤维蛋白(MP)结构进行了测定。结果表明：鲢鱼糜中添加1.0%和0.5%的CO和AO后，CO组鲢鱼糜比AO组有更好的冷冻稳定性，且0.5%CO组效果为佳；CO组鲢鱼糜的冰点与CO含量呈正相关，而AO组呈负相关，CO组鲢鱼糜的可冻结水含量降低，AO组鲢鱼糜可冻结水含量升高，均与添加的寡糖含量呈正相关；AO和CO组鲢鱼糜热稳定性提高，且经1.0%含量寡糖修饰后的鲢鱼糜样品热稳定性较强；0.5%含量寡糖修饰对鲢鱼糜蛋白质离子键具有保护作用，但寡糖修饰对蛋白质的氢键、疏水相互作用和二硫键含量均无显著影响( P >0.05)；两种寡糖与肌原纤维蛋白之间均为静电相互作用，且改变了MP的二级结构；荧光光谱分析显示，CO更容易使色氨酸(Trp)埋藏于疏水基团中；紫外吸收光谱分析发现，经寡糖修饰后酪氨酸(Tyr)易暴露。研究表明，两种寡糖均改变了鲢鱼糜的性质与肌原纤维蛋白的结构，1.0%组有较好的热稳定性，其中CO能更好地维持鲢鱼糜的冷冻稳定性组。

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20. 裙带菜岩藻聚糖硫酸酯酸解工艺优化及降解产物对巨噬细胞的抗炎活性

李晓旭, 刘舒, 洪滨, 刘文博, 任丹丹, 汪秋宽, 何云海, 洪瑞晨, 付开艳, 宋悦凡

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 166-173. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-227

摘要（4807）

HTML （9）

PDF（pc）（6462KB）（3256）

为了有效降解裙带菜 Undaria pinnatifida Suringar岩藻聚糖硫酸酯，并探究其降解产物的抗炎活性，以复合酶解法提取的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan)为原料，利用酸解法制备裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物，采用薄层色谱法(TLC)检测降解产物聚合度，优化酸解工艺条件，利用膜分离技术获得不同分子量段的降解产物，并检测了各段降解产物对小鼠巨噬细胞的抗炎活性。结果表明：通过薄层色谱检测，确定酸解温度95 ℃、pH 2、水解4 h为酸解裙带菜岩藻聚糖硫酸酯的优化条件；膜分离处理后可得到F1(相对分子质量400～1 000)、F2(1 000～3 500)、F3(3 500～5 000)、F4(5 000～10 000)、F5(10 000以上)5种不同分子量段的岩藻聚糖硫酸酯降解产物，5种降解产物均能减少RAW264.7 细胞NO、1L-1β、1L-6、1L-10和TNF-α的释放量；低分子量段组分(F1、F2)抗炎效果最为显著，其中组分F1抗炎效果最好。研究表明，经优化酸解工艺制备的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物具有一定的抗炎效果，且分子量越低的降解产物抗炎效果越好，裙带菜岩藻聚糖硫酸酯寡糖比多糖具有更好的抗炎活性。

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21. 神经递质5-羟色胺（5-HT）及其受体对鱼类行为和生理影响的研究进展

李海霞, 刘鹰, 张旭, 王婕, 胡雨, 马真

大连海洋大学学报 2022, 37 (1): 174-. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-068

摘要（5296）

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PDF（pc）（1347KB）（3238）

随着养殖智能化水平的提高和鱼类福利关注度的提升，对养殖条件下鱼类生理和行为的研究日益受到重视。5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine，5-HT)是一种广泛存在于大脑和外周组织中的抑制性神经递质，在相应受体的介导下，参与调控鱼类的攻击、摄食、认知、社会等级及情绪调节等多种行为和生理过程。本文综述了近年来国内外有关5-HT及其受体对鱼类的生理活动(摄食、免疫、生殖等)、攻击行为、社会等级、情绪调节、学习认知能力等方面的影响，分析了5-HT及其受体在基础研究和产业中的应用现状，并提出未来应深入开展5-HT的作用机制及其在不同环境下鱼类行为可塑性上的应用，以及5-HT不同受体的基本功能和对鱼类行为与生理响应调控等方面的研究建议，以期为提高基于鱼类行为的规模化智能养殖水平和鱼类福利等研究提供参考。

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22. 硬骨鱼类特有免疫球蛋白IgT的研究进展

张永安

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 183-190. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-180

摘要（5724）

HTML （153）

PDF（pc）（2380KB）（3248）

免疫球蛋白是脊椎动物在适应性免疫中发挥关键作用的效应分子，其基本单元是由两条重链和两条轻链组成。依据重链恒定区序列的不同，免疫球蛋白被划分为不同的类型。目前,在硬骨鱼类中发现了IgM、IgD和IgT 3种免疫球蛋白，其中IgT是硬骨鱼类特有的免疫球蛋白类型。自2005年首次被发现以来，有关IgT的起源、演化、结构和功能的研究取得了一定进展，现已有多种硬骨鱼类的IgT被鉴定，并且部分硬骨鱼类的IgT具有多个亚类且功能存在分化，说明鱼类IgT远比现有认知复杂得多。本文系统地综述了硬骨鱼类免疫球蛋白IgT的亚类组成、基因结构、免疫功能及起源演化等研究进展，并针对硬骨鱼类IgT研究中存在的问题，提出应进一步加强硬骨鱼类IgT与IgT + B细胞的功能、IgT重链基因产生机制及IgT的Fc受体鉴定等未来重点研究方向，以期为深入阐明IgT的免疫功能及鱼类抗感染免疫应答机制提供参考。

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23. 红望天眼金鱼皮肤变色机制的转录组学分析

李荣妮, 王赛赛, 田仲, 孙砚胜, 张博, 张欣

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 191-201. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-126

摘要（5283）

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PDF（pc）（18050KB）（3144）

为了探索红望天眼金鱼 Carassius auratus 的变色机制，采用RNA-Seq高通量测序技术，对红望天眼金鱼(145日龄，体长6 cm)由灰色、过渡色到橙红色3个变色阶段进行了转录组学分析。结果表明：共得到过滤后碱基量57.8 Gb，构建了新转录本并预测新基因1 629个，在两两组比较的差异表达基因群中分析出3个变色组共有差异表达基因25个；差异表达基因的GO功能富集和KEGG 通路富集分析显示，差异基因主要富集到免疫反应、细胞增殖与凋亡和黑色素等相关通路；根据转录组比较分析结果和实际生产经验观察积累，初步推测红望天眼金鱼变色的生理机制是红望天眼金鱼变色初期黑色素细胞大量增殖，期间发生免疫炎症反应，随后黑色素细胞开始逐渐凋亡，同时其他色素细胞则逐渐增殖分化，直至完全取代黑色素细胞，完成变色过程。本研究初步分析出了红望天眼金鱼的皮肤变色机制，研究结果可为进一步开展调控金鱼变色的功能基因试验和金鱼变色的分子机理研究提供科学参考。

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24. 马氏珠母贝Nrf 2基因的克隆及其在不同免疫刺激和营养条件下的表达变化

蔡彩霞, 廖永山, 杨创业, 郑哲, 邓岳文, 王庆恒

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 202-211. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-110

摘要（5457）

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PDF（pc）（15655KB）（3129）

为探究核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)基因在马氏珠母贝 Pinctada fucata martensii 中的作用，克隆获得了马氏珠母贝 Nrf 2基因的完整CDS区，分析了其序列特征，并运用实时荧光定量PCR分析 Nrf 2在不同组织、不同免疫刺激和营养条件下的表达模式。结果表明：马氏珠母贝 Nrf 2基因开放阅读框为2 652 bp，编码883个氨基酸，预测该蛋白的相对分子质量为100 150，Nrf2蛋白靠近C端处具有一个BRLZ结构域；系统进化分析显示，马氏珠母贝Nrf2氨基酸序列与长牡蛎 Crassostrea gigas 等双壳贝类聚为一支，亲缘关系较近；荧光定量PCR分析显示， Nrf 2基因在马氏珠母贝肠道、足、外套膜、闭壳肌、鳃、肝胰腺、性腺组织中均有表达，其中，肝胰腺、肠道和鳃中的表达量显著高于其他组织( P <0.05)；贝体受到LPS、PGN、Poly I:C刺激后， Nrf 2在48 h时显著上调( P <0.05)，且表达量最高，分别为0 h PBS对照组的3.8、2.8、3.1倍；以螺旋藻粉、酵母粉和豆粕为主要蛋白源的饲料组中 Nrf 2基因表达量显著高于小球藻粉和玉米粉组( P <0.05)。研究表明， Nrf 2可能参与马氏珠母贝免疫应答过程，这为分析 Nrf 2的生物学功能及其在机体免疫调节中的作用提供了数据资料。

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25. 刺参3个盐度相关microRNA及预测靶基因的表达模式分析

王研, 高思祺, 匡倩瑶, 刘怡宁, 田燚?

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 212-220. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-134

摘要（5841）

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PDF（pc）（3246KB）（3112）

为研究低盐胁迫对刺参 Apostichopus japonicus (16.38 g±1.27 g)体内离子浓度及钠钾ATP酶活力的影响，以及低盐胁迫与miRNA间的调控关系，试验取低盐度(18)胁迫0(对照)、6、24、48 h时的刺参体腔液，测定其钠、氯、钾离子浓度及钠钾ATP酶活力。结果表明：低盐胁迫后，刺参体腔液中钠离子浓度在6 h 时显著升高( P <0.05)，随胁迫时间的延长钠离子浓度有所降低，氯离子和钾离子浓度均显著低于对照组( P <0.05)且均在6 h时浓度最低，钠钾ATP酶活力在6 h 时低于对照组，在24 h 时出现最低值；microRNAs(miRNAs)前体序列和成熟序列分析显示，miR-2011、miR-124和 miR-2010均能形成稳定的茎环结构，序列相对保守；通过miRNAs与靶基因间的序列分析，获得3个差异表达的miRNAs(miR-2011、miR-2010和miR-124)及互作的靶基因；miR-2011、miR-2010和miR-124的miRNA表达量在盐度胁迫后均呈现上调，miR-2011和miR-2010的表达量在低盐胁迫48 h时达到最大，分别为对照组(0 h)的80倍和24倍；序列预测分析获得miR-2011的靶基因为 PPM 1 L 和 PBK ，miR-2010的靶基因为 PPM 1 L ，miR-124的靶基因为 EGF 3、 IMPA 1。研究表明,刺参miR-124、miR-2011和miR-2010 3个盐度相关的miRNAs序列相对保守，且在盐度胁迫后均能够被诱导表达，从而参与刺参盐度胁迫的响应过程。

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26. 哈维氏弧菌感染对红鳍东方鲀IL-6基因DNA甲基化的影响

王晨诗, 黄馨笛, 崔晓玉, 倪萍, 叶仕根, 王华, 高东旭, 雷威

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 221-226. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-115

摘要（5820）

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PDF（pc）（3591KB）（3173）

为探讨哈维氏弧菌 Vibrio harveyi 感染对红鳍东方鲀 Takifugu rubripes 白细胞介素6(interleukin-6，IL-6)基因DNA甲基化的影响，试验选用体质量为(100.5±10.8)g的红鳍东方鲀，设对照组和感染组(哈维氏弧菌浓度为10 7 cfu/mL)，鱼体在菌液中浸泡12 h后转移到无致病性病原的干净海水中继续饲养7 d，然后进行样品采集，检测红鳍东方鲀脾脏的病理变化、 IL -6基因的相对表达量及其启动子区域DNA甲基化变化。结果表明：发病组红鳍东方鲀脾脏有大量坏死灶，未发病组无明显坏死灶；发病组脾脏 IL -6 mRNA相对表达量显著高于对照组和未发病组( P <0.05)，未发病组和对照组间无显著性差异( P >0.05)；未发病组 IL -6基因启动子区域DNA甲基化水平明显高于发病组( P <0.05)。研究表明，哈维氏弧菌感染后，红鳍东方鲀表现出不同的抗病能力，且抗病能力不同的红鳍东方鲀在 IL -6基因启动子区域DNA甲基化水平存在明显差异。

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27. 耐盐高效好氧反硝化菌Halomonas sp HRL-11的分离鉴定及反硝化性能

马洪婧, 刘鹰, 慕欣廷, 苏鑫, 宋婧, 吴英海, 韩蕊

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 227-234. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-015

摘要（5132）

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PDF（pc）（2131KB）（3269）

为获得高效好氧反硝化细菌，并查明其好氧反硝化性能，从海水循环水养殖系统(RAS)曝气生物滤池生物滤片上分离得到一株高效耐盐好氧反硝化菌，并进行了溶解氧、碳氮比(C/N)和温度对该菌好氧反硝化性能的影响及氮转化途径研究。结果表明：分离得到的好氧反硝化菌经鉴定为盐单胞菌属，记为 Halomonas sp.HRL-11；在高盐度(31)条件下，菌株HRL-11进行硝酸盐氮

还原的优化条件为振荡摇速150 r/min(初始DO质量浓度7.48 mg/L)、C/N 10、温度30 ℃，在此条件下，菌株HRL-11以100 mg/L

为唯一氮源,反应48 h后，其 OD 600 nm 值为1.4，对

和TN的去除率分别为91.5%、69.4%和65.6%; 氮平衡分析显示，有19.44%的

转化为胞内氮，25.87%的

转化为其他硝化产物

和有机氮)，46.19%的

可能转化为气态产物。研究表明，菌株 Halomonas sp.HRL-11具有较好的耐盐和好氧反硝化性能，在工业化海水循环水养殖系统等高盐度废水处理上具有较大的应用潜力。

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28. 盐地碱蓬叶片可培养细菌的分离及促生菌筛选鉴定

石佳, 徐爽, 王博, 谢晓晨, 李晨, 方蕾

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 235-243. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-232

摘要（4557）

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为了筛选盐地碱蓬 Suaeda salsa 促生菌，从辽河口湿地野生盐地碱蓬植物叶片分离出6株可培养细菌并对其进行分子鉴定，通过体外平板试验检测其溶磷、解钾、固氮、产铁载体和产ACC脱氨酶能力，通过水培盐地碱蓬定植接种试验检测其促进植物生长的能力。结果表明：通过2216E琼脂平板划线，从野生盐地碱蓬叶片分离得到6株可培养细菌，其中4株细菌具备产铁载体能力(编号分别为JY21、JY24、BJY223和BJY323)，2株细菌具备产ACC脱氨酶能力(编号分别为JY32和BJY323)；水培盐地碱蓬定植接种试验显示，BJY223细菌能极显著促进植物根长伸长和株高增长( P <0.01)；将BJY223细菌的16S rRNA基因全长序列在NCBI基因库中进行BLASTn比对，查找同源序列构建系统进化树，结合形态学观察结果，鉴定其为假交替单胞菌属 Pseudoalteromonas 细菌。研究表明，从野生盐地碱蓬叶片内分离出一株具备产铁载体能力的假交替单胞菌属细菌BJY223，能显著促进水培盐地碱蓬幼苗的根部伸长和植株生长，可望用于盐地碱蓬植被的修复。

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29. 海水酸化和铁离子对中肋骨条藻光化学活性的影响

张达娟, 毕相东, 张树林, 戴伟, 王雪莹

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 244-250. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-042

摘要（4668）

HTML （74）

PDF（pc）（1218KB）（3493）

为探讨海水酸化和铁离子对中肋骨条藻 Skeletonema costatum 光化学活性的影响，在模拟海水酸化(CO 2 含量0.08%)基础上通过向培养基中添加不同质量浓度的Fe(Ⅲ)(1.5、2.0、3.0、4.0 μg/L)来培养中肋骨条藻，并测定其光合系统Ⅱ(PSⅡ)的叶绿素荧光参数。结果表明：当CO 2 含量为0.038%、Fe(Ⅲ)质量浓度为1.5、2.0 μg/L时，或者CO 2 含量为0.08%、Fe(Ⅲ)质量浓度为3.0、4.0 μg/L时，均可显著促进中肋骨条藻细胞生长( P <0.05)，且这两种情况下的细胞密度持平；CO 2 含量、Fe(Ⅲ)浓度及二者的交互作用对中肋骨条藻PSⅡ的 F v / F m 、ΦPSⅡ、Yield和rETR等叶绿素荧光参数均产生显著影响( P <0.05)；当Fe(Ⅲ)质量浓度为1.5、2.0 μg/L时，0.08% CO 2 含量组中藻细胞叶绿素荧光参数均显著低于0.038% CO 2 组( P <0.05),Fe(Ⅲ)质量浓度分别为3.0、4.0 μg/L时，这两个CO 2 组间的藻细胞叶绿素荧光参数总体上无显著性差异( P >0.05)。研究表明，海水酸化对中肋骨条藻生长的促进作用不明显，当CO 2 含量升高至0.08%时，该藻需要较高Fe(Ⅲ)浓度才能保持与当前CO 2 (0.038%)下相当的生长水平。

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30. 纳木错裸鲤染色体组的构成及倍性分析

山谷, 郭文轩, 李信, 周子昱, 马可馨, 肖世俊, 周贺, 刘海平

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 251-257. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-228

摘要（5521）

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PDF（pc）（5085KB）（3247）

为探究西藏纳木错湖唯一经济鱼类纳木错裸鲤 Gymnocypris namensis 的染色体组构成，用3尾纳木错裸鲤(体质量为276.1～682.5 g)的肾脏进行染色体标本制备，采用吉姆萨(Giemsa)、Ag-NORs和CMA 3 /DAPI双重荧光染色等方法对其染色体数目、核型、带型和倍性进行分析。结果表明：纳木错裸鲤染色体数目为4n=92，核型公式为40m+20sm+32t，NF=152，且不同个体染色体数目相同；纳木错裸鲤肾细胞染色体间期核中，呈现出银染点数为4个，有丝分裂中期分裂相银染点数为4个，均位于亚中部着丝粒染色体短臂的端部区域(SM2)；纳木错裸鲤染色体中期分裂相中CMA 3 阳性位点为4个，均位于SM2区域。研究表明，纳木错裸鲤不同个体间染色体数目及核型一致，是含有4套染色体组的遗传四倍体，本研究结果为纳木错裸鲤染色体组成研究提供了重要的遗传学证据。

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31. “莱州红”菲律宾蛤仔家系建立及生长性状遗传参数估计

梁腾, 李金龙, 马斌, 车宗豪, 王海生, 罗星红, 金燕, 赵侠, 丁鉴锋, 霍忠明, 滕军, 毛东亮, 翟介明, 闫喜武

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 258-267. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-235

摘要（5630）

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PDF（pc）（3596KB）（3241）

为选育菲律宾蛤仔 Ruditapes philippinarum (简称蛤仔)“莱州红”新品系，以“莱州红”野生个体为材料，采用巢式设计，以1个父本与3个母本交配，建立11个父系半同胞和33个母系全同胞家系，并对“莱州红”蛤仔生长性状进行家系聚类分析和遗传参数估计。结果表明：浮游期各家系平均壳长、壳高绝对生长量分别为(6.32±0.67)、(6.69±0.80)μm/d，E 1 、I 2 家系生长优势明显；稚贝期各家系平均壳长、壳高绝对生长量分别为(61.77±38.42)、(61.03±31.07)μm/d，G 3 、F 1 、F 2 、B 2 、B 1 家系具有明显的生长优势；室内幼贝培养期，各家系平均壳长、壳高绝对生长量分别为(123.93±48.05)、(86.17±36.71)μm/d，G 3 家系生长优势明显；室外中间培育期，各家系平均壳长、壳高绝对生长量分别为(54.27±38.61)、(38.69±18.49)μm/d，I 3 、G 3 、K 3 、J 1 、H 2 家系生长优势明显；“莱州红”蛤仔100日龄时壳长、壳高遗传力分别为(0.35±0.09)、(0.34±0.10)，遗传相关和表型相关分别为(0.983 3±0.009 5)、(0.990 4±0.012 2)；“莱州红”蛤仔200日龄时壳长、壳高遗传力分别为(0.19±0.10)、(0.18±0.11)，遗传相关和表型相关分别为(0.930 2±0.005 4)、(0.924 9±0.008 1)。研究表明，“莱州红”蛤仔生长性状属中低度遗传力，具有较大选育潜力，G 3 家系生长速度较快，可作为选育核心家系。

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32. 虾青素对褶皱臂尾轮虫种群增长的影响及其富集效果

刘辉, 孙娜, 姜玉声, 许祥, 王澳林, 张乃达, 张冰倩

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 268-275. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-302

摘要（5538）

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PDF（pc）（2089KB）（3248）

为了探究虾青素对褶皱臂尾轮虫 Brachionus plicatilis 种群增长的影响及其富集效果，在水温为23～25 ℃、海水盐度为18的条件下，以仅投喂微拟球藻 Nannochlorsis sp.为对照组，并在此基础上以分别添加0.05、0.10、0.15 mg/L虾青素作为处理组培养轮虫，初始接种密度为10 ind./mL，连续培养7 d，同时进行12 h虾青素富集培养试验。结果表明：0.15 mg/L虾青素添加组，轮虫最高密度、日均增长量、日均增长率和最终增长倍数均最高，分别为134 ind./mL、17.1 ind./(mL·d)、36.6%/d和13.0倍，显著高于0.05 mg/L虾青素组和对照组( P <0.05);0.10、0.15 mg/L虾青素添加组培养至4 h时，轮虫体内的虾青素含量均达到最大值(分别为17.02、19.46 μg/mg)，其富集效率也较高(分别为3.99、4.60 μg/(g·h))，两组的这些指标均显著高于其他组( P <0.05)，随着培养时间的延长，3个处理组轮虫富集虾青素的效率逐渐降低，并趋于平稳；0.15 mg/L虾青素组培养水体中氨氮质量浓度最高(2.40 mg/L)且显著高于0.05 mg/L虾青素组和对照组( P <0.05)；各组轮虫培养水体中亚硝酸盐、pH变化比较平稳且无显著性差异( P >0.05)；各组水体溶解氧含量与轮虫密度呈负相关，0.15 mg/L虾青素组溶解氧含量显著低于其他组( P <0.05)。研究表明，本试验条件下，在微拟球藻藻液中添加虾青素投喂褶皱臂尾轮虫，有利于轮虫种群增长且可有效富集虾青素；从富集效率和成本等方面综合考虑，以0.10 mg/L的虾青素添加量对轮虫进行强化培养4 h,投喂水产苗种较为合适。

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33. 载铁活性炭对水中低浓度磷酸盐的吸附去除效果

王诗慧, 刘鹰, 李双, 刘恒明, 谷晶, 杨国军, 王钧儒, 王华

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 276-284. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-268

摘要（4806）

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PDF（pc）（3612KB）（3342）

为实现水产养殖尾水中低浓度磷酸盐的吸附去除，采用化学法制备了椰壳活性炭负载纳米羟基氧化铁(FeOOH@AC)和纳米三氧化二铁(Fe 2 O 3 @AC)吸附剂，研究了吸附剂投加量、初始磷浓度和水中共存离子对吸附除磷效果的影响，分析了载铁活性炭对磷的吸附机理及FeOOH@AC对养殖尾水中磷的去除能力。结果表明：FeOOH@AC的最适投加量为20 g/L，对初始磷浓度为0.50 mg/L磷酸盐的最大吸附量为0.030 1 mg/g，其吸附效果优于Fe 2 O 3 @AC，水中

均会不同程度地影响FeOOH@AC对磷酸盐的吸附；FeOOH@AC对磷酸盐的吸附过程符合Langmuir等温线，可用准二级动力学方程拟合，这表明磷酸盐在FeOOH@AC上的吸附是由化学吸附主导的单分子层吸附。研究表明，FeOOH@AC可高效去除尾水中的磷酸盐，且重复使用性良好，具有高效吸附去除水产养殖尾水磷酸盐的应用潜力。

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34. 褐藻聚糖硫酸酯降解酶菌Sinomicrobium sp Fuc19的产酶优化及其降解产物化学组成

国晶晶, 刘诗萌, 韩梓琪, 宋悦凡, 刘舒, 周慧, 汪秋宽

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 285-294. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-317

摘要（4845）

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PDF（pc）（1788KB）（3306）

为获取低分子量褐藻聚糖硫酸酯低聚糖，以笼目海带 Kjellmanniella crassifolia 褐藻聚糖硫酸酯为唯一碳源，筛选一株产褐藻聚糖硫酸酯降解酶的菌株，优化菌株的繁殖和产酶条件并对粗酶酶学性质进行分析，通过Sephacryl S-100分离纯化酶降解产物并对其进行单糖组成分析。结果表明：从大连旅顺沿海海水和泥沙中分离出一株产降解酶菌Fuc19,通过16S rRNA鉴定，该菌株为黄杆菌科 Sinomicrobium 属，命名为 Sinomicrobium sp.Fuc19；该菌株最佳培养基成分为褐藻聚糖硫酸酯2 g/L、酵母粉12 g/L、NaCl 20 g/L和初始pH 6，最佳发酵培养条件为温度25 ℃、装液量100 mL和接种量1%，在此优化条件下该菌的产酶活力为143.60 U/mL，较优化前增加50.8%，生物量OD 600 nm 为1.666；酶学性质分析显示，降解酶的最适酶解温度为35 ℃、pH为8，当Li + 、K + 、Ba 2+ 浓度为10、5 mmol/L时，对该菌株产酶能力有促进作用，不同浓度的EDTA、Al 3+ 、Fe 3+ 对酶活力均有抑制作用；单糖组成分析显示，降解低聚糖组分以岩藻糖和半乳糖为主。研究表明， Sinomicrobium sp.产褐藻聚糖硫酸酯降解酶高效且安全，应用潜力较大。

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35. 铜藻褐藻聚糖硫酸酯的分离纯化、结构组成及保肝护肝作用

卓丹琪, 张雪楠, 李雨晴, 刘诗萌, 任丹丹, 何云海, 汪秋宽

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 295-303. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-304

摘要（5228）

HTML （73）

PDF（pc）（6731KB）（3300）

为研究铜藻褐藻聚糖硫酸酯的结构组成及保肝护肝作用，以铜藻 Sargassum horneri 褐藻聚糖硫酸酯(fucoidan)粗品为原料，经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分离纯化，采用高效液相色谱及红外光谱对粗多糖(TF)及其纯化组分的单糖组成和结构特征进行分析，并建立CCl 4 诱导的肝脏损伤动物模型，进行各组分的保肝作用试验。结果表明：从铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品分离纯化得到TF1、TF2、TF3、TF4 4个组分，其硫酸基团含量分别为9.62%、11.51%、14.51%和13.62%；单糖组成分析显示，粗多糖主要由岩藻糖(Fuc)、葡萄糖(Glu)、甘露糖(Man)和半乳糖(Gal)组成，各纯化组分的单糖组成含量差异较大；红外光谱分析显示，TF及其纯化组分在1 250 cm -1 附近出现强吸收峰，为S=O(硫酸基)的吸收峰，证明TF及其纯化组分均含有硫酸基团，且TF、TF3、TF4的硫酸基主要连接于岩藻糖的C-2或C-3位置，TF1、TF2主要连接于岩藻糖的C-4位置；动物试验显示，灌胃不同剂量TF及其纯化组分，均能显著提高肝损伤小鼠肝脏或血清中SOD、GSH-Px和TNF-α的活性( P <0.05)，显著降低MDA、ALT和AST指标的水平( P <0.05)，肝组织切片显示，肝细胞病变程度较模型组明显减轻。研究表明，铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品经分离纯化得到4个组分，总体上具有显著的抗氧化和保肝护肝作用。

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36. 基于自注意力机制和CNN-LSTM深度学习的对虾投饵量预测模型

何津民, 张丽珍

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 304-311. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-122

摘要（5375）

HTML （176）

PDF（pc）（4059KB）（3343）

为提高对虾饲料的利用率，减少养殖成本，提高养殖效益，提出了一种基于自注意力机制(self-attention，ATTN)和卷积神经网络(convolutional neural network，CNN)-长短期记忆网络(long short term memory，LSTM)的对虾投饵量预测模型(CNN-LSTM-ATTN)，以水温、溶解氧、对虾的数量与质量作为预测模型的输入数据，通过CNN挖掘输入数据间的内在联系，提取出数据特征信息，利用LSTM的长期记忆能力保存数据特征信息，使用ATTN突出不同时间节点数据特征的重要性，进一步提升模型的性能。结果表明，本研究中提出的CNN-LSTM-ATTN预测模型的均方根误差、平均绝对误差和平均绝对百分误差分别为0.816、0.681和0.018，均小于BP(back propagation)神经网络、LSTM和CNN-LSTM 3个基准模型，其模型预测能力和稳定性优于其他模型。研究表明，本研究中构建的模型能较好地实现对虾投饵量的准确预测，可为对虾养殖投饵量的管理调控提供参考依据。

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37. 融合SKNet与YOLOv5深度学习的养殖鱼群检测

赵梦, 于红, 李海清, 胥婧雯, 程思奇, 谷立帅, 张鹏, 韦思学, 郑国伟

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 312-319. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-324

摘要（5837）

HTML （1844084383）

PDF（pc）（4163KB）（3389）

为解决真实养殖环境下，水下成像模糊、失真等导致鱼群检测准确率低的问题，提出一种融合视觉注意力机制SKNet(selective kernel networks)与YOLOv5(you only look once)的养殖鱼群检测方法(SK-YOLOv5模型)，该方法首先采用UNet(convolutional networks for biomedical image segmentation)对图像进行预处理，得到清晰的鱼群图像，然后将SKNet融合到YOLOv5的Backbone端构成关注像素级信息的特征提取网络，加强对模糊鱼体的识别能力，并在水下模糊鱼群图像数据集上进行了消融试验和模型对比试验，以验证SK-YOLOv5的有效性。结果表明：在鱼群检测任务上，SK-YOLOv5的识别精确率和召回率分别达到了98.86%和96.64%，检测效果比YOLOv5分别提升了2.14%和2.29%，与目前检测准确率较高的水下目标检测模型XFishHmMp和FERNet相比，SK-YOLOv5取得了较好的检测效果，与XFishHmMp模型相比，识别精确率和召回率分别提升了5.39%和5.66%，与FERNet模型相比，识别精确率和召回率分别提升了3.59%和3.77%，实现了真实养殖环境下鱼群的准确检测。研究表明，融合SKNet与YOLOv5的养殖鱼群检测方法，有效地解决了水下模糊图像鱼群检测准确率低的问题，提升了养殖鱼群检测和识别的整体效果。

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38. 离心式滩涂贝类播苗装置设计与试验

黄伟, 李秀辰, 母刚, 张国琛, 白永安, 张寒冰

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 320-328. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-270

摘要（5240）

HTML （141）

PDF（pc）（7179KB）（3329）

为解决滩涂贝类无专用机械化播苗装备，以及人工播苗效率低和均匀性差等问题，根据贝苗特性及播苗作业规范，以四角蛤蜊 Mactra veneriformis 苗为研究对象，设计离心式滩涂贝类播苗装置，通过对播苗装置及其运动过程进行分析，建立了在离心叶轮盘上运动的动力学模型，应用离散元颗粒仿真软件(EDEM)进行播苗过程的离散元仿真，基于Design-Expert软件进行播苗装置行进速度、叶轮盘叶片个数和叶轮盘转速对贝苗分布变异系数的响应曲面分析，优化播苗参数，并进行滩涂贝类播苗验证试验。结果表明：各因素对贝苗分布变异系数影响的主次顺序为叶片个数>叶轮转速>行进速度；叶片个数与叶轮转速的交互作用极显著影响贝苗分布变异系数( P <0.01)，叶轮转速与行进速度的交互作用对贝苗分布变异系数的影响次之( P <0.05)；经回归分析得到最优组合参数为叶片个数4、叶轮转速500 r/min、行进速度0.77 m/s，在此条件下，贝苗分布变异系数的离散元仿真值为8.53%，滩涂播苗装置的实测值为9.33%，仿真值与实测值的相对误差为8.46%，破碎率为2.17%。研究表明，基于离散元的仿真分析方法可用于离心式滩涂贝类播苗装置设计与参数优化，所设计的离心式播苗装置可为滩涂贝类机械化播苗装备设计提供参考。

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39. 江底隧道地铁运营期水下噪声及其对水生生物的影响

钱金玉, 蔺丹清, 邢彬彬, 龚德华, 郭建磊, 刘英泰, 李子铭, 殷雷明

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 329-337. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-093

摘要（4770）

HTML （33）

PDF（pc）（14112KB）（3445）

为研究江底隧道地铁噪声对保护区内水生生物的影响，以南京长江江豚自然保护区为研究对象，采用水下声音测量系统(AQH听水器，带宽为20～100 000 Hz)通过停船抛锚方式，记录了南京地铁10号线地铁运营期间途经长江江底隧道水域的水下声音，并对声音数据进行频谱分析和声压级计算。结果表明：在水下5 m处，当无列车通过时，水下声音主要为100 Hz的水流噪声和1 000 Hz的风成噪声；当单轨道列车经过时产生的时域平均声压级为(131.48±0.91)dB re 1 μPa，实时增加12.18 dB；当双轨道列车相向经过时产生的时域平均声压级为(136.82±2.63)dB re 1 μPa，实时增加12.20 dB；地铁噪声频率集中在20～5 000 Hz，1/3倍频程分析显示，地铁噪声主频率峰值集中在63、80 Hz。研究表明，地铁途径水域水下1～5 m的地铁噪声频率主要集中在20～5 000 Hz，主峰值分别为63、80 Hz，参考鱼类可听频率范围，地铁噪声完全覆盖了该保护区内鱼类听觉敏感频率段，对淡水鱼类的生存有一定影响。

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40. 基于OpenFOAM的桩基透空堤结构尺度对透射系数的影响

夏曦, 张可新, 桂劲松

大连海洋大学学报 2022, 37 (2): 338-344. DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-121

摘要（4805）

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PDF（pc）（3582KB）（3326）

为探讨透空堤相对堤宽和挡板相对入水深度在工程中的合理取值范围，本文采用某交通码头改扩建工程物理模型试验与开源软件OpenFOAM数值模拟，进行了透空式防波堤相对堤宽和挡板相对入水深度对透射系数的影响研究，并分析了透空堤流场变化机理。结果表明：随着相对堤宽( B/L ， B 为堤宽， L 为波长)增大，透空堤透射系数减小，当相对堤宽比大于0.35 L 后透射系数趋于稳定；随着挡板入水深度(Δ)增加，透射系数减小，当挡板相对入水深度(Δ/ H ， H 为透射波高)大于1.0 H 时，透射系数趋于稳定；透空堤流场图显示，随着相对堤宽的增大，波浪发生紊乱，震荡空间变大使得波浪耗散增加，随着挡板入水深度增大，波浪与结构物作用面积增大使得波浪耗散增加。研究表明，结合港口现行规范，在实际工程中相对堤宽适宜范围应为0.25～0.35 L ，挡板相对入水深度适宜范围应大于1.0 H 。

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