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大连海洋大学学报  2017, Vol. 32 Issue (3): 316-322    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.03.010
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冷休克诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体的条件优化
周贺,张蕊,徐其征,麻天宇,江振华,庄子昕,高俊,姜志强,李雅娟
大连海洋大学 辽宁省省级高校海洋生物资源可持续利用重点实验室, 农业部北方海水增养殖重点实验室, 辽宁 大连
Optim ization of inducing conditions for cold shocked androgenetic haploid in red fin puffer Takifugu rubripes
ZHOU He,ZHANG Rui,XU Qi-zheng,MA Tian-yu,JIANG Zhen-hua, ZHUANG Zi-xin,GAO Jun,JIANG Zhi-qiang,LIYa-juan
Key Laboratory ofMarine Bio-resources Sustainable Utilization in Liaoning Province蒺s University,Key Laboratory ofMariculture&Stock Enhancement in North China蒺s Sea,Ministry of Agriculture,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China
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摘要 为探索无需卵子失活仅用冷休克方法诱导雄核发育单倍体,以红鳍东方鲀Takifugu rubripes为研究对象,试验选用L9(34)设计,进行3因素3水平的正交试验,处理温度设为0、2、4益,处理持续时间设为30、45、60 min,处理起始时间设为2、5、8 min,共9个试验组,并对其后代采用单个胚胎染色体计数法进行染色体数目统计及微卫星分析。结果表明:冷休克诱导得到的单倍体率最高为第7试验组和第9试验组,分别为受精后8 min在4益下处理30 min和受精后5 min在4益下处理60 min,单倍体率分别为86.7%和80.0%;根据正交试验直观分析结果,得出冷休克诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体的3因素最优组合为处理温度4益、处理持续时间60 min、处理起始时间8min;影响冷休克诱导单倍体的3因素主次顺序为处理温度>处理起始时间>处理持续时间;微卫星分析结果表明,单倍体携带的遗传基因全部为父本的遗传基因。研究表明,仅用冷休克方法可以成功诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体,雄核发育单倍体率高达86.7%,为进一步研究诱导红鳍东方鲀雄核发育二倍体奠定了基础。
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周贺
张蕊
徐其征
麻天宇
江振华
庄子昕
高俊
姜志强
李雅娟
关键词:  红鳍东方鲀  冷休克  雄核发育  单倍体  正交试验    
Abstract: In a three factor and three level orthogonal experiment L9(34),fertilized eggs of redfin puffer Takifugu rubripes were exposed to water temperature of 0,2,and 4益(A)for 30,45,and 60 min(B),and initial treat-ment time of2,5,and 8 min(C)in order to explore amethod of inducing androgenetic haploid of redfin puffer by cold shocked without inactivation.Then the chromosome number was counted in one embryo and microsatellite a-nalysis was performed in the offspring.The results showed that themaximal haploid ratewas observed in the embry-os 8min after fertilization treated at4益for30min(86.7%)and 5min after fertilization treated at4益for60min (80.0%).The intuitive analysis revealed that the optimal inducing androgenetic haploid was conducted under con-ditions of 8 min after fertilization at4益for 60 min with initial treatment time of8 min.The order of three factors influencing androgenetic haploid was expressed as treatment temperature>treatment initial time>treatment duration. Themicrosatellite analysis showed that the genes of androgenetic offspringswere all derived from male redfin puffer. The findings indicate that the redfin puffer had androgenetic haploid rate of 86.7%by cold shock treatment,and that lay the foundation for the further study of redfin puffer androgenetic diploid.
Key words:  Meretrixmeretrix    shell trait    live body weight    path analysis
                    发布日期:  2017-06-21      期的出版日期:  2017-06-21
中图分类号:  S965.1  
基金资助: 国家自然科学基金资助项目(41606178);辽宁省博士科研启动基金资助项目(201501185);辽宁省教育厅重点实验室基础研究项目(LZ2015010)
引用本文:    
周贺, 张蕊, 徐其征, 麻天宇, 江振华, 庄子昕, 高俊, 姜志强, 李雅娟. 冷休克诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体的条件优化[J]. 大连海洋大学学报, 2017, 32(3): 316-322.
ZHOU He, ZHANG Rui, XU Qi-zheng, MA Tian-yu, JIANG Zhen-hua, ZHUANG Zi-xin, GAO Jun, JIANG Zhi-qiang, LIYa-juan. Optim ization of inducing conditions for cold shocked androgenetic haploid in red fin puffer Takifugu rubripes. Journal of Dalian Ocean University, 2017, 32(3): 316-322.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.03.010  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2017/V32/I3/316
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