2009年, 第24卷, 第5期　
刊出日期：2009-10-21

  

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  用链球菌疫苗免疫罗非鱼前后其差异表达基因的鉴定与分析

  李超, 陈明, 李莉萍, 黄维义, 余晓丽, 黄婷, 张彬, 雷爱莹, 陈福艳, 梁万文

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 379-386. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.001

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  采用抑制性差减杂交技术（SSH）成功构建了罗非鱼O reochrom is nilotica被链球菌Streptococcus iniae疫苗免疫前后正、反两个淋巴细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的淋巴细胞基因,并对文库进行了斑点杂交筛选、测序和ESTs初步分析。结果表明：文库富集了高丰度的差异表达基因,阳性率较高。正向文库中筛选得到21个免疫期间表达丰度上调的基因,其中1个基因与罗非鱼已知基因具有相似性,10个基因与其他鱼类已知基因相似,1个基因与其他物种已知基因具有相似性,9个为未知新基因;负向文库中筛选得到24个免疫期间表达丰度下调的基因,其中3个与罗非鱼已知基因具有相似性,15个与其他鱼类已知基因相似,6个为未知新基因。进一步功能注解发现,正向文库功能基因包括免疫信号传导相关蛋白、防御相关蛋白、肿瘤免疫相关蛋白和淋巴细胞相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度升高,提高了机体免疫抵抗力。负向文库功能基因包括细胞免疫相关蛋白、感染相关蛋白和肿瘤发生相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度降低,可以降低机体感染和发病几率。
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  盐度骤降对幼仿刺参生长、免疫指标及呼吸树组织结构的影响

  王吉桥, 张筱墀, 姜玉声, 张剑诚, 柳圭泽

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 387-392. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.002

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  在水温为10.0-13.0℃下,将暂养在盐度为33水中的仿刺参Apostichopus japonicus幼参（2.42 g和3.5 g）直接放入盐度为33、30、26、22的塑料水槽（50 cm×40 cm×30 cm）中,过量投喂,正常饲养,研究了盐度骤降对幼参存活、生长、某些免疫指标及呼吸树组织学的影响。结果表明：在60 d饲养过程中,各组幼参的排脏率为2.23%-11.11%,盐度为33时,幼参的排脏率显著低于盐度为30时（P〈0.05）,而与盐度为26和22时差异均不显著（P〉0.05）;但生长却随着盐度的降低而降低,盐度为30和26时,幼参的生长速度分别比盐度为33时减少了5.0%和62.5%,表明盐度为26时是明显抑制幼参生长的拐点;随着盐度的降低,各试验组幼参体腔液上清液中溶菌酶活力升高,超氧化物歧化酶活力降低,但均未检测出酸性磷酸酶的活性。盐度为29时,幼参体腔上皮细胞逐渐消失,内皮层中出现大量空泡,血腔不明显,中央腔变小;盐度为24、18时,幼参体腔上皮细胞增多,血腔增厚,内皮层细胞向中央腔延伸。
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  盾叶薯蓣提取物对鱼类指环虫的杀灭效果

  王高学, 李军, 赵良炜, 周状, 申烨华, 田渭花

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 393-399. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.003

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  以寄生在金鱼Carassius auratus鳃部的中型指环虫Dactylogyrus intermedius为指示寄生虫,采用活体感染、活体杀虫的方法,研究了用不同溶剂（石油醚（沸程60-90℃）、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水）分别对盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis进行提取,其5种提取物的杀虫活性。结果表明,盾叶薯蓣的杀虫活性部位是乙醇提取物。将乙醇提取物与甲苯咪唑、伊维菌素、阿维菌素和吡喹酮4种原料药的杀虫效果进行比较,结果表明：盾叶薯蓣乙醇提取物的最高杀虫浓度为17.0 mg/L,平均最高杀虫率为99.37%;其次是甲苯咪唑和吡喹酮,最高杀虫浓度分别为3.4、6.2 mg/L时,平均最高杀虫率分别为99.01%和95.39%;而伊维菌素、阿维菌素对中型指环虫无明显的杀灭作用。盾叶薯蓣乙醇提取物对斑马鱼Brachydanio rerio的24、48、96 h的半致死浓度（LC50）分别为53.47、34.05、19.34 mg/L。
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  生长因子和激素对大菱鲆细胞生长的影响

  姜泽东, 李霞, 秦艳杰, 葛姗姗

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 400-405. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.004

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  研究了不同浓度生长因子、激素和条件培养基对大菱鲆Scophthatmus maximus鳍、鳃和肾组织原代培养细胞生长和增殖的影响。结果表明：当氢化可的松（HC）浓度为0.4μg/mL时,鳍、鳃组织贴壁率和迁出率最高,分别为89.4%、53.3%和92.3%、59.6%,浓度为0.8μg/mL时,肾细胞的增殖量最大;当表皮生长因子（EGF）浓度为10 ng/mL时,鳍、鳃组织块的贴壁率和迁出率均达到最高,分别为85.9%、54.6%和88.1%、56.8%,肾细胞的增殖量最大;当胰岛素（Ins）浓度为5μg/mL时,鳍、鳃组织块的贴壁率和迁出率均达到最高,分别为90.8%、52.3%和92.3%、54.2%,肾细胞的增殖量也达到最大值;当sp2/0条件培养基的添加比例为1/5时,鳍和鳃组织块的贴壁率均达到最高（96.8%和92.8%）,鳃的迁出率最高,为59.3%,肾细胞的增殖量最大;sp2/0条件培养基比例为1/4时,鳍的迁出率最高（52.3%）。
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  用响应面法分析栅栏因子对组织化鱼蛋白模拟食品贮藏稳定性的影响

  李艳芹, 刘俊荣, 李震, 赵前程, 俞微微, 谢智芬

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 406-411. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.005

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  分别以食盐、蔗糖和柠檬酸的添加量作为渗透压、水分活度以及pH等主要栅栏因子的调节参数,采用响应面分析法设计探索各个栅栏因子对模拟食品贮藏稳定性的影响,以细菌、大肠杆菌以及霉菌和酵母为贮藏稳定性指标,分别对短期保温以及长期常温条件下的各项指标进行跟踪监测,并建立栅栏因子对产品中微生物生长影响的数学模型。结果表明：添加食盐和柠檬酸后导致物料体系中渗透压增加,pH下降,因而有效抑制了产品中霉菌、酵母和细菌的生长;添加蔗糖对产品的稳定性也有一定影响,当蔗糖添加量较少时,蔗糖提供了细菌生长所需的营养,因而会促进细菌的生长,而当蔗糖添加量较大时,增大了产品中的渗透压,起到了阻碍细菌生长的作用。此外,无论蔗糖添加量多少均会促进霉菌和酵母的生长。
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  不同饲料对海月水母生长性能的影响

  王文龙, 冷向军, 刘晃

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 412-416. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.006

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  研究了5种饲料对海月水母Aurelia aurita（伞体直径为2.50 cm±0.10 cm）生长性能的影响。实验共分5组,每组设3个平行,分别投喂卤虫无节幼体、冰冻卤虫、冷冻干燥卤虫、国产微粒饲料和国外微粒饲料,依照投喂饲料的不同,各组分别记为G鲜活、G冰冻、G干燥、G国产、G国外组,实验共进行30 d。结果表明：饲养30 d后,5组海月水母伞体的平均直径依次为（5.01±0.10）、（4.78±0.20）、（4.62±0.11）、（4.23±0.05）、（4.42±0.06）cm,卤虫无节幼体组生长性能最好,水母伞体直径显著高于其他各组（P〈0.05）,冰冻卤虫和冷冻干燥卤虫组次之,国产微粒饲料组生长性能最差;国产微粒饲料组的成活率为95%,其余各组成活率均为100%;卤虫无节幼体组的收缩频率平均为1次/s,显著高于其他4组（P〈0.05）,其余4组之间差异均不显著（P〉0.05）,收缩频率平均为0.5-0.66次/s;冰冻卤虫组的三态氮含量均显著高于其他各组（P〈0.05）,国内微粒饲料组的三态氮含量次之,也显著高于其他3组（P〈0.05）。本实验结果表明,卤虫无节幼体是海月水母较理想的饵料,冰冻卤虫和冷冻干燥卤虫次之。国产微粒饲料因为在营养组成、水中稳定性和悬浮性方面较差，饲养海月水母的效果也较差。
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  复合酶制剂对草鱼生长性能、饲料养分消化率及免疫力的影响

  王纪亭, 万文菊, 康明江, 崔树峰

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 417-422. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.007

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  选用体重为（31.51±0.43）g的草鱼C tenopharyngodon idella360尾,随机分为4个处理组,每组设3个重复,每个重复放30尾鱼,分别添加不同梯度水平（0、300、600、900 mg/kg）的木聚糖酶、β-葡聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶为主的复合酶制剂。结果表明：与对照组相比,饲料中添加600、900 mg/kg的复合酶制剂后,显著提高了草鱼的相对增重率、特定生长率、饵料转化效率等生长性能指标（P〈0.05）,同时也显著提高了草鱼对饲料中干物质、粗蛋白质、粗脂肪及粗纤维的表观消化率（P〈0.05）,但这二组之间差异不显著（P〈0.05）,而300 mg/kg一组与对照组差异不显著（P〈0.05）;鱼体的粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、水分等品质指标在4个处理组之间差异不显著（P〈0.05）;饲料中添加600、900 mg/kg的复合酶制剂后,显著提高了草鱼血液中白细胞的吞噬活性（P〈0.05）和血清杀菌能力（P〈0.01）。研究表明,饲料中添加复合酶制剂后,能显著提高草鱼对饲料中养分的消化率,从而提高草鱼的生长性能,增强草鱼的免疫力。
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  斑点叉尾鮰鱼皮胶原的提取及其基本特性的研究

  赵露, 刘海英, 袁信华, 过世东

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 423-428. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.008

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  采用乙酸—胃蛋白酶降解的方法从斑点叉尾鮰鱼皮中提取胶原,利用正交试验优化提取工艺,并对最优工艺条件下提取的鱼皮胶原的基本特性进行了研究。结果表明：鱼皮胶原的最优提取工艺条件是,乙酸浓度为0.5 mol/L,鱼皮与乙酸固液用量之比为1∶100（每克冷冻干燥鱼皮加100 mL乙酸）,胃蛋白酶的添加量为1104 U/mL,提取时间为54 h,提取温度为4℃,间歇搅拌。对鱼皮胶原进行氨基酸分析、傅立叶红外扫描和紫外扫描,结果表明：所提取的鱼皮胶原具有Ⅰ型胶原所特有的氨基酸组成,并且胶原的三股螺旋结构保持完整。
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  扇贝捕捞网具的改良设计

  马文昭, 杨伟超, 张维纲, 王刚, 杨君德

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 429-435. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.009

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  对虾夷扇贝捕捞网具进行了改良设计,即以“雪爬犁”架将传统贴地的拖网托离海底表面,以竖直交错排列的非金属惊扰棒取代传统的3道横排粗铁链,以专用的排石口排掉进入网内的石块,以拾贝板分拣、过滤并清洗扇贝。生产实践证明：采用改良设计的新型网具作业,具有降低扇贝破损率、提高采捕率、减轻拖网作业对海底生态环境的破坏程度、减少拖网耗能、捕捞的扇贝清洁无泥沙等优点。
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  数据融合在水产养殖监控系统中的应用

  缪新颖, 邓长辉, 高艳萍

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 436-438. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.010

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  在水产养殖监控系统中,为了提高测量精度往往进行多点测量。本研究中作者给出了监控系统的构成,在多点采集的基础上,首先采用分布图法剔除疏失误差,然后采用自适应加权数据融合算法对采集数据进行融合。测量数据和分析结果表明,处理后的数据精度大大提高。
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  中国盐湖生物的研究现状及展望

  赵文

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 439-443. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.011

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  对中国盐湖生物的研究现状和未来研究发展方向进行了阐述。作者认为：对盐湖生物资源的开发利用前景十分广阔,作为一门新兴的学科——盐湖学必将有所发展,盐湖也能为水产养殖和相关产业提供必要的资源。
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  日本蟳消化酶的初步研究

  许星鸿, 阎斌伦, 徐加涛, 徐国成, 浦寅芳, 袁泉, 陶建军

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 444-448. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.012

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  采用酶学分析方法研究了温度、pH对日本蟳Charybdis japonica中肠腺4种主要消化酶（蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶）活性的影响及4种消化酶在中肠腺、胃、肠中的活性分布。结果表明：蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶的最适温度分别为55、35、65、45℃,最适pH分别为6.2、5.5、4.4、7.5;在最适温度及最适pH试验条件下,中肠腺中的蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶活性均为最高;蛋白酶活性的大小依次为中肠腺〉胃〉肠,纤维素酶和脂肪酶活性的大小依次为中肠腺〉肠〉胃,而淀粉酶活性在中肠腺、胃、肠中差别不大。
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  牡蛎蛋白水解产物中α-葡萄糖苷酶活性抑制组分的分离与纯化

  胡建恩, 马驰宇, 王刚, 曲敏, 谢智芬, 王佳培, 佟长青

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 449-452. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.013

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  采用硫酸铵沉淀法从大连湾牡蛎Ostrea talienwhanensis crosse软体部分中获得水溶性蛋白质,发现胃蛋白酶水解牡蛎蛋白质产物的部分组分具有α-葡萄糖苷酶（AGD）抑制活性,其AGD抑制活性IC50值为40 mg/mL。经过色谱分离纯化,并经MALDI-TOF/MS质谱检测,最终在离子交换HPLC纯化中反映出的单一吸收峰,表现出4个核质比不同的质谱峰,说明是非单一物质,因而没有进行结构分析。根据牡蛎蛋白质水解产物的AGD抑制作用,牡蛎蛋白具有开发为降血糖产品的可能性。
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  官厅水库(北京段)水体富营养化评价与分析

  郭凯, 赵文, 徐锋, 徐立蒲, 殷守仁, 曹欢, 王小亮

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 453-458. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.014

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  利用非生物因子、浮游植物密度、生物量、种类组成及初级生产力等生物学指标对官厅水库（北京段）3个水体的富营养化状况进行了评价与分析。结果表明：该水体已达到富营养化状态,主成分分析显示对水体富营养化影响较大的水化因子首先是氮,其次是磷。文中简要分析了氮、磷来源,并提出了治理措施。
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  两种双酶切组合在细鳞鱼AFLP体系中的比较分析

  王荻, 徐革锋, 刘洋, 卢彤岩, 牟振波

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 459-464. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.015

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  采用Tru9Ⅰ/EcoRⅠ和TaqⅠ/PstⅠ两种限制性内切酶酶切组合对细鳞鱼Brachymystax lenok pallas的遗传多样性进行研究,探索适合其AFLP的双酶切体系。每种双酶切组合体系分别选用20对选择性扩增引物进行扩增。结果表明：采用Tru9Ⅰ/EcoRⅠ组合共扩增出了739个位点,其中多态性位点为336个,每对引物组合扩增的位点为21-45,位点多态性百分比为45.47%,平均Shannon氏指数为0.2739;而采用TaqⅠ/PstⅠ组合共扩增出了759个位点,多态性位点为405个,每对引物组合扩增的位点为29-53,位点多态性百分比为53.36%,平均Shannon氏指数为0.3144。表明,对细鳞鱼进行AFLP分析时,TaqⅠ/PstⅠ的酶切体系呈现出更大的多态性,能提供更多的可供分析研究的数据,更适用于细鳞鱼基因组分析。
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  单胞藻浓缩液制备中超滤膜清洗方法的研究

  周玮, 王国栋, 梁忠德

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 465-469. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.016

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  研究了浓缩单细胞藻后超滤膜的几种清洗方法,探讨了物理法清洗的持续时间,比较了3种清洗剂（5.0 mL/L HCl、5.0 g/L NaOH和5.0 g/L NaClO溶液）的清洗效果,以及水温对5.0 mL/L HCl和5.0 g/LNaClO溶液清洗效果的影响。结果表明：过滤单细胞藻后,污染超滤膜的几种清洗方法的最佳清洗时间分别为,用物理法反冲洗30 min,用5.0 mL/L HCl溶液冲洗10 min,用5.0 g/L NaClO冲洗10 min。水温小于30℃时,采用5.0 g/L NaClO溶液清洗效果较好,膜恢复率为95.1%;大于30℃时,采用5.0 mL/LHCl溶液清洗效果较好,最高恢复率为95.9%。
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  鲇幼鱼耗氧率与氨氮排泄率的初步研究

  杨培民, 刘刚, 张涛, 金广海, 刘义新, 吴瑞兰, 于翔

  大连海洋大学学报. 2009, 24(5): 470-474. https://doi.org/10.3969/j.issn.1000-9957.2009.05.017

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  采用实验生态学方法研究了温度和体重对鲇Silurus asotus幼鱼呼吸、氨氮代谢的影响。结果表明：鲇幼鱼耗氧率具有昼夜节律性,一昼夜在4：00-7：00和17：00-20：00各出现一个耗氧高峰,这两个时间段应是鲇幼鱼的摄食和活动高峰;在18-31℃下,鲇幼鱼的耗氧率随着温度的升高而增加,排氨率在18-26℃的条件下随着温度的升高而增加,高于26℃时随着温度的升高而减小;耗氧率（OR）和排氨率（N）均随着体重（W）的增加而下降,并呈幂函数的关系,相关方程分别为OR=0.8784W-0.9145（R2=0.9731）,N=34.665W-0.8999（R2=0.8616）;随着温度的上升,鲇幼鱼耐低氧能力下降,当温度大于26℃时,窒息点超过0.5 mg/L;随着体重的增加,鲇幼鱼耐低氧的能力上升,体重低于4.06 g时,窒息点没有显著差异（P〉0.05）,当体重达到11.06 g时,窒息点降至（0.319±0.031）mg/L,显著低于其他组（P〈0.05）。