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大连海洋大学学报  2015, Vol. 30 Issue (6): 610-615    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2015.06.007
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刺参C型凝集素(AJL)基因的克隆及原核表达分析
薛壮,李慧,孙鹤,孔德荣,马普,周玮,仇雪梅,刘洋,王秀利
大连海洋大学水产与生命学院
Cloning and prokaryotic expression of a novel recombinant C-type lectin （AJL） gene in sea cucumber Apostichopus japonicus
XUE Zhuang,LI Hui,SUN He,KONG De-rong,MA Pu,ZHOU Wei QIU Xue-mei,LIU Yang,WANG Xiu-li
College of Fisheries and Life Science, Dalian Ocean University, Dalian 116023, China
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摘要 为了开发海参免疫基因,生产重组免疫因子蛋白,利用cDNA末端快速扩增技术（Rapid-amplification of cDNA ends,RACE）获得了刺参凝集素基因（Apostichopus japonicus Lectin,AJL）的编码区序列（Coding sequence,CDS）,CDS的长度为492 bp,编码163个氨基酸,其中成熟肽由143个氨基酸组成。将成熟肽的基因克隆并连接至载体p ET-32a（＋）中,成功构建了原核表达的重组体p ET-32a（＋）-AJL,进一步将重组体转化至大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中,经诱导表达、分离纯化,获得了融合表达蛋白。本研究结果为进一步研究重组刺参C型凝集素在刺参健康养殖上的应用奠定了基础。
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关键词:  刺参  凝集素  基因克隆  原核表达    
Abstract: The coding sequence（CDS） of a new C-type lectin（AJL） was cloned and characterized from the sea cucumber Apostichopus japonicus by rapid amplification of cDNA ends（RACE） to exploit recombinant protein of sea cucumber by expression of immune gene and recombinant immune factors.The CDS contains 492 bp with encoding a polypeptide of 163 amino acids.The mature peptide contains 143 amino acids.The recombinant p ET-32a（＋）-AJL was constructed by linking the mature peptide gene sequences and p ET-32a（＋） vector.After transforming the recombinant into Escherichia coli BL21（DE3）,the fusion protein was obtained by induction,separation and purification.The findings provide the good foundation for further research and application of the recombinant lectin in sea cucumber culture.
Key words:  Apostichopus japonicus    lectin    gene cloning    prokaryotic expression
               出版日期:  2015-12-21      发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2015-12-21
中图分类号:  Q812%S917  
引用本文:    
薛壮, 李慧, 孙鹤, 孔德荣, 马普, 周玮, 仇雪梅, 刘洋, 王秀利. 刺参C型凝集素(AJL)基因的克隆及原核表达分析[J]. 大连海洋大学学报, 2015, 30(6): 610-615.
XUE Zhuang, LI Hui, SUN He, KONG De-rong, MA Pu, ZHOU Wei QIU Xue-mei, LIU Yang, WANG Xiu-li. Cloning and prokaryotic expression of a novel recombinant C-type lectin （AJL） gene in sea cucumber Apostichopus japonicus. Journal of Dalian Ocean University, 2015, 30(6): 610-615.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2015.06.007  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2015/V30/I6/610
[1] 王涵, 王浩娜, 赵业. 刺参肠道组织结构及消化酶活性分析[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(5): 823-829.
[2] 王旭东, 范晨龙, 丁燏. 溶藻弧菌磷酸甲基嘧啶合酶(ThiC)的原核表达及其乙酰化修饰鉴定[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(3): 435-440.
[3] 马得友, 于莲莲, 林威港, 汪成粱, 丁君, 常亚青. 刺参Wnt9基因克隆、组织分布及在胚胎发育中的表达分析[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(3): 394-402.
[4] 王研, 高思祺, 匡倩瑶, 刘怡宁, 田燚?. 刺参3个盐度相关microRNA及预测靶基因的表达模式分析[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(2): 212-220.
[5] 李广, 崔晓, 姚春凤, 陈东鸿, 何凯, 陈冠霖, 韩煜轩, 杨奇慧, 迟淑艳. 珍珠龙胆石斑鱼紧密连接蛋白基因Claudin-3与Claudin-12的克隆及精氨酸干预下的肠道表达[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(1): 61-70.
[6] 陈徵婷, 可小丽, 陈刚, 黄丽芳, 刘志刚, 卢迈新. 基于密码子优化策略的无乳链球菌表面蛋白LrrG的原核表达、纯化及免疫原性[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(6): 920-928.
[7] 梁振宇, 邹子鸿, 汤菊芬, 黄瑜, 简纪常, 蔡佳. 斜带石斑鱼热休克蛋白基因HSP70在LPS和Poly I∶C刺激下的表达分析及重组蛋白制备[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(6): 937-942.
[8] 罗嘉俊, 卓宏标, 陈俊涛, 梁华芳, 温崇庆. 波纹龙虾性腺抑制激素(GIH)基因克隆、表达及其对光周期的响应[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(5): 727-735.
[9] 杨晴晴, 金祎雯, 李伟, 赵菲, 孔亮, 佟长青. 基于蛋白质组学的菲律宾蛤仔凝集素MCL-T抑制腐败希瓦氏菌机理研究[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(4): 653-660.
[10] 李成华. 刺参腐皮综合征发生的分子调控机制研究进展[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(3): 355-373.
[11] 罗国玲, 王孝谦, 简纪常, 鲁义善, 汤菊芬, 黄瑜. 尼罗罗非鱼CD209基因的克隆、表达及功能鉴定[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(3): 374-382.
[12] 余云登, 朱浩拥, 王盛南, 王耀辉, 马文超, 杨晓, 朱永祥, 钱晓明, 王秀利. 暗纹东方鲀leptin基因的克隆、SNP筛选及其与生长性状的关联分析[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(2): 207-213.
[13] 陈曦, 李英英, 陈强, 宋铁英, 葛均青. 鳗鲡疱疹病毒ORF8基因的克隆表达及转录时相分析[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(1): 10-15.
[14] 赵谭军, 尹文露, 邹炀, 刘丽, 宋坚, 常亚青, 湛垚垚. 刺参精子冷冻保存方法研究[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(1): 57-65.
[15] 时嘉赓, 冯艳微, 姜绪, 刘相全. 不同藻类与混养比例对刺参与马粪海胆生长、体成分和消化酶活性的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(4): 509-515.
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