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大连海洋大学学报  2015, Vol. 30 Issue (6): 604-609    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2015.06.006
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哲罗鲑胰岛素样生长因子Ⅱ cDNA的克隆与组织表达分析
吴秀梅,徐黎明,王晓玉,纪锋,赵景壮,刘淼,曹永生,卢彤岩,尹家胜
中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
Cloning and tissue expression of insulin-like growth factor-Ⅱ cDNA in taimen Hucho taimen
WU Xiu-mei,XU Li-ming,WANG Xiao-yu,JI Feng,ZHAO Jing-zhuang,LIU Miao,CAO Yong-sheng,LU Tong-yan,YIN Jia-sheng
1. Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China
下载:  PDF (1115KB) 
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摘要 为了研究胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factors-Ⅱ,IGF-Ⅱ)在哲罗鲑Hucho taimen生长繁殖过程中所起的作用,根据Gen Bank收录的大西洋鲑IGF-Ⅱ基因开放阅读框序列(NCBI登录号:NM001123647)设计用于哲罗鲑IGF-Ⅱ开放阅读框扩增的引物,以哲罗鲑肝脏总RNA反转录成的cDNA为模板,利用PCR方法克隆获得哲罗鲑IGF-Ⅱ基因的开放阅读框。生物信息学分析结果显示,哲罗鲑IGF-Ⅱ基因的长度为645 bp,编码含有214个氨基酸残基的蛋白,该蛋白的相对分子质量为24554,等电点为9.92;哲罗鲑IGF-Ⅱ前肽由信号肽、B、C、A、D、E肽6部分构成;同源性比对和系统进化分析结果显示,哲罗鲑IGF-Ⅱ与鲑科鱼类IGF-Ⅱ核苷酸序列同源性最高,聚为一支,其中与大西洋鲑的IGF-Ⅱ同源性最高(98.6%),该基因在进化过程中有着高度保守的进化特性;用荧光定量PCR技术检测2龄哲罗鲑IGF-Ⅱ基因在不同组织中的表达,结果显示,该基因在肝脏中表达量最高,在心脏、鳃、脾、后肠、头肾、胃中的表达量次之,而在前肠和脑中的表达量最低。
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尹家胜
关键词:  哲罗鲑  胰岛素样生长因子-Ⅱ  基因表达特征    
Abstract: In this study,RNA extract in liver of taimen Hucho taimen was used as a template,and IGF-Ⅱ gene open reading frame was amplified by one step RT-PCR using primers designed by Atlantic salmon IGF-Ⅱ gene indexed by Gen Bank(NCBI No.NM_ 001123647) to evaluate role of fish insulin-like growth factor-Ⅱ(IGF-Ⅱ) in the development of taimen embryos.Bioinformatics analysis revealed that the IGF-Ⅱ contained an ORF of 645 bp encoding 214 amino acid with a signal peptides and five regions named as B,C,A,D,and E.The IGF-Ⅱ of taimen had molecular weight of 24 554 and the isoelectric point of 9.92,shared high identity(98.6%) with salmon and the homology of the IGF-Ⅱ gene at nucleotide and amino acid level.The IGF-ⅡmRNA expression was detected in different tissues using Real-Time quantitative PCR technique.It was found that the maximal expression was observed in the liver,followed by in the heart,gill,spleen,hindgut,kidney,stomach,and muscle,and the minimal expression in the foregut and brain.
Key words:  Hucho taimen    insulin-like growth factor-Ⅱ    expression pattern
               出版日期:  2015-12-21      发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2015-12-21
中图分类号:  S917.4%S965.232  
引用本文:    
吴秀梅, 徐黎明, 王晓玉, 纪锋, 赵景壮, 刘淼, 曹永生, 卢彤岩, 尹家胜. 哲罗鲑胰岛素样生长因子Ⅱ cDNA的克隆与组织表达分析[J]. 大连海洋大学学报, 2015, 30(6): 604-609.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2015.06.006  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2015/V30/I6/604
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