Please wait a minute...

大连海洋大学学报  2020, Vol. 35 Issue (2): 253-259    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-154
  |
三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因的克隆及在病原刺激下的免疫应答
阎德平1、3,吕建建2、3,题兴斌3,张文1、3,张云滨3,宋柳3,刘萍2、3*
1.大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连;2.青岛海洋科学与技术国家实验室 海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东 青岛;3.中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东 青岛
Cloning and response to pathogen stimulation of C-type lectin gene CTL5 in swimming crab Portunus trituberculatus
YAN Deping1,3, Lü Jianjian2,3, TI Xingbin3,ZHANG Wen1,3, ZHANG Yunbin3, SONG Liu3, LIU Ping2,3*
1.College of Fisheries and Life Science, Dalian Ocean University, Dalian; 2.Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao; 3.Key Laboratory of Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao
下载:  HTML  PDF (2271KB) 
输出:  BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 为明确三疣梭子蟹Portunus trituberculatus C-型凝集素CTL5的结构和功能,采用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA end,RACE)技术克隆获得三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因(PtCTL5)的cDNA全长。结果表明:PtCTL5基因全长为1026 bp,包含732 bp的开放阅读框,编码了243个氨基酸组成的蛋白,相对分子质量为26 000,为半乳糖结合型凝集素;Blast分析显示,PtCTL5氨基酸序列与克氏原螯虾Procambarus clarkia CTL的一致性最高,为41.84%;系统进化树分析显示,PtCTL5与已发表的三疣梭子蟹的另4种C-型凝集素亲缘关系较远;胚胎及幼体不同发育时期的定量分析表明,PtCTL5在溞状幼体Ⅲ期表达量最高,在胚胎发育的心跳期表达量最低;组织表达分析显示,PtCTL5在血细胞中的表达量最高,肝胰腺中次之;人工注射副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus后,PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量均于72 h时达到峰值;而注射对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后,PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量分别于72、12 h达到峰值且显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,C-型凝集素在三疣梭子蟹先天免疫中具有一定的功能,本研究结果可为进一步解析三疣梭子蟹免疫应答机制提供参考。
服务
把本文推荐给朋友
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章
阎德平、
吕建建、
题兴斌
张文、
张云滨
宋柳
刘萍、
关键词:  三疣梭子蟹  C-型凝集素  副溶血弧菌  对虾白斑综合征病毒(WSSV)  免疫应答    
Abstract: The C-type lectin cDNA of swimming crab Portunus trituberculatus(designated PtCTL5)was cloned by rapid amplification of cDNA ends to clarify the structure and function of PtCTL5 gene.It was found that PtCTL5 as galactose-binding lectin was 1026 bp in length, containing an open reading frame of 732 bp and encoding a mature protein of 243 amino acids, with a relative molecular mass of 26 000.Blast analysis revealed that amino acid sequence of PtCTL5 had the maximal similarity with red swamp crayfish Procambarus clarkii, up to 41.84%.Phylogenetic tree analysis showed that PtCTL5 was far from being related to four other C-type lectins found from swimming crab Portunus trituberculatus.The expression of PtCTL5 gene was shown to be varied with different developmental stages, the maximum in zoea Ⅲ stage of larval development and the minimal in heart beating stage of embryo development.The PtCTL5 gene was expressed in all tested tissues with the maximum in hemocytes, followed by hepatopancreas.Under normal circumstances, after artificial infection with Vibrio parahaemolyticus, the maximal expression of PtCTL5 gene in hemocytes and in hepatopancreas at 72 h; while, exposed to WSSV infection, the peak PtCTL5 gene expression was observed hemocytes and hepatopancreas at 72 h and 12 h, respectively, significantly higher than that in the control group(P<0.05).The findings indicate that PtCTL5 plays an important role in the immune response in swimming crab and lays a reference for further research on the swimming crab immune system.
Key words:  Portunus trituberculatus    C-type lectin    Vibrio parahaemolyticus    WSSV    immune response
               出版日期:  2020-04-07      发布日期:  2020-04-07      期的出版日期:  2020-04-07
中图分类号:  S968.25  
  Q786  
基金资助: 国家自然科学基金资助项目(41576147);泰山领军人才工程高效生态农业创新类计划项目(LJNY2015002);国家虾蟹产业技术体系专项(CARS-48);江苏省重点研发计划项目(BE2017325);青岛市应用基础研究计划项目(17-1-1-95-jch);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(20603022018027)
引用本文:    
阎德平、, 吕建建、, 题兴斌, 张文、, 张云滨, 宋柳, 刘萍、. 三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因的克隆及在病原刺激下的免疫应答[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(2): 253-259.
YAN Deping, Lü Jianjian, TI Xingbin, ZHANG Wen, ZHANG Yunbin, SONG Liu, LIU Ping, . Cloning and response to pathogen stimulation of C-type lectin gene CTL5 in swimming crab Portunus trituberculatus. Journal of Dalian Ocean University, 2020, 35(2): 253-259.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-154  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2020/V35/I2/253
[1] 李春艳, 白晓慧, 刘义, 张振国, 张丽, 刘克明, 郝爽, 罗璋, 尤宏争. 致病性副溶血弧菌VP0630株的分离鉴定及其对凡纳滨对虾免疫酶活力的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(4): 502-508.
[2] 于旋, 任宪云, 李健, 刘萍, 高保全, 刘九美, 窦全伟. 氟苯尼考对三疣梭子蟹不同组织中ABC转运蛋白基因(ABCG)表达量的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2017, 32(3): 255-261.
[3] 刘贤曦, 任宪云, 高保全, 刘萍, 李健. 连续九代家系内自交对三疣梭子蟹幼体变态和形态性状的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2016, 31(5): 469-476.
[4] 张健, 王忠秋, 管卫兵. 近海蟹笼两种主要渔获蟹类的渔业生物学特性[J]. 大连海洋大学学报, 2015, 30(5): 540-545.
[5] 王好锋, 高保全, 段亚飞, 韩晓琳, 刘萍, 李健. 三疣梭子蟹家系自交与杂交对繁殖和子代早期生长的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2014, 29(2): 114-120.
[6] 韩晓琳, 王好锋, 高保全, 刘萍, 陈萍, 李健, 李华. 低盐度对不同三疣梭子蟹群体幼蟹发育的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2014, 29(1): 31-34.
[7] 隋延鸣, 高保全, 刘萍, 任宪云, 李洋, 丁金强, 段亚飞. 三疣梭子蟹“黄选1号”盐度耐受性及适宜生长盐度分析[J]. 大连海洋大学学报, 2012, 27(5): 398-401.
[8] 孙钦艳, 王敏强, 苏培, 雷文华. 三疣梭子蟹不同地理群体线粒体DNA ND5基因序列的变异与分化[J]. 大连海洋大学学报, 2010, 25(6): 518-522.
[9] 吴丹华, 郑萍萍, 张玉玉, 王春琳. 温度胁迫对三疣梭子蟹血清中非特异性免疫因子的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2010, 25(4): 370-375.
[10] 王茂林, 张秀梅, 黄国强, 张沛东. 水流对三疣梭子蟹幼蟹运动行为和代谢的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2009, 24(4): 321-324.
[11] 高保全, 刘萍, 李健. 三疣梭子蟹3个地理种群杂交子一代生长和存活率的比较[J]. 大连海洋大学学报, 2008, 23(5): 325-329.
[12] 徐海圣, 徐步进. 蟹源副溶血弧菌胞外蛋白酶的纯化与特性分析[J]. 大连海洋大学学报, 2008, 23(4): 247-251.
[13] 杨弘诣, 杨为东, 赵文, 腾力平, 张国辉, 程刚. 海马病原菌的分离鉴定及其对抗生素敏感性的研究[J]. 大连海洋大学学报, 2006, 21(2): 131-133.
[14] 臧红梅, 樊景凤, 王斌. 应用斑点ELISA技术检测副溶血弧菌[J]. 大连海洋大学学报, 2006, 21(1): 79-82.
No Suggested Reading articles found!
Viewed
Full text


Abstract

Cited

  Shared   
  Discussed