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大连海洋大学学报  2017, Vol. 32 Issue (3): 255-261    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.03.001
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氟苯尼考对三疣梭子蟹不同组织中ABC转运蛋白基因(ABCG)表达量的影响
于旋1、2,任宪云2,李健2,刘萍2,高保全2,刘九美1、2,窦全伟1、2
1.大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连116023;2.中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛266071
Effects of florfenicol on relative expression of ATP-binding cassette transporter gene(ABCG)in different tissues of sw imm ing crab Portunus trituberculatus
YU Xuan1,2,REN Xian-yun2,LIJian2,LIU Ping2,GAO Bao-quan2,LIU Jiu-mei1,2,DOU Quan-wei1,2
1.College of Fisheries and Life Science,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China;2.Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Acad-emy of Fishery Sciences,Qingdao 266071,China
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摘要 为研究氟苯尼考(FLR)对三疣梭子蟹Portunus trituberculatus不同组织中ABC转运蛋白基因(AB-CG)表达量的影响,采用RACE法进行了三疣梭子蟹ABCG基因克隆并对其生物学进行了分析,采用荧光定量PCR法进行了不同浓度(20、40、80 mg/kg)氟苯尼考对三疣梭子蟹肝胰腺、鳃和肌肉中ABCG相对表达量的影响研究。结果表明:三疣梭子蟹ABCG基因全长cDNA序列为2473 bp,共编码578个氨基酸;三疣梭子蟹ABCG不含信号肽,具ABC转运家族蛋白的典型结构域,包括1个高度保守的核苷酸结构域(NBD)和1个疏水性跨膜区(TMD),为半转运子;同源性及系统进化分析表明,三疣梭子蟹ABCG与中国对虾、凡纳滨对虾的ABCG聚为一支,具有较高的亲缘关系;不同浓度的氟苯尼考对三疣梭子蟹肝胰腺、鳃、肌肉中ABCG表达均具有诱导作用,且呈时间剂量效应,由此推测,三疣梭子蟹ABCG蛋白参与氟苯尼考的代谢转运过程。本研究结果可为揭示甲壳动物ABCG转运蛋白对抗生素的转运机制提供参考依据。
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于旋
任宪云
李健
刘萍
高保全
刘九美
窦全伟
关键词:  三疣梭子蟹  ABC转运蛋白  基因克隆  氟苯尼考  荧光定量PCR    
Abstract: ATP-binding cassette transporter genewas cloned in swimming crab Portunus trituberculatus by a RACE method and the gene expression of ABCG was in hepatopancreas,gill and muscle of swimming crab with intramus-cular injection of flofenicol ata dose of20,40 and 80mg/kg to evaluate effects of florfenicol on the gene expression of ABCG in different tissues of swimming crab by fluorescent quantitative PCR.Results showed the full-length of ABCG cDNA of swimming crab(ptABCG)was shown to be 2473 bp encoding a polypeptide of 578 amino acids. Bioinformatics analysis indicated that ptABCG,without signal peptide,sharedmany similaritieswith the ABC trans-membrane transporter,including two conserved regions:a highly conserved nucleotide binding domains(NDB) and a transmembrane domain(TMD).Homology and phylogenetic analysis revealed that the amino acid sequence of ptABCG shared a high similarity with Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis and Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei.The gene expression of ptABCG was up-regulated in hepatopancreas,gill and muscle after intramuscular injection of different doses of florfenicol,showing time-dose effect.It is speculated that the ptABCG protein may involve in themetabolism of florfenicol in swimming crab.
Key words:  Portunus trituberculatus    ATP-binding cassette transporter    gene cloning    florfenicol    fluorescent quantitative Real-time PCR
                    发布日期:  2017-06-21      期的出版日期:  2017-06-21
中图分类号:  S968.25  
基金资助: 国家自然科学基金青年基金资助项目(41506166);泰山领军人才工程高效生态农业创新类计划项目(LJNY2015002)
引用本文:    
于旋, 任宪云, 李健, 刘萍, 高保全, 刘九美, 窦全伟. 氟苯尼考对三疣梭子蟹不同组织中ABC转运蛋白基因(ABCG)表达量的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2017, 32(3): 255-261.
YU Xuan, REN Xian-yun, LIJian, LIU Ping, GAO Bao-quan, LIU Jiu-mei, DOU Quan-wei, . Effects of florfenicol on relative expression of ATP-binding cassette transporter gene(ABCG)in different tissues of sw imm ing crab Portunus trituberculatus. Journal of Dalian Ocean University, 2017, 32(3): 255-261.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.03.001  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2017/V32/I3/255
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