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大连海洋大学学报  2016, Vol. 31 Issue (2): 190-193    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2016.02.013
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用3种方法提取中华绒螯蟹卵巢总蛋白效果的比较
梁箫,张显,闫应朋,刘志强,邱高峰
上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306
Comparative extraction of total proteins in ovary of Chinesem itten handed crab Eriocheir sinensis by differentm ethods
LIANG Xiao,ZHANG Xian,YAN Ying-peng,LIU Zhi-qiang,QIU Gao-feng
Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources,Ministry of Agriculture,Shanghai Ocean University,Shanghai201306,China
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摘要 为了探寻适于中华绒螯蟹Eriocheirsinensis卵巢蛋白质组学研究的总蛋白最佳提取方法,采用RC DC Protein Assay检测蛋白浓度、SDS-PAGE分析蛋白组成等,比较分析了用裂解液法Ⅰ、裂解液法Ⅱ和TCA/丙酮沉淀法提取中华绒螯蟹卵巢蛋白的效果。结果表明:应用3种方法提取的卵巢总蛋白浓度分别为15.59、13.05、0.65 mg/mL,用裂解液法提取的效果最佳,而TCA/丙酮沉淀法不适合用于中华绒螯蟹卵巢总蛋白的提取;SDS-PAGE电泳图谱进一步显示,用裂解液法Ⅱ提取的蛋白样品组成较为丰富,且重复性好,比较适合后续蛋白质组学研究。该研究结果可为中华绒螯蟹卵巢发育蛋白质组学研究提供参考。
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梁箫
张显
闫应朋
刘志强
邱高峰
关键词:  中华绒螯蟹  卵巢  蛋白质  提取方法  SDS-PAGE    
Abstract: The extraction effects of two lysis buffermethods and trichloroacetic acid/acetone precipitation method on total proteins in ovary of China mitten crab handed Eriocheir sinensis were comparatively studied for the proteomics by RC DC protein assay in order to search for the optimal extractionmethod to detect the protein level,and the protein composition was analyzed by SDS-PAGE.The results showed that the protein concentration was 15.59 mg/mL and 13.05 mg/mL by lysis buffermethods and 0.65 mg/mL,by trichloroacetic acid/acetone precipitation method,indicating better by lysis buffer methods than by trichloroacetic acid/acetone precipitation.The SDSPAGE maps analysis revealed that the sample extracted by lysis buffer methodⅡshowed more protein bands,and had high reproducibility.The findings indicate that lysis buffermethodⅡis the bettermethod for the proteomics of ovary proteins in Chinamitten handed crab,providing a reference for proteomics of Chinamitten handed crab.
Key words:  Eriocheir sinensis    ovary    protein    extraction method    SDS-PAGE
                    发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2016-04-21
中图分类号:  S917.4  
引用本文:    
梁箫, 张显, 闫应朋, 刘志强, 邱高峰. 用3种方法提取中华绒螯蟹卵巢总蛋白效果的比较[J]. 大连海洋大学学报, 2016, 31(2): 190-193.
LIANG Xiao, ZHANG Xian, YAN Ying-peng, LIU Zhi-qiang, QIU Gao-feng. Comparative extraction of total proteins in ovary of Chinesem itten handed crab Eriocheir sinensis by differentm ethods. Journal of Dalian Ocean University, 2016, 31(2): 190-193.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2016.02.013  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2016/V31/I2/190
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