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大连海洋大学学报  2019, Vol. 34 Issue (4): 482-491    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019.04.004
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金乌贼微卫星标记开发及两个野生群体遗传多样性比较
王鹤,李战军,王亮,王增东,贺加贝,刘永胜
烟台市海洋经济研究院 山东省水生动物资源养护管理中心 山东安源水产股份有限公司
Isolation of microsatellite markers and genetic diversity of wild populations in golden cuttlefish Sepia esculenta
WANG He;LI Zhan-jun;WANG Liang;WANG Zeng-dong;HE Jia-bei;LIU Yong-sheng
Yantai Marine Economic Research Institute, Yantai 264003, China;Shandong Hydrobios Resources Conservation and Management Center, Yantai 264003, China;Shandong Anyuan Aquaculture Limited Liability Company, Yantai 265617,China
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摘要 为进一步了解金乌贼Sepia esculenta野生群体遗传多样性水平,采用磁珠富集法从金乌贼基因组中开发了微卫星标记,并应用青岛(QD)金乌贼野生群体对其多态性进行评价,进而比较了青岛和长江口(CJK)两个野生群体的遗传差异。结果表明:开发标记的种群遗传学评价显示,在269个克隆子中,有192个含有微卫星序列(71.38%),基于该序列设计85对引物,其中20对通过筛选,完美型占60%,非完美型占10%,复合型占30%;经群体验证,表观等位基因数(A)为2~17不等,平均为8.15,观测杂合度(HO)分布范围为0.146~0.936,平均为0.630,期望杂合度(HE)分布范围为0.172~0.930,平均为0.702;其中5个位点不符合哈迪-温伯格(Hardy-Weinberg)平衡预期,存在零等位基因可能是其偏离平衡的原因;应用本研究开发的引物对2个近源种扩增,开发的20个标记位点中有6个在针乌贼Sepia andreana中表现为多态,4个位点在曼氏无针乌贼Sepiella maindroni中表现为多态;应用开发的11个位点对青岛和长江口两个野生群体进行遗传差异分析显示,所有位点中,青岛群体共检测到163个等位基因,长江口群体共检测到152个等位基因,每个位点的等位基因数为5~28和6~26不等,平均等位基因数分别为14.818和13.818;青岛群体独有等位基因19个,观测杂合度分布范围为0.250~0.936,平均为0.731,期望杂合度分布范围为0.265~0.930,平均为0.771,多态信息含量为0.223~0.946,平均为0.746;长江口群体独有等位基因8个,观测杂合度分布范围为0.500~0.896,平均为0.731,期望杂合度分布范围为0.623~0.960,平均为0.857,多态信息含量为0.614~0.948,平均为0.845;群体间遗传分化较弱(Fst值为0.032 5),群体分配分析结果表明,两个种群中所有个体正确分配到各自种群的概率分别为86.4%和84.0%。研究表明,本试验中开发的微卫星标记位点多样性水平略低于前人的研究,但有一定的跨种扩增通用性,长江口群体多样性
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刘永胜
关键词:  金乌贼  微卫星标记  野生群体  遗传多样性    
Abstract: Microsatellite loci were isolated and characterized through the magnetic beads enrichment method, and polymorphism evaluation and genetic differences were investigated in two wild populations(Qingdao, QD and Yangtze River Delta, CJK) of golden cuttlefish Sepia esculenta along coastal waters in China to explore the genetic diversity of the species. The population genetic evaluation of microsatellite markers indicated that in 269 clones 192 clones contained microsatellite sequences(71.38%), and 85 pairs of primers were designed based on these sequences, among which 20 pairs were clearly amplified and shown to be polymorphic, perfect SSR(accounting for 60%), imperfect SSR(10%), and compound SSR(30%). The numbers of alleles per locus were ranged from 2 to 17(average 8.15), the observed from 0.146 to 0.936(average 0.630)and expected heterozygosities from 0.172 to 0.930(mean 0.702). Fifteen of twenty loci was conformed to Hardy-Weinberg equilibrium and no significant linkage disequilibrium was found between any pair of loci after Bonferroni correction. Six and four loci displayed successful cross-species amplification in two other closely related species, Sepia andreana and Sepiella maindroni. A total of 163 alleles were detected in QD population, and 152 alleles in CJK population in 11 polymorphic loci analysis of population genetic diversity. The number of alleles was ranged from 5 to 28, with average allele number of 14.818, and 6 to 26, with average allele number of 13.818. There were 19 unique alleles in QD population,with observed heterozygosity from 0.250 to 0.936, with an average of 0.731, expected heterozygosity from 0.265 to 0.930 with an average of 0.771, polymorphic information content(PIC) from 0.223 to 0.946 with an average 0.746. There were 8 unique alleles in CJK population, with observation heterozygosity from 0.500 to 0.896(average 0.731), expected heterozygosity from 0.623 to 0.960(average 0.857), and PIC from 0.614 to 0.948 with an average 0.845. The genetic differentiation value(Fst) of 0.032 5 was
Key words:  Sepia esculenta    microsatellite locus    wild population    genetic diversity
                    发布日期:  2019-07-16      期的出版日期:  2019-07-16
中图分类号:  Q789  
引用本文:    
王鹤, 李战军, 王亮, 王增东, 贺加贝, 刘永胜. 金乌贼微卫星标记开发及两个野生群体遗传多样性比较[J]. 大连海洋大学学报, 2019, 34(4): 482-491.
WANG He, LI Zhan-jun, WANG Liang, WANG Zeng-dong, HE Jia-bei, LIU Yong-sheng. Isolation of microsatellite markers and genetic diversity of wild populations in golden cuttlefish Sepia esculenta. Journal of Dalian Ocean University, 2019, 34(4): 482-491.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019.04.004  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2019/V34/I4/482
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