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大连海洋大学学报  2012, Vol. 27 Issue (5): 387-391    DOI: 10.3969/j.issn.2095-1388.2012.05.001
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大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织原代培养的研究
郭莹1、2, 李霞1、2, 秦艳杰1、2
1.大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连116023;2.大连海洋大学辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室,辽宁大连116023
Primary culture of fin,lip and kidney cells in fat greenling Hexagrammos otakii
GUO Ying1,2,LI Xia1,2,QIN Yan-jie1,2
1.Key Laboratory of Mariculture&Stock Enhancement in North China's Sea,Ministry of Agriculture,Dalian Ocean University,Dalian 116023, China;2.Key Laboratory of Marine Bio-resources Restoration and Habitat Reparation in Liaoning Province,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China
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摘要 应用组织块培养法,研究了大泷六线鱼Hexagrammos otakii鳍、吻端和肾脏细胞在含有体积分数为20%胎牛血清 (FBS)的L-15、DMEM和DMEM/F12 3种培养基中的生长情况,以及人碱性成纤维细胞(bFGF)、硫酸软骨素、Ⅰ型胰岛素样 (IGF-Ⅰ)3种生长因子对细胞贴壁率和迁出率的影响。结果表明:大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏细胞适宜的体外培养体系为DMEM/F12培养基+20%FBS,pH为7.2,温度为25℃;在最适培养基中分别添加5.0 ng/mL bFGF、20 μg/mL硫酸软骨素、40 ng/mL IGF-Ⅰ时,3种组织的贴壁率和细胞迁出率均最高;鳍、吻端和肾脏组织分别经培养21、15、18 d后长满单层,主要为成纤维样细胞;采用低渗滴片法制备染色体,3种组织原代细胞的染色体数目为48条。本研究为大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织细胞系的构建和生物学特性的研究奠定了基础。
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郭莹
李霞
秦艳杰
关键词:  大泷六线鱼  培养基  生长因子  原代培养    
Abstract: In vitro culture performance of fin,lip and kidney cells was compared in fat greenlingHexagrammos otakiiby explant method with three media(L-15,DMEM and DMEM/F12)and three growth factors(bFGF, chondroitin sulfate and IGF-Ⅰ).Depending on the migrating rate,anchorage-dependent rate and morphology,the optimal culture system for fat greenling fin,lip and kidney cells was found to be DMEM/F12 medium supplemented with 20%FBS,at pH 7.2 and 25℃,while the maximal attachment rate and cell emigration were observed in the cell culture media supplemented with 5.0 ng/mL bFGF,20 μg/mL chondroitin sulfate or 40 ng/mL IGF-Ⅰ.The cells in primary culture were all in fibroblastic morphology and proliferated to confluence for the fin in 21 d,lip in 15 d and kidney in 18 days,with 2n=48 chromosomes.The findings provide a useful foundation with the establishment of in vitro cell-line and the functional investigation of fin,lip and kidney cells in fat greenling.
Key words:  Hexagrammos otakii    medium    growth factor    cell primary culture
                    发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2012-10-21
中图分类号:  S917.4  
引用本文:    
郭莹, 李霞, 秦艳杰. 大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织原代培养的研究[J]. 大连海洋大学学报, 2012, 27(5): 387-391.
GUO Ying, LI Xia, QIN Yan-jie, . Primary culture of fin,lip and kidney cells in fat greenling Hexagrammos otakii. Journal of Dalian Ocean University, 2012, 27(5): 387-391.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.3969/j.issn.2095-1388.2012.05.001  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2012/V27/I5/387
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