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大连海洋大学学报  2022, Vol. 37 Issue (5): 850-857    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-295
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坛紫菜分离蛋白的提取与结构解析
陶凤庭,潘创*,戚勃,胡晓,赵永强,杨贤庆*,杨莉莉
1.上海海洋大学 食品学院,上海 201306;2.中国水产科学研究院南海水产研究所 农业农村部水产品加工重点实验室国家水产品加工技术研发中心,广东 广州 510300;3.大连工业大学 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心,辽宁 大连 116034;4.广东百维生物科技有限公司,广东 化州525100
Extraction and structural analysis of isolated proteins from laver Porphyra haitanensis
TAO Fengting, PAN Chuang*, QI Bo, HU Xiao, ZHAO Yongqiang, YANG Xianqing*, YANG Lili
1.College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 2. Key Laboratory of Aquatic Product Processing, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, National Research and Development Center for Aquatic Product Processing, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China; 3.Collaborative Innovation Center of Seafood Deep Processing, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China; 4.Guangdong Baiwei Bio Material Company Limited, Huazhou 525100, China
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摘要 为探究不同饱和度硫酸铵在坛紫菜Porphyra haitanensis蛋白分离过程中对蛋白结构特征和抗氧化活性的影响,采用梯度饱和度(10%~60%)硫酸铵沉淀法从坛紫菜粗提液(crude extract of Porphyra haitanensis,CEPh)中制备分离蛋白,对分离蛋白的理化性质、结构和光谱特性等进行测定,并比较了分离蛋白的抗氧化活性差异。结果表明:超声波辅助磷酸盐缓冲液法的蛋白提取率最高,为55.28%;用硫酸铵对坛紫菜粗提液进行梯度分离,蛋白主要在40%~60%饱和度下沉出;紫外吸收光谱显示,当硫酸铵饱和度为30%~50%时,藻胆蛋白大量沉出;红外光谱显示,当硫酸铵饱和度超过50%时,773、1 155 cm-1处出现了2个非蛋白吸收峰;圆二色光谱显示,坛紫菜蛋白以α-螺旋结构为主,其中,分离蛋白40%-PhPI的结构最为有序;SDS-PAGE凝胶电泳显示,低饱和度(10%~30%)硫酸铵会显著增加相对分子质量为55 000、20 000和18 000的蛋白析出;抗氧化活性试验显示,不同饱和度硫酸铵提取获得的坛紫菜分离蛋白均具有一定的抗氧化活性,但活性强弱存在显著性差异(P<0.05)。研究表明,用不同饱和度硫酸铵得到的分离蛋白均表现出体外抗氧化活性,但蛋白结构特性与抗氧化活性存在较大差异。
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陶凤庭
潘创
戚勃
胡晓
赵永强
杨贤庆
杨莉莉
关键词:  坛紫菜  蛋白质  提取分离  抗氧化活性  光谱特性    
Abstract: To understand effect of ammonium sulfate on the structural property and antioxidant activity of the isolated proteins during separation, the proteins were precipitated by using ammonium sulfate with gradient saturation from laver Porphyra haitanensis. The physicochemical, structural and spectral properties and differences in their antioxidant activities of target proteins were analzed. The results showed that there was the maximal extraction rate of up to 55.28% by ultrasonic-assisted phosphate buffer treatment. The crude extract of laver P.haitanensis (CEPh) then was precipitated by ammonium sulfate with different saturations and the protein was mainly precipitated at 40% to 60% saturation. UV absorption showed that phycobiliproteins were precipitated at ammonium sulfate saturation varying from 30% to 50%. When the saturation exceeded 50%, however, two non-protein absorption peaks were appeared at 773 and 1 155 cm-1 in the infrared spectra. The Circular Dichroism spectra revealed that the α-helix structure was the main protein structure of the laver, the protein structure of 40%-PhPI being the most orderly. SDS-PAGE indicated that low saturation (10% to 30%) of ammonium sulfate led to significantly improve the precipitation of proteins with relative molecular mass of 55 000, 20 000 and 18 000. The antioxidant tests revealed that the isolated proteins obtained with ammonium sulfate at different saturation had certain antioxidant activities, but with great differences. The finding provides ideas for the extraction method of the laver protein and the selection of saturation range of ammonium sulfate precipitation method, which provides support for the antioxidant activity of the laver protein.
Key words:  Porphyra haitanensis    protein    extraction and isolation    antioxidant activity    spectral characteristics
               出版日期:  2022-11-14      发布日期:  2022-11-14      期的出版日期:  2022-11-14
中图分类号:  S 985.4  
基金资助: 广东省重点领域研发计划项目(2020B1111030004);财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-50);农业农村部财政专项(NFZX2021);中国水产科学研究院基本科研业务费资助(2020TD73);茂名市引进创新创业团队项目(200201095834980)
引用本文:    
陶凤庭, 潘创, 戚勃, 胡晓, 赵永强, 杨贤庆, 杨莉莉. 坛紫菜分离蛋白的提取与结构解析[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(5): 850-857.
TAO Fengting, PAN Chuang, QI Bo, HU Xiao, ZHAO Yongqiang, YANG Xianqing, YANG Lili. Extraction and structural analysis of isolated proteins from laver Porphyra haitanensis. Journal of Dalian Ocean University, 2022, 37(5): 850-857.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-295  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2022/V37/I5/850
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