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大连海洋大学学报  2010, Vol. 25 Issue (2): 97-101    DOI: 10.3969/j.issn.1000-9957.2010.02.001
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海洋假交替单胞菌CI4菌株抗菌蛋白分离纯化的初步研究
马悦欣,刘志明,刘鹏亮,曹善茂,张丽萍,谢淑瑾
大连水产学院农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室
Purification and partial characterization of antibacterial protein from bacterium Pseudoalteromonas sp. CI4
MA Yue-xin,LIU Zhi-ming,LIU Peng-liang,CAO Shan-mao,ZHANG Li-ping,XIE Shu-jin
Key Laboratory of Mariculture,Agriculture Ministry,PRC,Dalian Fisheries Univ.,Dalian 116023,China
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摘要 将海洋假交替单胞菌Pseudoaltermonas sp.CI4菌株于VNSS液体培养基中培养,获得浓缩无细胞上清液,采用纸片扩散法检测其抗菌活性。结果表明,该菌株的胞外产物能够抑制从岩石表面分离的污损细菌S1菌株和其自身的生长。除去菌体培养液,用饱和度为70%的硫酸铵沉淀,所得的拮抗物粗提液对热部分敏感,对蛋白酶K和链霉蛋白酶敏感,其作用的活性pH稳定范围为5.0-9.0。粗提液经Sephadex G-200柱层析、DE-52纤维素离子交换柱层析,Microcon离心超滤管分级和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)跟踪检测,得到电泳纯抗菌蛋白,其相对分子质量为37 200。
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马悦欣
刘志明
刘鹏亮
曹善茂
张丽萍
谢淑瑾
关键词:  假交替单胞菌CI4菌株  抗菌蛋白  纯化    
Abstract: The bacterium Pseudoalteromonas sp.CI4 was cultured in a complex marine growth medium(VNSS) and the concentrated cell-free bacterial supernatant was prepared.The antibacterial activity in the supernatant was assayed by a disk diffusion method.It was found that an extracellular component of CI4 strain strongly inhibited the growth of fouling bacterial strain S1 isolated from rock and strain CI4 itself.Crude extract obtained by precipitation of the supernatant of CI4 with 70% saturated(NH4)2SO4 had partial heat-sensitive,sensitive to proteinase K and pronase,with relative active stable within the pH range from 5.0 to 9.0.The antibacterial protein was purified from the crude extract of CI4 by Sephadex G-200 gel filtration chromatography,DE-cellulose 52 ionic exchange chromatography and Microcon centrifugal ultrafiltration tube(nominal molecular weight cut off of 30 000) fractionation.A single band with the molecular weight of 37 200 was detected upon SDS-PAGE.
Key words:  Pseudoalteromonas sp. CI4    antibacterial protein    purification
               出版日期:  2010-04-21      发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2010-04-21
中图分类号:  Q938.1  
引用本文:    
马悦欣, 刘志明, 刘鹏亮, 曹善茂, 张丽萍, 谢淑瑾. 海洋假交替单胞菌CI4菌株抗菌蛋白分离纯化的初步研究[J]. 大连海洋大学学报, 2010, 25(2): 97-101.
MA Yue-xin, LIU Zhi-ming, LIU Peng-liang, CAO Shan-mao, ZHANG Li-ping, XIE Shu-jin. Purification and partial characterization of antibacterial protein from bacterium Pseudoalteromonas sp. CI4. Journal of Dalian Ocean University, 2010, 25(2): 97-101.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.3969/j.issn.1000-9957.2010.02.001  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2010/V25/I2/97
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