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大连海洋大学学报  2014, Vol. 29 Issue (4): 381-385    DOI: 10.3969/J.ISSN.2095-1388.2014.04.011
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底物诱导海洋假单胞菌DEH138 A产生脱卤酶的研究
王亚月1、2, 信艳娟1, 张锦友1、2,薛松1
1.中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组, 辽宁大连 116023; 2.中国科学院大学, 北京100049
Mechanismofsubstrate-induceddehalogenasesinmarinebacteriumPseudomonasstutzeriDEH138A
WANG Ya-yue1,2,XIN Yan-juan1,ZHANG Jin-you1,2,XUE Song1
1.Marine Bioproducts Engineering Group, Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023,China;2.University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049,China
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摘要 海洋假单胞菌PseudomonasstutzeriDEH138A可以产生两种诱导型脱卤酶, 即L-卤代酸脱卤酶(L-DEX)和D-卤代酸脱卤酶(D-DEX)。用DL-2-氯丙酸(DL-2-CPA)、D-2-氯丙酸(D-2-CPA)和L-2-氯丙酸(L-2-CPA)3种诱导物分别作为种子培养与发酵培养碳源,诱导菌株DEH138A,通过HPLC检测反应体系中氯丙酸的剩余量来评估酶活性,研究底物对其酶活性的影响,并优化培养方式, 实现单一构型卤代酸脱卤酶的定向诱导。结果表明:L-2-CPA可定向诱导L-DEX的产生,L-2-CPA作为唯一碳源诱导时得到的L-DEX酶活性是D-DEX酶活性的85倍,优化培养获得的L-DEX和D-DEX最高酶活性分别为6.11×10-2、3.23×10-3U/mL(培养基),与DL-2-CPA作为诱导底物时相比较,分别提高了5.1倍和2.3倍。研究表明,L-2-CPA具有诱导专一性,实现了L-DEX的定向诱导, 但对于D-DEX, 则不能用L-DEX被相应构型底物诱导产生的机理解释, 有待进一步研究。
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王亚月
信艳娟
张锦友
薛松
关键词:  假单胞菌  脱卤酶  氯丙酸  诱导    
Abstract: The effects of carbon source substrates DL-2-chloropropionic acid(DL-2-CPA), L-2-chloropropionic acid(L-2-CPA) and D-2-chloropropionic acid(D-2-CPA) on induction of 2-haloacid dehalogenases L-2-haloacid dehalogenase(L-DEX) and D-2-haloacid dehalogenase(D-DEX) were studied and culture process was optimized in marine bacteriumPseudomonasstutzeriDEH138A. The residual chloropropionic acid in the reaction system was quantified by HPLC. The L-2-CPA as sole carbon source was shown to specifically induce L-DEX production, with 84 times higher activity than D-DEX. The maximum activities of L-DEX (6.11×10-2U/mL media) and D-DEX (3.23×10-3U/mL media) were observed under culture condition of sole carbon source of L-2-CPA, 5.1 times and 2.3 times as the induction of DL-2-CPA. The findings indicate that L-2-CPA shows specificity for directional induction of L-DEX. For D-DEX, however, it is not explained by the mechanism of L-DEX which is induced by corresponding substrate, and the induction of D-DEX needs to be further studied.
Key words:  Pseudomonasstutzeri    dehalogenases    chloropropionic acid    induction
                    发布日期:  2016-12-30      期的出版日期:  2014-08-21
中图分类号:  Q939.97  
引用本文:    
王亚月, 信艳娟, 张锦友, 薛松. 底物诱导海洋假单胞菌DEH138 A产生脱卤酶的研究[J]. 大连海洋大学学报, 2014, 29(4): 381-385.
WANG Ya-yue, XIN Yan-juan, ZHANG Jin-you, XUE Song. Mechanismofsubstrate-induceddehalogenasesinmarinebacteriumPseudomonasstutzeriDEH138A. Journal of Dalian Ocean University, 2014, 29(4): 381-385.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.3969/J.ISSN.2095-1388.2014.04.011  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2014/V29/I4/381
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