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大连海洋大学学报  2023, Vol. 38 Issue (4): 623-629    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-323
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体外传代对大口黑鲈蛙虹彩病毒毒株毒力的影响
王丛旭,潘晓艺,周可欣,穆雪娇,姚嘉赟,蔺凌云,赵建华,沈锦玉*
1.湖州师范学院 生命科学学院,浙江 湖州 313001;2.浙江省淡水水产研究所 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室,浙江省鱼类健康与营养重点实验室,浙江 湖州 313001
Effect of in vitro passage on virulence of largemouth bass (Micropterus salmoides) ranavirus
WANG Congxu,PAN Xiaoyi,ZHOU Kexin,MU Xuejiao,YAO Jiayun,LIN Lingyun,ZHAO Jianhua,SHEN Jinyu*
1.College of Life Sciences,Huzhou University,Huzhou 313001,China;2. Key Laboratory of Healthy Freshwater Aquaculture,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Key Laboratory of Fish Health and Nutrition of Zhejiang Province,Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries,Huzhou 313001,China
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摘要 为研究不同代次大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)的病毒特性变化及毒力差异,采用攻毒试验、qPCR、TCID50及二代测序的方法,对LMBV分离株(LMBV-ZJDSS)F5、F35和F65进行致病性、组织中病毒载量变化、病毒滴度和不同代次病毒基因组测序,在LMBV全基组中筛选出4个毒力基因,并对不同地区毒株的毒力基因进行分析。结果表明:攻毒浓度为108.5 TCID50/mL时,F5、F35和F65代毒株15 d内引起大口黑鲈(Micropterus salmoides)的死亡率分别为60%、25%和5%;F65代毒株最早产生细胞病变效应(cytopathic effect,CPE);大口黑鲈肝脏、脾脏和肠的病毒载量较高,不同代次毒株在各组织中均有分布,96 h内F65代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势,48 h内F5代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势;对F5和F65代毒株的全基因组测序分析显示,E3、TNFR和ICP18基因编码区未发生突变,遗传稳定性较高,ICP46基因编码区有一处氨基酸由天冬氨酸突变为酪氨酸。研究表明,通过病毒的连续传代,病毒致细胞病变的速度加快,病毒对大口黑鲈的致病性减弱,病毒的毒力有所下降,毒力下降的原因可能是编码ICP46蛋白的氨基酸发生突变,且不同地区LMBV毒株毒力基因差异主要集中在TNFR上。
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王丛旭
潘晓艺
周可欣
穆雪娇
姚嘉赟
蔺凌云
赵建华
沈锦玉
关键词:  大口黑鲈  大口黑鲈蛙虹彩病毒  体外传代  毒力基因    
Abstract: The challenge test was conducted in largemouth bass (Micropterus salmoides) with body weight of (14±2)g to investigate the virulence of largemouth bass ranavirus (LMBV) in different generations. The growth kinetics of the LMBV virus were established with different titers by tissue culture infectious dose (TCID50) method, and the viral load was collected in tissue samples 1, 6, 12, 24, 36, 48, 72, 96, 120, 144, and 168 h after the challenge. The whole-genome sequences of F5 and F65 were obtained by next-generation sequencing and four virulence genes were screened out for the analysis of other genes from different strains. The results showed that lethality were found to be 60% in F5, 25% in F35 and 5% in F65 after challenge with 108.5 TCID50/mL. The higher virus load levels of the virus were detected in livers, spleens, and intestines, increase in virus loads in F65 and F35 at 96 h and 48 h post challenge. No mutations in E3, TNFR and ICP18 genes were observed among F5 and F65, and ICP46 had an amino acid mutation from aspartate to tyrosine, indicating that the stabilities of LMBV were observed during its successive passages. The mutation in ICP46 was hypothesized to be involved in the minimal virulence of F65. The findings were beneficial to verify the pathogenesis of LMBV and the application of its vaccine.
Key words:  Micropterus salmoides    largemouth bass ranavirus     in vitro passage    virulence gene
               出版日期:  2023-11-06      发布日期:  2023-11-06      期的出版日期:  2023-11-06
中图分类号:  S 943  
基金资助: 浙江省财政专项(2022CZZX003);浙江省农业重大技术协同推广项目(2022XTTGSC01)
引用本文:    
王丛旭, 潘晓艺, 周可欣, 穆雪娇, 姚嘉赟, 蔺凌云, 赵建华, 沈锦玉. 体外传代对大口黑鲈蛙虹彩病毒毒株毒力的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2023, 38(4): 623-629.
WANG Congxu, PAN Xiaoyi, ZHOU Kexin, MU Xuejiao, YAO Jiayun, LIN Lingyun, ZHAO Jianhua, SHEN Jinyu. Effect of in vitro passage on virulence of largemouth bass (Micropterus salmoides) ranavirus. Journal of Dalian Ocean University, 2023, 38(4): 623-629.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-323  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2023/V38/I4/623
[1] 王玲玲, 侯天牧, 李华明, 项维, 袁汉文, 雷连成, 张付贤. 青鱼ST251型高致病性嗜水气单胞菌的毒力及药物敏感性[J]. 大连海洋大学学报, 2023, 38(4): 573-583.
[2] 杨林狄, 贾新蕾, 黄增朝, 吕静, 梁华芳, 黄郁葱. 银鼓鱼海豚链球菌的分离、鉴定及毒力基因检测[J]. 大连海洋大学学报, 2023, 38(2): 233-241.
[3] 黄华, 于广磊, 王力勇, 高雁, 张岚, 孙佰鸣, 庄焱文, 王鹤. 大菱鲆源杀鱼爱德华氏菌的分离鉴定及其毒力和耐药基因检测分析[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(6): 922-932.
[4] 王鹤, 王文豪, 黄华, 刘晓丹, 张丽文, 杨涛, 胡乐彬, 李战军. 一株大菱鲆源杀鲑气单胞菌非典型株的分离鉴定及毒力基因型[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(4): 558-567.
[5] 王赛赛, 朱莉飞, 李荣妮, 史东杰, 孙砚胜, 张欣. 复合益生菌对大口黑鲈延后繁殖性能、生理指标及仔鱼成活率的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(6): 959-965.
[6] 王鹤, 李战军, 黄华, 徐晓莹, 贺加贝, 曹亚男, 赵强. 大菱鲆源副乳房链球菌的分离鉴定及其毒力基因型[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(4): 563-572.
[7] 倪金金, 王裕玉, 徐钢春, 聂志娟, 孙毅, 李全杰, 徐跑. 养殖密度对池塘循环水养殖大口黑鲈生长、生理指标和GH、IGF-I基因表达的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(6): 805-813.
[8] 刘剑羽, 任文强, 王恒林, 张丽, 周彦锋, 徐航涛, 尤洋、. 浮式水槽养殖大口黑鲈对湖泊水环境及其容量的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(2): 266-272.
[9] 雷燕, 戚瑞荣, 崔龙波, 肖洋, 张文文, 马家好, 王雪鹏. 大口黑鲈鱼种弹状病毒病的诊断[J]. 大连海洋大学学报, 2015, 30(3): 305-308.
[10] 朱择敏, 马冬梅, 白俊杰, 樊佳佳, 廖国礼, 梁旭方. 配合饲料、冰鲜杂鱼对大口黑鲈生长和LPL基因mRNA表达的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2014, 29(4): 360-363.
[11] 雷燕, 戚瑞荣, 唐绍林, 肖洋, 马家好, 王雪鹏. 褐篮子鱼虹彩病毒病的诊断[J]. 大连海洋大学学报, 2014, 29(3): 236-240.
[12] 彭天辉, 潘连德, 唐绍林. 大口黑鲈慢性气泡病的组织病理观察以及水体分层对发病的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2013, 28(6): 578-584.
[13] 卢建峰, 白俊杰, 李胜杰, 樊佳佳, 徐浩. 大口黑鲈遗传连锁图谱的构建[J]. 大连海洋大学学报, 2011, 26(2): 138-143.
[14] 何小燕, 白俊杰, 樊佳佳, 李胜杰, 刘小林. 大口黑鲈早期生长发育规律的研究[J]. 大连海洋大学学报, 2011, 26(1): 22-26.
[15] 牛纪锋, 吴锐全, 谢骏, 王广军, 关胜军. 饲料中添加植酸酶对大口黑鲈生长和消化酶活性的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2010, 25(2): 132-136.
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