Please wait a minute...

大连海洋大学学报  2021, Vol. 36 Issue (4): 563-572    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-267
  |
大菱鲆源副乳房链球菌的分离鉴定及其毒力基因型
王鹤,李战军,黄华,徐晓莹,贺加贝,曹亚男,赵强
1.烟台市海洋经济研究院,山东 烟台 264006;2.山东省渔业发展和资源养护总站,山东 烟台 264003
Isolation, identification and virulence gene of Streptococcus parauberis from cultured turbot Scophthalmus maximus
WANG He, LI Zhanjun, HUANG Hua, XU Xiaoying, HE Jiabei, CAO Ya’nan, ZHAO Qiang
1.Yantai Marine Economic Research Institute, Yantai 264006, China; 2.Shandong Fisheries Development and Resources Conservation Center, Yantai 264003, China
下载:  HTML  PDF (4033KB) 
输出:  BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 为研究2019年山东省烟台市某大菱鲆Scophthalmus maximus养殖场出现的以突眼、腹水、红肿为主要特征的疾病发病原因,用平板划线法从患病濒死大菱鲆(体质量为195~535 g)肝、肾、脾、心等组织中分离获得1株优势菌,采用形态学观察、16S rRNA序列分析、PCR特异性扩增和人工回归感染试验等方法对优势菌进行鉴定,检测其血清型、毒力基因携带情况,并用纸片扩散法(K-B)检测分离株对23种抗生素的敏感性。结果表明:从病鱼分离获得的菌株为γ溶血的革兰氏阳性球菌,生理生化特征为能水解七叶苷,不能水解精氨酸、赖氨酸等,能利用蔗糖、甘露醇、葡萄糖产酸,不能利用枸橼酸、鼠李糖、尿素等;经16S rRNA序列比对、链球菌特异性引物扩增等鉴定其为副乳房链球菌Streptococcus parauberis;该菌株的毒力基因型为scp B--bca--bac--lmb--fbs A--cfb--cps D--pav A--bib A+-sip+-cyl E--hyl B+;将分离菌株制备成6.3×107、6.3×108、6.3×109、6.3×1010 CFU/mL 4个浓度,腹腔注射健康大菱鲆,得到菌株对受试鱼的半致死浓度(LD50)为6.9×108 CFU/mL;药敏试验显示,该菌株对β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、多肽类、利福霉素类等6类14种抗生素类药物敏感,对氨基糖苷类、磺胺类及呋喃类等3类6种抗生素耐药,对诺氟沙星、强力霉素、多粘菌素B中度敏感。本研究中首次报道了中国鱼源副乳房链球菌自然感染发病,可为鱼源副乳房链球菌分子特性研究、致病机理、药物防治等提供科学参考。
服务
把本文推荐给朋友
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章
王鹤,李战军,黄华,徐晓莹,贺加贝,曹亚男,赵强
关键词:  大菱鲆  副乳房链球菌  分离鉴定  药敏试验  毒力基因    
Abstract: In order to explore the causes of diseases characterized by exophthalmos and sepsis in turbot Scophthalmus maximus with body mass of(195-535)g farmed in Yantai, Shandong Province in 2019, predominant bacterial strains were isolated from moribund individual tissues including kidney, spleen,and brain, and identified by morphological observation, 16S rRNA gene sequence analysis, and specific PCR amplification.Genetic characteristics of the isolated strain were analyzed by virulence genes, and the susceptibility of the isolated strain to 10 categories including 23 antimicrobial dugs was determined using Kirby-Bauer diffusion method.The results showed that the strains isolated from the visceral tissues as Gram-positive cocci named as BH2-4 was identified as Streptococcus parauberis by the physiological and biochemical characteristics of non-hemolytic, acid from sucrose, mannitol, glucose, without being produced from citrate, rhamnose, hydrolysed aesculin, and by 16S rRNA sequence alignment and specific amplification of Streptococcus.The virulence genotype was found to be scp B--bca--bac--lmb--fbs A--cfb--cps D--pav A--bib A+-sip+-cyl E--hyl B+.The strain BH2-4 had median lethal concentration(LD50)of 6.9×108 CFU/mL determined in the healthy turbot injected with hormone interaperitoneally at a dose of 6.3×107, 6.3×108, 6.3×109, and 6.3×1010 CFU/mL.The strain BH2-4 was shown to be high susceptible to 6 categories and 14 antibiotics including β-lactams, quinolones, tetracyclines, macrolides, peptides and rapamycin, resistant to 3 categories and 6 antibiotics, including aminoglycosides, sulfonamides and nitrofurans, and intermediately sensitive to norfloxacin, doxycycline and polymyxin B.The findings were reported for the first time the onset of natural infection of fish-sourced Streptococcus parauberis, and the identification of its characteristics can provide basic support for the research of fish-sourced Streptococcus parauberis disease surveillance, precision prevention, and drug control.
Key words:  Scophthalmus maximu     Streptococcus parauberis    identification    susceptibility    virulence gene
               出版日期:  2021-09-07      发布日期:  2021-09-07      期的出版日期:  2021-09-07
中图分类号:  S 941.42  
  Q 938.8  
基金资助: 烟台市重点研发计划项目(2019MSGY127);山东省现代农业产业技术体系鱼类创新团队(SDAIT-12-10)
引用本文:    
王鹤, 李战军, 黄华, 徐晓莹, 贺加贝, 曹亚男, 赵强. 大菱鲆源副乳房链球菌的分离鉴定及其毒力基因型[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(4): 563-572.
WANG He, LI Zhanjun, HUANG Hua, XU Xiaoying, HE Jiabei, CAO Ya’nan, ZHAO Qiang. Isolation, identification and virulence gene of Streptococcus parauberis from cultured turbot Scophthalmus maximus. Journal of Dalian Ocean University, 2021, 36(4): 563-572.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-267  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2021/V36/I4/563
[1] 王鹤, 王文豪, 黄华, 刘晓丹, 张丽文, 杨涛, 胡乐彬, 李战军. 一株大菱鲆源杀鲑气单胞菌非典型株的分离鉴定及毒力基因型[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(4): 558-567.
[2] 郝甜甜, 许聪, 王际英, 刘财礼, 沈玉博, 李宝山, 孙永智, 黄炳山. 酶解鱼溶浆和植物精油对大菱鲆幼鱼生长、肠道消化酶活力及TOR相关基因表达的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2022, 37(3): 441-449.
[3] 李战军, 张建柏, 曹亚男, 陈坤, 刘蓬, 徐惠章, 王鹤. 鱼类副乳房链球菌病研究进展[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(6): 1059-1070.
[4] 喻大鹏, 唐怀庆, 丘金珠, 宋海霞, 梁富, 夏洪丽, 宋长江, 鲁义善. 乌鳢烂身病病原的分离鉴定及病理组织观察[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(5): 745-751.
[5] 马季, 李宝山, 王成强, 王晓艳, 乔洪金, 王际英. 植物原料替代鱼粉鱼油对大菱鲆幼鱼生长、体组成成分及生化指标的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(2): 195-206.
[6] 高延奇, 王森, 刘娟, 党慧凤, 黎睿君. 3种宿主源盾纤毛虫的分离鉴定及体外培养研究[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(2): 260-267.
[7] 吴振超, 陈玉珂, 高永生, 王森, 雷新雨, 于梦楠, 张宇柔, 张东鸣. 一株黄金鲫鱼源蜡状芽孢杆菌的筛选、鉴定及耐性研究[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(6): 883-892.
[8] 刘建男, 郭羿, 倪萍, 郭思聪, 马红丽, 陆晓岑, 叶仕根. 养殖大菱鲆暴发性疖疮病的病原分离与组织病理研究[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(5): 701-706.
[9] 衣鸿莉, 刘俊荣, 王选飞, 冷寒冰, 田元勇, 徐昙烨. 养殖大菱鲆死前应激状态对肌肉代谢与品质的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2020, 35(4): 570-576.
[10] 白杰, 周美红, 胡秀彩, 吕爱军, 叶明皓, 孙敬锋. 龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究[J]. 大连海洋大学学报, 2019, 34(6): 798-803.
[11] 王巧煌. 福建红罗非鱼源无乳链球菌的分离鉴定及其分子特征[J]. 大连海洋大学学报, 2019, 34(1): 63-69.
[12] 崔培, 盛叶婷, 杨燕菁, 孙金辉. 饲料中添加不同藻粉对非洲王子鱼生长、体色及部分生化指标的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2018, 33(6): 716-721.
[13] 叶明皓, 胡秀彩, 吕爱军, 孙敬锋, 刘小雪, 宋亚娇. 巴西龟眼炎病原菌的分离鉴定及组织病理学研究[J]. 大连海洋大学学报, 2018, 33(5): 564-569.
[14] 徐阳, 姚洪, 乔帼, 李华, 叶仕根, 黎睿君, 李强. 养殖大菱鲆感染嗜水气单胞菌的分离、毒力分析及ERIC- PCR分型[J]. 大连海洋大学学报, 2018, 33(4): 430-434.
[15] 郭羿, 叶仕根, 王诗瑶, 邢震宇, 荆笛, 高东旭, 黎睿君, 刘娟. 养殖大菱鲆红斑溃疡病病原菌的生物学特性研究[J]. 大连海洋大学学报, 2018, 33(3): 289-294.
No Suggested Reading articles found!
Viewed
Full text


Abstract

Cited

  Shared   
  Discussed