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大连海洋大学学报  2024, Vol. 39 Issue (1): 66-73    DOI: 10.16535/j.cnki.dlhyxb.2023-118
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干露及恢复对中间球海胆抗氧化能力、细胞凋亡和免疫相关基因表达的影响
林威港,孙琦,海航瑜,刘亚婷,赵鹏,常亚青,马得友*
1.大连海洋大学 农业农村部北方海水增养殖重点实验室,辽宁 大连 116023;2.上海市水产研究所,上海 200433;3.中国海洋大学 海洋生命学院,山东 青岛 266000
Effects of air exposure and recovery on antioxidant capacity, apoptosis and immune related gene expression in coelomocytes of sea urchin (Strongylocentrotus intermedius)
LIN Weigang,SUN Qi,HAI Hangyu,LIU Yating,ZHAO Peng,CHANG Yaqing,MA Deyou*
1.Key Laboratory of Mariculture &Stock Enhancement in North China’s Sea,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China;2.Shanghai Fisheries Research Institute,Shanghai 200433,China;3.College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,Qingdao 266000,China
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摘要 为研究干法运输对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)活力的影响,采用低温(4 ℃)干露胁迫12、24、36 h后再浸润恢复12 h的处理方法,测定了湿质量为(3.57±0.63 )g的中间球海胆体腔细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡情况,利用实时定量PCR分析了不同时间干露胁迫下免疫相关基因LYZTLR1及凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9在体腔细胞中的表达情况。结果表明:干露试验组海胆体腔液T-SOD活力、MDA含量和T-AOC水平随干露时间的延长呈现先升高后降低的变化趋势,干露12 h时各指标值均达到最高,随后下降,并于复水12 h时接近对照组(P>0.05);免疫相关基因LYZTLR1总体上随干露时间的延长呈先减弱后增强的表达趋势,分别在干露24、36 h时达到峰值,入水恢复12 h时两基因的表达量显著低于对照组(P<0.05);发生凋亡的体腔细胞比率随干露时间延长的变化趋势与T-AOC水平的变化趋势相似,干露12 h时达到最高值,而Caspase-3、Caspase-9基因的表达量具有时间累积效应,分别在干露24、36 h时显著高于对照组和其他处理组(P<0.05)。研究表明,中间球海胆具有一定的耐干露能力,通过抗氧化酶系统维持活性氧自由基的动态平衡,LYZ、TLR1等固有免疫分子和Caspase依赖性细胞凋亡因子在应对干露胁迫、机体维持内稳态的过程中发挥重要作用。
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林威港
孙琦
海航瑜
刘亚婷
赵鹏
常亚青
马得友
关键词:  中间球海胆  干露  抗氧化  免疫  细胞凋亡    
Abstract: To evaluate the effect of air exposure transportation on the survival of sea urchin (Strongylocentrotus intermedius), the total superoxide dismutase (T-SOD) activity, malondialdehyde (MDA) content and total antioxidant capacity (T-AOC) were determined during 12, 24 and 36 h air exposure stress and subsequent 12 h recovery, and apoptosis was detected by flow cytometry, and the expression levels of lysozyme gene LYZTLR1, Caspase-3 and Caspase-9 in coelomocytes were investigated using real-time quantitative PCR. The main results showed that the T-SOD activity, MDA content, and T-AOC level generally increased first and then decreased during exposure to air, with the maximum values observed at 12 h air exposure stress and no significant differences between control and 12 recovery (P>0.05). Air exposure had significant effects on the expression of immune related genes LYZ and TLR1, reaching the maximum values at 24 and 36 h of air exposure, which were significantly higher than those in other stress groups (P<0.05). Their expression levels after 12 h recovery following exposure times 36 h were also significantly different from those in controls (P<0.05). It was identified that the change trend of apoptosis rates was similar to that of the T-AOC levels, reaching the maximum value at 12 h air exposure. However, the expression levels of Caspase-3 and Caspase-9 genes presented significant differences between control and time intervals (P<0.05), with the maximum values observed at 24 h and 36 h of air exposure, respectively, suggesting response of the two important apoptosis-related Caspases had time cumulative effect. These findings indicated that sea urchins S.intermedius have certain ability on air exposure tolerance, using antioxidant enzyme system to conserve the dynamic balance of reactive oxygen species (ROS). Innate immune molecules such as lysozyme and TLR1, as well as Caspase dependent apoptosis, play important roles in maintaining homeostasis in response to air exposure stress.
Key words:  Strongylocentrotus intermedius    air exposure    antioxidant capacity    immune    apoptosis
               出版日期:  2024-03-13      发布日期:  2024-03-13      期的出版日期:  2024-03-13
中图分类号:  S 917.4  
基金资助: 国家重点研发计划项目(2019YFD0900405);辽宁省教育厅高等学校基本科研项目(20230059);辽宁省“兴辽英才计划”项目(XLYC2002107)
引用本文:    
林威港, 孙琦, 海航瑜, 刘亚婷, 赵鹏, 常亚青, 马得友. 干露及恢复对中间球海胆抗氧化能力、细胞凋亡和免疫相关基因表达的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2024, 39(1): 66-73.
LIN Weigang, SUN Qi, HAI Hangyu, LIU Yating, ZHAO Peng, CHANG Yaqing, MA Deyou. Effects of air exposure and recovery on antioxidant capacity, apoptosis and immune related gene expression in coelomocytes of sea urchin (Strongylocentrotus intermedius). Journal of Dalian Ocean University, 2024, 39(1): 66-73.
链接本文:  
https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/10.16535/j.cnki.dlhyxb.2023-118  或          https://xuebao.dlou.edu.cn/CN/Y2024/V39/I1/66
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