不同饲料对星斑川鲽幼鱼生长和养殖水环境的影响

孙丽慧1、2,张利民1,王际英1,李宝山1,丁立云1、2,崔立娇1、2,帅继祥1、2

(1.山东省海洋水产研究所,山东烟台264006;2.上海海洋大学水产与生命学院,上海201306)

摘要：研究了含不同质量分数的蛋白质(34.85%、40.48%、46.54%、51.54%、56.69%,记为D1、D2、D3、D4、D5组)和不同质量分数的磷(0.96%、1.16%、1.60%、2.03%,记为P0、P1、P3、P5组)的饲料对星斑川鲽Platichthys stellatus幼鱼生长、摄食、饲料利用和养殖水环境的影响。结果表明:试验鱼的增重率和特定生长率随着饲料中蛋白含量的增加而逐渐增大(P＜0.05),D4、D5组均较大;摄食率和饲料系数随着饲料中蛋白含量的增加而逐渐下降(P＜0.05),D4组最小;D4组的蛋白质效率显著高于其它各组(P＜0.05);投喂6 h和18 h后,D5组的NH+4-N和NO-2-N总排放量显著高于其它各组(P＜0.05),投喂12 h后,D5组显著高于D1～D3组(P＜0.05),而其余各组间差异均不显著(P＞0.05);蛋白水平相同时,饲料中不同的磷水平对试验鱼的增重率、特定生长率、蛋白质效率和摄食率均无显著影响(P＞0.05);投喂6、18 h后,P0组的总磷排放量显著低于其余各组(P＜0.05),投喂12 h后,P0、P1组的总磷排放量显著低于P3、P5组(P＜0.05)。

关键词：星斑川鲽;蛋白质水平;磷水平;生长;养殖水环境

氮、磷是水产养殖过程中产生的主要污染物。随着水产养殖业规模的扩大和集约化程度的提高,大量的氮、磷排放到环境中,导致水体富营养化,从而严重污染水环境。这些氮、磷主要来自残饵和动物排泄物。研究表明:投入到水中的饲料氮的利用率在30%以下,磷的利用率更低。被摄食的饲料中,有20%～25%的氮和25%～40%的磷用于生长,75%～80%的氮和60%～75%的磷以粪便、尿氮的形式排入水环境中[1-3],由此可见,饲料是造成养殖污染的关键因素之一。

星斑川鲽Platichthys stellatus隶属于鲽形目Pleuronetiformes、鲽科Pleuronectidae、星鲽属Verasper,其性情温驯,具有广温、广盐、生长快速、抗病力强等优点,适于中国大部分地区集约化养殖,且营养价值高,口感独特,可与鲑、鳟鱼类相媲美,是继牙鲆、大菱鲆之后最有发展前景的养殖鱼类之一。目前,国内外有关星斑川鲽营养及免疫学方面的研究主要集中在蛋白、脂肪、糊精的利用率[4-7]以及不同饲料加工工艺对其生长、免疫的影响[8-9]上,而有关其环境友好型配合饲料的研究少见报道。本试验中,作者研究了含不同蛋白水平的饲料和不同磷水平的饲料对星斑川鲽幼鱼的生长性能和养殖水环境的影响,旨在为星斑川鲽环境友好型配合饲料的配制提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

以鱼粉为蛋白源,用淀粉和纤维素调节蛋白质梯度,配制5个不同蛋白水平的等能饲料,分别记为D1、D2、D3、D4、D5组。所有原料粉碎过80目筛后,分析其营养成分。饲料的制作与保存参照文献[10]中的方法。各组饲料粗蛋白的实测值、饲料配方及营养水平见表1。

以鱼粉和大豆浓缩蛋白为主要蛋白源,分别在基础饲料中添加质量分数分别为0%、1%、3%和5%的磷酸二氢钙,用氯化钙调节钙平衡,配制4个不同磷水平的等氮等能饲料,分别记为P0、P1、P3、P5组。饲料的制作与保存参照文献[10]中的方法。饲料配方和营养水平见表2。

表1 添加不同蛋白水平试验饲料的配方及营养成分(干重)
Tab.1 Ingredients and approximate composition of the experimental diets containing different protein levels (in dry matter) w/%

注:1)饲料中的其它成分(均为质量分数)还有乌贼内脏粉3%,α-淀粉8.1%,面粉5.5%,复合矿物质(不含磷酸盐)2%,复合维生素1%,氯化胆碱0.5%,黏合剂0.54%,抗氧化剂0.06%;2)矿物质预混料(mg/kg饲料)中包括MgSO4·7H2O 3 568.0,NaH2PO4·2H2O 25 568.0,KCl 3 020.5,KAl(SO4)28.3,CoCl228.0,ZnSO4·7H2O 353.0,Ca-lactate 15 968.0,CuSO4·5H2O 9.0,KI 7.0, MnSO4·4H2O 63.1,Na2SeO31.5,C6H5O7Fe·5H2O 1 533.0,NaCl 100.0,NaF 4.0;3)维生素预混料(mg/kg饲料)中包括维生素A 38.0,维生素D313.2,α-生育酚210.0,硫胺素115.0,核黄素380.0,盐酸吡哆醇88.0,泛酸368.0,烟酸1 030.0,生物素10.0,叶酸20.0,维生素B121.3,肌醇4 000.0,抗坏血酸500.0。
Note:1)the other ingredients include 3%squid visceral meal,8.1%alpha-starch,5.5%wheat flour,2%mineral mixture,1%vitamin mixture, 0.5%choline chloride,0.54%binder,0.06%antioxidant.2)Mineral mixture(mg/kg diet):MgSO4·7H2O 3 568.0,NaH2PO4·2H2O 25 568.0,KCl 3 020.5,KAl(SO4)28.3,CoCl228.0,ZnSO4·7H2O 353.0,Ca-lactate 15 968.0,CuSO4·5H2O 9.0,KI 7.0,MnSO4· 4H2O 63.1,Na2SeO31.5,C6H5O7Fe·5H2O 1 533.0,NaCl 100.0,NaF 4.0.3)Vitamin mixture(mg/kg diet):38.0 retinol acetate,13.2 cholecalciferol,210.0 alpha-tocopherol,115.0 thiamin,380.0 riboflavin,88.0 pyridoxine HCl,368.0 pantothenic acid,1 030.0 niacin acid, 10.0 biotin,20.0 folic acid,1.3 vitamin B12,4 000.0 inositol,and 500.0 ascorbic acid.

组别group ingredients脱脂鱼粉defatted fishmeal原料营养成分鱼油fish oil淀粉starch纤维素灰分cellulose nutrient composition粗蛋白crude protein粗脂肪crude lipid ash 9.50 10.77 12.21 13.57 14.84 D1 D2 D3 D4 D5 42.5 50.5 58.5 66.5 74.5 54321 24.8 19.0 13.3 7.5 2.0 7.0 5.8 4.5 3.3 1.8 34.85 40.48 46.54 51.54 56.69 10.96 10.91 10.82 10.76 10.41

表2 添加不同磷水平试验饲料的配方及营养成分(干重)
Tab.2 Ingredients and approximate composition of the experimental diets containing different phosphorus levels(in dry matter)
w/%

注:1)饲料中的其它成分(均为质量分数,下同)还有脱脂鱼粉28%,大豆浓缩蛋白25%,花生粕8%,喷雾干燥血球蛋白粉2%,乌贼内脏粉4%,鱼油6%,豆油3%,面粉5%,α-淀粉8%,复合矿物质(不含磷酸盐)2%,复合维生素1%,黏合剂1%,氯化胆碱0.5%,抗氧化剂0.06%,蛋氨酸0.5%。2)矿物质及维生素预混料的组成同表1。
Note:1)the other ingredients include,28%defatted fishmeal,25%soy protein concentrate,8%peanut meal,2%Spray-dried blood meal,4% squid visceral meal,6%fish oil,3%soybean oil,5%wheat flour,8%alpha-starch,2%mineral mixture(phosphate free),1%vitamin mixture, 1%binder,0.5%choline chloride,0.06%antioxidant,and 0.5%L-methionine.2)mineral and vitamin premix are the same as Table 1.

组别group ingredients淀粉starch原料磷酸二氢钙calcium dihydrogen phosphate氯化钙calcium chloride nutrient composition粗蛋白crude protein营养成分粗脂肪crude lipid灰分ash钙calcium磷phosphorus 0.96 1.16 1.60 2.03 P0 P1 P3 P5 4.06 3.43 2.19 0.94 0135 1.88 1.51 0.75 0 53.62 54.21 54.67 53.88 12.81 12.20 12.67 12.90 10.50 10.41 10.77 11.65 2.22 2.01 1.93 1.86

1.2 方法

1.2.1 试验动物及饲养管理 养殖试验在山东省海洋水产研究所全封闭的水循环系统中进行。试验鱼由荣成港西水产养殖场提供,选用种质来源相同、大小均匀、健康无病、体质量为(54.52± 0.23)g的星斑川鲽幼鱼,随机分为9个处理,分别记为D1、D2、D3、D4、D5、P0、P1、P3、P5,每个处理设3个重复,每个重复放养20尾鱼,分别放于绿色圆柱形养殖桶(70 cm×80 cm)中,水深控制在40 cm左右,试验期为54 d。正式试验前将星斑川鲽先在养殖系统中驯养2周。养殖期间,水温为(19.0±0.5)℃,pH为7.8～8.2,盐度为28～30,DO＞5 mg/L,NH-N和NO-N二者含量均小于0.1mg/L。每天饱食投喂两次(08:00,16:30)。投喂30 min后,从系统自带的排水口将残饵排出,记录颗粒,计算残饵量。

1.2.2 样品的收集与分析 养殖试验结束后,停止喂食24 h,称鱼体总质量,测量鱼体体长,用于生长指标的计算。然后将试验鱼放回原桶中,停止

系统水循环,采用封闭式养殖,分别在投喂后6、12、18 h取一次水样,用于水体中NH-N和NO-N含量以及总磷的测定。

饲料常规成分分析均采用AOAC(2000)方法。其中,采用FOSS定氮仪(KjeltecTM2100)测定粗蛋白,采用索氏抽提仪测定粗脂肪,在马福炉(550℃)中灼烧6 h,用失重法测定灰分。采用次溴酸盐氧化法(GB17378.4-1998)测定NH-N和NO-N的总含量,采用过硫酸钾氧化法(GB11893-89)测定总磷。

1.2.3 生长指标的计算

式中:W0为试验初始鱼体质量(g);Wt为试验结束时鱼体质量(g);F为摄食饲料质量(g);P为饲料中粗蛋白的含量;t为养殖时间(d);W1为去内脏后的鱼体质量(g);L为鱼体长(cm)。

1.3 数据处理

试验所得数据采用SPSS 16.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),当处理之间差异显著(P＜0.05)时,用Duncan检验进行多重比较分析。所有数据均以平均值±标准差(Means±S.D.)形式表示。

2 结果

2.1 饲料中不同蛋白水平对幼鱼生长性能的影响

从表3可见:随着饲料中蛋白水平的增加,星斑川鲽幼鱼的增重率和特定生长率逐渐增大,当饲料中蛋白水平达到或超过51.54%(D4、D5组)时,增重率和特定生长率均较高,D4和D5组显著高于其它3组(P＜0.05),但二者之间无显著性差异(P＞0.05);随着饲料中蛋白水平的增加,星斑川鲽幼鱼的摄食率和饲料系数呈现出减少的趋势,D4组最低(P＜0.05),D4和D5组显著低于其它3组(P＜0.05);D4组的蛋白质效率显著高于其它各组(P＜0.05),其余各组之间均无显著差异(P＞0.05);饲料中不同蛋白水平对星斑川鲽幼鱼的成活率和肥满度均无显著影响(P＞0.05)。

表3 饲喂含不同蛋白水平的饲料对星斑川鲽生长性能的影响(n=3)
Tab.3 Effect of dietary protein levels on growth performance in starry flounder

注:同列中标有不同小写字母者表示组间差异显著(P＜0.05);标有相同小写字母者表示组间差异不显著(P＞0.05),下同。
Note:The means with the different letters within the same column are significant differences at the 0.05 probability level;and the means with the same letters within the same column are not significant differences,et sequentia.

组别group初体质量/g initial body weight末体质量/g final body weight成活率/% survival rate增重率/% WGR特定生长率/ (%·d-1) SGR摄食率/% FI饲料系数FCR蛋白质效率/% PER肥满度/% CF 2.80±0.16 2.71±0.10 2.73±0.17 2.74±0.05 2.70±0.13 D1 D2 D3 D4 D5 54.52±0.23 54.52±0.23 54.52±0.23 54.52±0.23 54.52±0.23 88.06±0.84a94.19±1.45b97.69±1.24c107.88±1.43d108.77±1.28d100 100 100 100 100 61.57±1.54a72.83±2.67b79.25±2.27c97.95±2.63d99.59±2.34d0.89±0.02a1.01±0.03b1.08±0.02c1.26±0.02d1.28±0.02d1.18±0.03a1.16±0.01a1.10±0.01b1.06±0.00c1.06±0.01c1.43±0.01a1.25±0.04b1.14±0.02c0.95±0.02d0.95±0.00d2.11±0.02a2.11±0.07a2.05±0.03a2.23±0.05b2.05±0.01a

2.2 饲料中不同磷水平对幼鱼生长性能的影响

从表4可见:饲料中不同磷水平对星斑川鲽幼鱼的增重率、特定生长率、成活率、饲料系数、蛋白质效率和肥满度均无显著影响(P＞0.05),P0和P5组的摄食率稍高于P1和P3组,但差异并不显著(P＞0.05)。

2.3 饲料中蛋白水平对幼鱼养殖水环境的影响

从表5可见:投喂6 h和18 h后,D5组的NH-N和NO-N总排放量显著高于其它各组(P＜0.05),其余组间差异均不显著(P＞0.05);投喂12 h后,D5组显著高于D1～D3组(P＜0.05),其余组间差异均不显著(P＞0.05)。

2.4 饲料中磷水平对幼鱼养殖水环境的影响

从表6可见:投喂6 h后,P0组的总磷排放量显著低于其余各组(P＜0.05),P1组也显著低于P3、P5组(P＜0.05);投喂12 h后,P0、P1组的

总磷排放量显著低于P3、P5组(P＜0.05),其余组间差异均不显著(P＞0.05);投喂18 h后,P0组的总磷排放量显著低于其余各组(P＜0.05),其余组间差异均不显著(P＞0.05)。

表4 饲喂含不同磷水平的饲料对星斑川鲽生长性能的影响(n=3)
Tab.4 Effect of dietary phosphorus levels on growth performance in starry flounder

组别group初体质量/g initial body weight末体质量/g final body weight成活率/% survival rate增重率/% WGR特定生长率/ (%·d-1) SGR摄食率/% FI饲料系数FCR蛋白质效率/% PER肥满度/% CF P0 P1 P3 P5 54.68±0.09 54.58±0.07 54.55±0.20 54.54±0.21 100.51±4.88 99.27±2.88 99.98±2.29 102.29±2.49 100 100 100 100 83.84±9.19 81.89±5.11 83.26±3.55 87.55±4.75 1.09±0.09 1.07±0.05 1.08±0.03 1.12±0.05 1.00±0.05 0.97±0.03 0.96±0.03 1.00±0.04 0.90±0.06 0.89±0.04 0.88±0.01 0.86±0.01 2.08±0.12 2.07±0.08 2.09±0.02 2.15±0.04 2.83±0.09 2.87±0.13 2.90±0.10 2.98±0.12

表5 饲喂含不同蛋白水平饲料的星斑川鲽幼鱼NH-N和NON的排放量(n=3)
Tab.5 Total NH-N and NO-N excretion in starry flounder fed the diets containing different protein levelsmg/(L·kg)

组别group取样时间time/h 1218 D10.38±0.00a0.79±0.02a1.37±0.06 6 a D20.39±0.02a0.83±0.10a1.47±0.04abD30.39±0.02a0.85±0.14a1.62±0.14bD40.39±0.01a0.97±0.09ab1.63±0.09bD50.53±0.01b1.15±0.17b2.14±0.06c

表6 饲喂含不同磷水平饲料的星斑川鲽幼鱼总磷的排放量(n=3)
Tab.6 Total Phosphorus excretion in starry flounder fed the diets containing different phosphorus levels
μmol/(L·kg)

组别group取样时间time/h 1218 P01.33±0.07a2.74±0.37a6.41±1.05 6 a P11.69±0.08b3.43±0.15a8.51±0.57bP32.35±0.13c4.34±0.38b8.99±0.75bP52.46±0.11c4.55±0.38b9.38±0.17b

3 讨论

3.1 不同蛋白水平对星斑川鲽幼鱼生长和养殖水环境的影响

饲料蛋白含量从34.85%增加到51.54%时,星斑川鲽幼鱼的增重率和特定生长率显著提高,而从51.54%增加到56.69%时,增重率和特定生长率增加均不显著,说明在本试验条件下,饲料中蛋白质的质量分数为51.54%时,星斑川鲽幼鱼的生长性能最佳。这与牙鲆Paralichthys olivaceus[11]、拟庸鲽Pleuronectes platessa[12]和大西洋庸鲽Hippoglossus hippoglossus[13]对蛋白质的需要量基本一致。

有研究认为,饲料中的能量水平能影响鱼类的摄食率。如Luo等[14]和Wang等[15]分别报道了随着饲料中能量水平的升高,石斑鱼Epinephelus coioides和军曹鱼Rachycentron canadum的摄食率逐渐下降。本试验中,饲喂不同蛋白含量的等能饲料时,随着饲料中粗蛋白含量的增加,星斑川鲽幼鱼的摄食率也呈现下降的趋势,到蛋白含量为51.54%的饲料组时趋于稳定,说明星斑川鲽幼鱼摄食首先满足蛋白质的需要。这与Peres等[16]报道的舌齿鲈Dicentrarchus labrax摄食率与饲料中的蛋白水平相关而不与能量水平相关的结果相似。本研究中,随着饲料粗蛋白含量的增加,饵料系数不断下降,当蛋白水平达到鱼体最佳生长需求时便趋于稳定,这与Lee等[17]对大菱鲆的研究结论一致。

在评价水生态环境的多项指标中,pH、COD、NH-N、NO-N、PO-P等都是很重要的因子[18]。蛋白质是决定鱼类生长最关键的营养物质,饲料中蛋白含量不足时会影响鱼类的生长,而蛋白质含量过高,则会导致排泄物含氮量升高,加大对水环境的污染[19-20]。影响鱼类氮排泄的因素较多,如鱼体质量、温度、饲料成分以及投饲方式等[21-23]。Cai等[24]与蒋克勇等[25]的研究表明,饲料中过高的蛋白含量对虹鳟及大菱鲆的增重率影响不显著,但显著增加了NH-N的排泄量。本试验结果与上述研究结果相似,即随着饲料中蛋白含量的增加,星斑川鲽幼鱼NH-N和NO-N的排放量逐渐升高,D5组投喂6 h和18 h后NH-N和NO-N总排放量显著高于其它4组,投喂12 h后排放量显著高于D1、D2和D3组,但与D4组差异不显著。按照投喂18 h后万吨鱼年排泄NH-N和NO-N的总量计算,D1、D2、D3、D4和D5组每年分别排泄1 333.47、1 430.80、1 576.80、1 586.53、2 082.93 t NH-N和NON。由此可直观地看出,当饲料中蛋白含量超过满足星斑川鲽需求的含量时,会极大地增加其NH-N和NO-N的排放,严重污染水环境。

3.2 不同磷水平饲料对星斑川鲽幼鱼生长和养殖水环境的影响

本试验中,饲料中不同的磷水平对星斑川鲽幼鱼的增重率、特定生长率、蛋白质效率、摄食率和肥满度均无显著性影响。这与Asgard等[26]对大西洋鲑Salmo salar的研究结果相似,但与Elangovan等[27]、Lee等[28]对虎皮鲃Barbus tetrazona和许氏平鮋Sebastes schlegeli的研究结果不同。据报道,饲料中磷含量不足时,可导致脂肪β氧化受阻,脂肪作为能源的利用减少,会造成鱼体脂肪积累[29],部分蛋白质会作为能量被利用[30],导致试验鱼生长率和饲料利用率降低。本试验中,没有添加磷酸盐组星斑川鲽幼鱼的生长并未受到影响,可能是由于试验饲料所用原料中磷的含量相对较高,基本可以满足星斑川鲽幼鱼生长的需求。高磷会加速脂肪氧化[31],造成代谢紊乱,影响生长,甚至使鱼死亡。如游文章等[32]、Ogino等[33]对草鱼Ctenopharyngodon idellus和虹鳟Salmo gairdneri的研究结果也是如此。但Takeuchi等[29]的研究表明,饲料中磷的质量分数高达1.88%时并未发现鲤死亡,且增重率较高。李爱杰等[31]的研究表明,饲料中磷的质量分数高达2.378%时,也未发现荷沅鲤死亡,且生长势头较好,饲料系数较低。本试验中,饲料中磷的质量分数高达2.03%时,未见幼鱼死亡、增重率下降和饵料系数升高等现象。这可能是不同鱼类对磷的耐受力不同所致。

磷是鱼类生长所必需的营养元素之一,但鱼类对以鱼粉为蛋白源的常规饲料中磷的利用率较低,大部分未被鱼类利用的磷以粪便等排泄物的形式排入养殖水体中。磷的排放量与饲料中磷的含量和存在形式有着密切关系。林仕梅等[34]报道,河蟹总磷的排泄率随饲料非植酸磷水平的升高而呈上升趋势。崔奕波等[35]对金鱼的研究表明,随着饲料磷水平的增加,金鱼总磷排放量显著升高。本研究结果与上述研究结果类似,P0组星斑川鲽幼鱼在投喂6 h和18 h后总磷排放量显著低于其它各组, P0组投喂12 h后总磷排放显著低于P3和P5组,但与P1组无显著性差异。如果按投喂18 h后万吨鱼年排泄总磷计算,则P0、P1、P3和P5组每年分别排泄6239.07、8283.07、8759.03、9 129.87 t总磷。由此可见,当饲料中总磷含量超过满足星斑川鲽需求的含量时,会极大地增加总磷的排放,严重污染水环境。从生长性能看,各组之间差异并不显著。本试验条件下,饲料中总磷的质量分数为0.96%时,星斑川鲽幼鱼获得了最佳的生长性能。

综上所述,在本试验条件下,推荐饲料蛋白含量为51.54%左右。当饲料原料中磷含量达到0.96%时,可考虑不向配合饲料中添加磷酸盐。

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Effects of different diets on growth of juvenile starry flounder Platichthys stellatus and on aquatic environment

SUN Li-hui1,2,ZHANG Li-min1,WANG Ji-ying1,LI Bao-shan1, DING Li-yun1,2,CUI Li-jiao1,2,SHUAI Ji-xiang1,2
(1.Shangdong Marine Fisheries Research Institute,Yantai 264006,China;2.Fisheries and Life Science College,Shanghai Ocean University, Shanghai 201306,China)

Abstract：Effects of different diets containing dietary protein levels of 34.85%(D1),40.48%(D2),46.54% (D3),51.54%(D4),and 56.69%(D5)and phosphorus levels of 0.96%(P0),1.16%(P1),1.60%(P3), and 2.03%(P5)on growth performance,feeding rate,feed utilization and aquatic environment in juvenile starry flounder Platichthys stellatus were studied.The results showed that the weight gain rate(WGR)and specific growth rate(SGR)were found to be increased with increase in dietary protein(P＜0.05),the maximum in D4 group. Feed intake(FI)and feed conversion ratio(FCR),however,were decreased with increase in the dietary protein (P＜0.05),the minimum in D4 group.There were significantly higher protein efficiency ratio(PER)in D4 group than those in other groups(P＜0.05).The significantly higher total NH+4-N and NO-2-N contents in the water after feeding 6 and 18 hours were observed in D5 group than those in other groups(P＜0.05).Total NH+4-N and NO-2-N contents after feeding 12 hours were higher in D5 group than those in D1,D2,D3,and D4 groups,without significant difference.At the same protein level,different dietary phosphorus levels showed no effect on WGR,SGR, PER and FI(P＞0.05).Total P content in the water after feeding 6 and 18 hours was lower in P0 group than that in other groups(P＜0.05),and total P content after feeding 12 hours were lower in P0 and P1 groups than that in P3 and P5 groups(P＜0.05).

Key words：Platichthys stellatus;protein level;phosphorus level;growth;aquatic environment

中图分类号：S963.71;S949

文献标志码：A

文章编号：2095-1388(2011)06-0544-06

收稿日期：2011-01-19

基金项目：现代农业产业技术体系(nycytx-50);国家科技部农转资金项目(03EFN213700155);山东省科技发展计划项目;山东省水生动物营养与饲料泰山学者岗位经费资助项目(TS 200651036)

作者简介：孙丽慧(1984-),女,硕士研究生。E-mail:miduo1984422@126.com

通信作者：张利民(1956-),男,研究员。E-mail:ytzlm@139.com